简述沙门氏杆菌的分离与鉴定

1.标本:根据伤寒病的病程采取不同标本,通常第1~2周取血液,第2~3周取粪便或尿液。急性肠炎取患者吐泻物和剩余食物。败血症取血液作培养。 2.分离培养与鉴定:血液应先接种胆汗肉汤增菌;粪便和经离心的尿沉渣可直接接种肠道杆菌选择性培养基。37℃经18~24小时培养后,挑选无色半透明的不发酵乳糖的菌落涂片、染色、镜检,并接种双糖含铁或三糖含铁培养基。疑为沙门氏杆菌时,作生化反应和玻片凝集试验鉴定。 可溶性抗原,协助临床早期诊断肠热症。......阅读全文

简述蛋白质组的鉴定方法

  如蛋白质鉴定结果、蛋白质的亚细胞定位、蛋白质在不同条件下的表达水平等信息。目前应用最普遍的数据库是NRDB和dbEST 数据库。NRDB由SWISS2PROT 和GENPETP 等几个数据库组成,dbEST是由美国国家生物技术信息中心(NCBI)和欧洲生物信息学研究所(EBI)共同编辑的核酸数据

简述肺炎双球菌的鉴定方式

  1.荚膜肿胀试验(capsule swelling test) 亦称为Quellung试验。新鲜的标本悬液与等量不稀释的肺炎球菌分型诊断血清混合后,覆以盖玻片,油镜下观察。标本中肺炎球菌若与同型免疫血清相遇,荚膜将显著增大。  2.凝集试验(agglutination test) 将可疑肺炎球菌

蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案

一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离:取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积

大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定

实验材料 大黄试剂、试剂盒 氯仿硫酸盐酸冰醋酸缓冲液氢氧化钾乙酸乙酯蒸馏水仪器、耗材 分液漏斗玻璃棒磷酸氢钙柱酒精灯烘箱水浴锅回流瓶

粪便标本肠道致病菌的分离鉴定流程实验

仪器、耗材 病人粪便标本S-S琼脂平板双糖铁培养基伤寒杆菌和志货菌多价诊断血清载波片实验步骤 1. 标本采集:用无菌棉签取新鲜、无尿液混入的病人粪便(脓血或黏液部分更好),立即送检。2. 将标本直接接种于S-S琼脂平板上,作分区划线分离,置37℃恒温箱培养18~24小时。3. 挑取无色透明或半透明菌

土壤微生物的分离、纯化及初步鉴定

实验概要分离、纯化及初步鉴定土壤中的拮抗植物病原菌的放线菌。实验原理土壤是微生物的“天然培养基”,也是最丰富的菌种资源库,我们可以从中分离出众多放线菌,尤其是可以从耕作土壤中筛选出拮抗植物病原菌的放线菌。以耕作有武运粳和苏沪香粳的土壤为样品,应用稀释涂布平板法分离各种微生物。菌落计数后,通过菌落形态

粪便标本肠道致病菌的分离鉴定流程实验

仪器、耗材病人粪便标本S-S琼脂平板双糖铁培养基伤寒杆菌和志货菌多价诊断血清载波片实验步骤1. 标本采集:用无菌棉签取新鲜、无尿液混入的病人粪便(脓血或黏液部分更好),立即送检。2. 将标本直接接种于S-S琼脂平板上,作分区划线分离,置37℃恒温箱培养18~24小时。3. 挑取无色透明或半透明菌落接

大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定

概述大黄记载于《神农本草经》等许多文献中,用于泄下、健胃、清热、解毒等。 自古以来,大黄在植物性泻下药中占有重要位置,是一位很早就被各国药典所收载的世界性生药。大黄的种类繁多,优质大黄是蓼科植物掌叶大黄(Rheum palmatclm L),大黄(R. officinale Baill)及唐古特

蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案

一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离:取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积

植物细胞的质壁分离与分离复原

一、原理 生长的植物细胞是一个渗透系统,活细胞的原生质及其表层具有分别透性,原生质层内部含有一个大液泡,具有一定的溶质势。当细胞与外界高渗溶液接触时,细胞内的水分外渗,原生质随着液泡一起收缩而发生质壁分离,其后,当与清水(或低渗溶液)接触,或当外面的溶质进入时,具有液泡的原生质体就又吸水而发生

RNA分离与分析实验_分离RNA

实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60

细菌的分离与培养

实验目的: 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料: 菌种、普通琼脂  平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容: 一、平板划线接种法(分离培养法) 原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌  在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长

mRNA的分离与纯化

 真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)

mRNA的分离与纯化

[实验原理]真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或

RNA的分离与纯化

包括Northern杂交在内的许多分子生物学实验均是以RNA为材料,mRNA的制备也需要一定质量的总RNA样品,RNA的数量、纯度与完整性将直接影响这些实验的结果。RNA中rRNA的数量最多,占总量的80%~85%;tRNA及核内小分子RNA占15%~20%;mRNA仅占1%~5%。由于各种rRNA

