双向免疫扩散试验的方法介绍

1.将已溶化的1%琼脂盐水管放56~60℃水浴箱中平衡温度备用。 2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5~4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板。 3.凝固后,将打孔模板置于琼脂板下,然后用打孔器打孔,根据不同需要可制成三角型、方阵型或梅花型。本次实验采用三角型,即每一个三角型的三个孔为一组。(因本次实验所制备的琼脂板均以载玻片为底板故根据其大小只能采用三角型同时每一琼脂板也只能制成两组。否则,如采用方阵型或梅花型则因琼脂板边缘琼脂厚度不够而使周边各孔所加抗原或抗体量不足或溢出,如制成三角型三组,因各孔相距过近相互渗透扩散而难于正确判定结果)。 4.用微量加样器加抗体各10μl。各组所余两孔各按抗原1、2为一组,3、4为二组,5、6为三组,分别各加入10μl。注意每加一样品均需更换加样器塑料吸头,以防止交叉现象影响实验结果。 5.作好记录,放湿盒中,置37℃温箱,24小时后观察结果。......阅读全文

双向免疫扩散试验的方法介绍

1.将已溶化的1%琼脂盐水管放56~60℃水浴箱中平衡温度备用。2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5~4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板。 3.凝固后,将打孔模板置于琼脂板下,然后用打孔器打孔,根据不同需要可制成三角型、方阵型或梅花型。本次实验采用三角型,即每一个三角型的三个孔为一组。(

双向免疫扩散试验的方法介绍

  1.将已溶化的1%琼脂盐水管放56~60℃水浴箱中平衡温度备用。  2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5~4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板。 3.凝固后,将打孔模板置于琼脂板下,然后用打孔器打孔,根据不同需要可制成三角型、方阵型或梅花型。本次实验采用三角型,即每一个三角型的三个孔为

双向免疫扩散试验的方法介绍

中文名称双向免疫扩散试验英文名称double immunodiffusion test定  义一种分析鉴定抗原、抗体纯度和抗原特异性的试验。即抗原和抗体分子在凝胶板上扩散,二者相遇并达到最适比例时形成沉淀线。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

双向免疫扩散试验的方法原理

双向扩散法是指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散而形成一定类型沉淀线的方法。沉淀线的特征与位置不仅取决于抗原抗体的特异性及相互间浓度比例,而且与其分子大小及扩散速度相关。当抗原抗体存在多种系统时,可呈现多条沉淀线以至交叉反应。

双向免疫扩散试验的实验方法

1.将已溶化的1%琼脂盐水管放56~60℃水浴箱中平衡温度备用。2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5~4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板。 3.凝固后,将打孔模板置于琼脂板下,然后用打孔器打孔,根据不同需要可制成三角型、方阵型或梅花型。本次实验采用三角型,即每一个三角型的三个孔为一组。(

双向免疫扩散试验的原理

双向扩散法是指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散而形成一定类型沉淀线的方法。沉淀线的特征与位置不仅取决于抗原抗体的特异性及相互间浓度比例,而且与其分子大小及扩散速度相关。当抗原抗体存在多种系统时,可呈现多条沉淀线以至交叉反应。

双向免疫扩散试验的定义

中文名称双向免疫扩散试验英文名称double immunodiffusion test定  义一种分析鉴定抗原、抗体纯度和抗原特异性的试验。即抗原和抗体分子在凝胶板上扩散,二者相遇并达到最适比例时形成沉淀线。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

双向免疫扩散试验所需材料

生理盐水1%琼脂管(每管约4ml) 载玻片打孔器及打孔模板 微量加样器及塑料吸头抗体及抗原1、2、3、4、5、6。 湿盒

双向免疫扩散试验的结果分析

(1)融合性沉淀弧,说明两孔中抗原相同,为同一性反应。(2)两沉淀线独自形成并形成交叉,说明两孔中的抗原完全不同,为非同一性反应。(3)融合性沉淀弧出现支线,或同时有另一条或两条沉淀线,说明两孔中抗原有相同部分又有不同部分,此为部分同一性反应。

