WIKI资讯
WIKI资讯
蛋白质沉淀的定义：蛋白质分子凝聚从溶液中析出的现象称为蛋白质沉淀(precipitation)，变性蛋白质一般易于沉淀，但也可不变性而使蛋白质沉淀，在一定条件下，变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质沉淀的方法：盐析法 ——多用于各种蛋白质和酶的分离纯化；在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出，这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。各种蛋白质盐析时所需的盐浓度及pH不同，故可用于对混和蛋白质组分的分离。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白，饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来，盐析沉淀的蛋白质，经透析除盐，仍保证蛋白质的活性。调节蛋白质溶液的pH至等电点后，再用盐析法则蛋白质沉淀的效果更好。盐析法分为两类，第一类叫Ks分段盐析法，在一定PH和温度下通过改变离子强度实现，用于早期的粗提液；第二种叫b分段盐析法，在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现，用于后期进......阅读全文
蛋白质沉淀技术 实验步骤 一、AS 沉淀 1.原理 虽然有些其他盐类也可以用做沉淀剂，但是 AS
在过去的 100 年里，虽然人们已经使用过多种不同的沉淀方法，但是 AS 沉淀一直都得到了最广泛的应用，尤其对于酸性蛋白质。此外，PEI 沉淀的应用也正日益普及。接下来，将会对这两种方法进行详细的讨论, 随后对其他几种沉淀方法做简单概述，并针对沉淀过程中沉淀的处理和纯化效率的最大化提出一般性建议。实
在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂： 1．盐析法 多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。 2．有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化，有时也用于蛋白质沉淀。 3．等电点沉淀法 用于氨基酸、
(4) 小心倒出上清液，并测量其体积。依据表 20.1 所示的以百分饱和度从低到高的顺序加入 AS 以确定所需 AS 的质量。继续伴以快速的搅拌并缓慢加入 AS，以避免局部形成较高盐浓度，之后静置 30 min, 使其形成沉淀。(5) 如步骤 (3) 中所示进行离心。尽量去除上清液, 若之前已经仔细
一、AS 沉淀1.原理虽然有些其他盐类也可以用做沉淀剂，但是 AS 的特点突出，故而最具有应用价值。AS 可很好地稳定蛋白质的结构、可溶性极好、相对价廉、纯物质容易获得，且 25℃ 时其饱和溶液的密度 (4.1InoVU1O=I.235 g/cm3) 低于另一种盐析剂磷酸氢二钾（3mol/L，(0=
3.策略 C 的基本操作程序(1) 配制 10%(V/V)[5%(m/V)] 的 PEI 储存液。PEI(WV) 常以 50%(m/V) 的黏稠液体状态存在（来自于 MPBiochemicals 的 PEI, 其相对分子质量 Mw=50000?100000, 也可采用其他来源，如 Sigma 和
蛋白质沉淀(precipitation)是蛋白质分子凝聚从溶液中析出的一种现象，变性蛋白质一般易于沉淀，但在一定的条件下，变性的蛋白质也可不发生沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸（如三氯醋酸）沉淀等。
Porvair Sciences蛋白质沉淀板（P3），也称为蛋白质碰撞板。专-利设计，样品制备之前有效去除不需要的蛋白质。 P3微孔板具有良好的流速、低非特异性结合和出色的去除效率。此外，孔板的清洁系统可确保工作流程中无泄漏。 P3蛋白质沉淀技术如何工作？P3板通过添加诸如甲醇或乙腈之类的溶剂来使溶
名称 上清液 0.5ml血浆中不同沉淀剂使蛋白沉淀的% PH值 0.20.4 0.60.8 1.0 1.5 2.03.0 4.0 10%三氯醋酸 1.4-2.0 99.7 99.3 99.6 99.5 99.5 99.7 99.8 99.8 99.8 6%高氯酸
多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化 有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数，导致具有表面水层的生物大分子脱水，相互聚集，最后析出。 该法优点在于： 1）分辨能力比盐析法高，即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀； 2）沉淀不用脱盐，过滤较为容易； 3）在生化制备中应