线粒体的分离与观察

一、实验目的1. 初步掌握用差速离心法分离大鼠肝细胞线粒体的方法。2. 学习并掌握高速离心机和匀浆器的使用方法。二、实验原理线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。

核酸的分离与纯化

从细胞中提取核酸后,仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程,也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时,为防止核酸大分子的变性降解,必须在0~4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用,是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍,现普遍采用加入去污剂或加入EDTA、8-羟基喹啉、柠

mRNA的分离与纯化

实验概要mRNA的分离与纯化实验原理  真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性

药物的分离与纯化

  药物的分离纯化是从合成或天然来源中获得的药物混合物中,将目标化合物纯化为高纯度的过程。这是药物研发和制造过程中非常重要的步骤,因为高纯度的药物确保了其安全性和有效性。  药物的分离纯化通常涉及以下一般步骤:  初步纯化:从合成反应或天然来源提取液中,初步分离目标化合物。这可以通过各种分离技术实现

细菌的分离与培养

实验目的: 掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。 实验材料: 菌种、普通琼脂  平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。 实验内容: 一、平板划线接种法(分离培养法) 原理:通过在平板上划线,将混杂的细菌  在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长

RNA质量检测与鉴定

方法一、检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的,我们只看OD260/OD280(Ratio,R)。1.82.0时,我们认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的,不过要注意,当你用Tris作为缓冲

高速逆流色谱分离与鉴定鹿药中黄酮类化合物

摘 要 采用高速逆流色谱(HSCCC)与其它色谱联用的方法分离纯化鹿药中的化学成分,得到5个黄酮类化合物: 5, 7, 3′, 4′2 四羟基232甲氧基282甲基黄酮(1) 、82甲基木犀草素(2) 、3′2 甲氧基木犀草素(3) 、木犀草素(4)和槲皮素(5) ,它们均为首次自该种及该属植物中分

中药化学成分的提取、分离和鉴定的方法

(一)溶剂提取法:    1.溶剂提取法的原理:溶剂提取法是根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性质,选用对活性成分溶解度大,对不需要溶出成分溶解度小的溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。当溶剂加到中草药原料(需适当粉碎)中时,溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内,溶

简述巨噬细胞的分离和纯化

  1、取2~3公斤重的家兔,耳缘静脉注射10ml空气处死动物或注射2ml(含130mg)戊巴比妥麻醉动物。仰卧固定,消毒胸部,剪开胸壁。以下过程注意无菌操作。小心从环状软骨下方剪下气管,分离心脏和血管,取出肺,剪去脂肪和结缔组织。用无菌纱布小心擦净肺表面,称重。  2、分离肺泡巨噬细胞:用夹子夹住

简述大豆分离蛋白的存在形式

  大豆蛋白质是由一系列氨基酸通过肽键结合而成的高分子有机聚合物,它主要由清蛋白和球蛋白组成,其中清蛋白约占5%,球蛋白约占90%。  大豆分离蛋白存在形式的分类方法有两种,一种是根据沉降指数的分类法。大豆蛋白质经高速离心后,按照离心沉降指数分为2S、7S、11 S、15S共4级,其中7S和11S为

简述液液萃取分离的原理

液-液萃取是指两个完全不互溶或部分互溶的液相接触后,一个液相中的溶质经过物理或化学作用另一个液相,或在两相中重新分配的过程。   在大抄部分情况下,一种液相是水溶剂,另一种液相是有机溶剂。溶质,在不同的溶zhidao剂中溶解度相差很大,通过液相混合,溶质从一种液相转移到另一种液相。原始溶液中溶质含量

简述液液萃取分离的原理

液-液色谱法与液-液萃取法的基本原理相同,均服从分配定律:k=c固/c液k值大的组分,保留时间长,后流出色谱柱。液-液色谱法的作用机制:溶质在两相间进行分配时,在固定液中溶解度较小的组分较难进入固定液,在色谱柱中向前迁移速度较快;在固定液中溶解度较大的组分容易进入固定液,在色谱柱中向前迁移速度较慢,

简述液液萃取分离的原理

液-液萃取是指两个完全不互溶或部分互溶的液相接触后,一个液相中的溶质经过物理或化学作用另一个液相,或在两相中重新分配的过程。   在大部分情况下,一种液相是水溶剂,另一种液相是有机溶剂。溶质,在不同的溶剂中溶解度相差很大,通过液相混合,溶质从一种液相转移到另一种液相。原始溶液中溶质含量很少。萃取过程

蛋白质组鉴定技术简述

如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE,那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定。在这里,我们不考虑传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达。并不是因为这些方法无效,而是因为它们通常耗时、耗力,不

质粒DNA的提取与电泳鉴定

质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法:碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2mlLB培养基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5