双向免疫扩散试验的原理简介

  双向免疫扩散试验(double immunodiffusion test)是一种分析鉴定抗原、抗体纯度和抗原特异性的试验,即抗原和抗体分子在凝胶板上扩散,二者相遇并达到最适比例时形成沉淀线。  双向扩散法是指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散而形成一定类型沉淀线的方法。  沉淀线的特征与位

关于双向免疫扩散试验的结果说明

  (1)融合性沉淀弧,说明两孔中抗原相同,为同一性反应。  (2)两沉淀线独自形成并形成交叉,说明两孔中的抗原完全不同,为非同一性反应。  (3)融合性沉淀弧出现支线,或同时有另一条或两条沉淀线,说明两孔中抗原有相同部分  又有不同部分,此为部分同一性反应。

双向免疫扩散试验的实验结果分析

(1)融合性沉淀弧,说明两孔中抗原相同,为同一性反应。(2)两沉淀线独自形成并形成交叉,说明两孔中的抗原完全不同,为非同一性反应。(3)融合性沉淀弧出现支线,或同时有另一条或两条沉淀线,说明两孔中抗原有相同部分又有不同部分,此为部分同一性反应。

双向免疫扩散实验

抗原、抗体在凝胶中扩散,并进行沉淀反应,叫做免疫扩散反应(immunodiffusion)。将抗原与其相应抗体放在凝胶(如琼脂)平板中的邻近孔内,使它们互相扩散,当扩散到两者浓度比例合适的部位相遇时,即出现乳白色的沉淀线,称为双向免疫扩散试验。此方法是由 Ouchterlony 所提出,因此又称 O

双向免疫扩散实验

实验方法原理 双向免疫扩散试验不仅可对抗原或抗体进行定性鉴定和测定效价,还可对抗原或抗体进行纯度分析和同时对两种不同来源的抗原或抗体进行比较,分析其所含成分的异同。若在两孔内有两对或两对以上的抗原抗体系统,就能产生相应数量的分离的沉淀线(图 1)。因此,利用此法可进行抗原或抗体的纯度分析。图 1 双

双向免疫扩散与单向免疫扩散的区别

双向免疫扩散是指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散,彼此相遇后形成一定类型的特异性沉淀线。沉淀线的特征与位置不仅取决于抗原抗体的特异性及相互间比例,而且与其分子大小及扩散速度相关。当抗原、抗体存在多个系统时,可呈现多条沉淀线乃至交叉反应。依据沉淀线的形态、条数、清晰度及位置可了解抗原或抗体的若

双向免疫扩散的临床应用

1)血清学诊断2)免疫化学分析:沉淀线位置主要与抗原、抗体两者浓度比例有关,沉淀线靠近抗原空,提示抗体含量高;靠近抗体空,提示抗原含量多。分子量大扩散慢,扩散圈小,形成的沉淀线弯向分子量大的一边。如二者分子量相对,则形成直线。3)抗体效价滴定:固定抗原浓度,稀释抗体;或抗原抗体双方做不同稀释,经自由

双向免疫扩散的临床应用

1)血清学诊断2)免疫化学分析:沉淀线位置主要与抗原、抗体两者浓度比例有关,沉淀线靠近抗原空,提示抗体含量高;靠近抗体空,提示抗原含量多。分子量大扩散慢,扩散圈小,形成的沉淀线弯向分子量大的一边。如二者分子量相对,则形成直线。3)抗体效价滴定:固定抗原浓度,稀释抗体;或抗原抗体双方做不同稀释,经自由

双向免疫扩散法测定抗血清效价实验—双向免疫扩散法

双向免疫扩散法可用于:(1)诊断疾病;(2)测定抗体的效价。实验方法原理将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中,使两者互相扩散,当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时,沉淀线在两孔的中间。如抗体过量,沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量,沉淀线靠近抗体孔。此

双向免疫扩散基本原理

双向免疫扩散(Double immunodiffusion)基本原理:指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散,彼此相遇后形成一定类型的特异性沉淀线。

琼脂免疫扩散试验方法

  材料与试剂  1、琼脂粉  2、平皿  3、打孔器  4、生理盐水或其他缓冲液,可加1/万的硫柳汞或叠氮钠防腐。  操作方法  1、称取一定量的琼脂粉,按1%左右(0.8%~1.5%)的比例加入生理盐水或缓冲液,水浴煮沸融化20min。  2、将融化的琼脂倒入平皿内,使厚度2mm~3mm。自然冷

双向免疫扩散法测定抗血清效价

实验方法原理 将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中,使两者互相扩散,当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时,沉淀线在两孔的中间。如抗体过量,沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量,沉淀线靠近抗体孔。此技术可以测定抗血清的效价。此外,根据沉淀融合的情况,还可以

临床化学检查方法介绍双向琼脂扩散试验介绍

双向琼脂扩散试验介绍:  双向琼脂扩散试验常用于定性检测,也可用于半定量检测。将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶板上相邻近的小孔内,让它们相互向对方扩散。当两者在最适当比例处相遇时,即形成一条清晰的沉淀线。根据有否出现沉淀线,可用已知的抗体鉴定未知的抗原,或用已知的抗原鉴定未知的抗体。临床常用本方法检查原

关于双向琼脂扩散试验的检查情况介绍

  一、双向琼脂扩散试验的正常值:  沉淀线靠近抗原孔,则提示抗体含量大;靠近抗体孔,则提示抗原含量较多;不出现沉淀线则表明抗体或抗原的缺乏或抗原过剩;另外,如出现多条沉淀线,则说明抗原和抗体皆不是单一的成分。因此,可用于鉴定抗原或抗体的纯度。  二、双向琼脂扩散试验的注意事项:  不合宜人群:无特

双向凝胶电泳的技术方法介绍

  双向凝胶电泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年发明的,原理是第1向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,具有相同等电点的蛋白质无论其分子大小,在电场的作用下都会用聚焦在某一特定位置即等电点处;第2向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的

双向凝胶电泳试验样品制备的相关介绍

  双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。近年来经过多方面改进已成为研究蛋白质组的最有使用价值的核心方法。  双向电泳成功的关键在于建立一套有效的、可重复的样品制备方法。样品制备的影响

关于双向琼脂扩散试验的基本信息介绍

  双向琼脂扩散试验常用于定性检测,也可用于半定量检测。将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶板上相邻近的小孔内,让它们相互向对方扩散。当两者在最适当比例处相遇时,即形成一条清晰的沉淀线。根据有否出现沉淀线,可用已知的抗体鉴定未知的抗原,或用已知的抗原鉴定未知的抗体。临床常用本方法检查原发性肝癌患者血清中的甲

免疫扩散技术的方法及主要类型

抗原与抗体成分的一种定性与半定量分析方法,通常采用半固态透明琼脂凝胶作为支持介质。置于孔中的抗原和抗体相向扩散,在两者浓度比例适当处相遇后如能结合形成复合物则形成沉淀线。分为单向扩散(single immunodiffusion)、放射状扩散(radial immunodiffusion)和双向扩散

凝胶内沉淀试验:双向扩散试验

双向扩散试验:在琼脂内抗原和抗体各自向对方扩散,在最恰当的比例处形成抗原抗体沉淀线,根据沉淀线的位置、形状以及对比关系,可对抗原或抗体作出定性分析。双向扩散试验也分为试管法和平板法。1、试管法:在含有抗原的溶液和含有抗体琼脂中间,加一层普通琼脂,让下层抗体和上层抗原向中间自由扩散,在抗原、抗体浓度最

双向拉伸试验机

一、适用范围及标准:1、主要用于各种金属、非金属及复合材料的拉伸、压缩、弯曲、剪切、剥离、撕裂等力学性能指标的测试。系统采用微机闭环控制,具有宽广准确的加载速度和测力范围,对载荷、位移的测量和控制有较高的精度和灵敏度。同时还适用于大中专院校进行教学演示工作。试验机主机的设计具有外形美观、操作方便、性

抗血清的鉴定方法

1.抗体特异性的鉴定常用双向免疫扩散法。(1)粗抗原及纯抗原之间皆有一条沉淀线,且两者互相融合,则已产生单价特异性抗体;(2)若纯化抗原出现一条,而粗抗原出现多条线,且一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接,需去除杂抗。(3)若不出现沉淀线,表示免疫失败。2.抗体效价的测定颗粒性抗原采用凝集试验,可溶性抗原