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蛋白质沉淀方法盐析法

在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出,这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。各种蛋白质盐析时所需的盐浓度及pH不同,故可用于对混和蛋白质组分的分离。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白,饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来,盐析沉淀的蛋白质,经透析除盐,仍保证蛋白质的活性。调节蛋白质溶液的pH至等电点后,再用盐析法则蛋白质沉淀的效果更好。盐析法分为两类,第一类叫Ks分段盐析法,在一定PH和温度下通过改变离子强度实现,用于早期的粗提液;第二种叫b分段盐析法,在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现,用于后期进一步分离纯化和结晶。影响盐析的因素包括:蛋白质浓度、离子强度和类型、PH值、温度等。针对温度这一条,需要强调:在低离子强度或纯水中,蛋白质溶解度在一定范围内随温度增加而增加。但在高浓度下,蛋白质、酶和多肽类物质的溶解度随温度上升而下降。在一般情况下,蛋白质对......阅读全文

蛋白质沉淀方法-盐析法

  在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出,这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。各种蛋白质盐析时所需的盐浓度及pH不同,故可用于对混和蛋白质组分的分离。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白,饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来,盐析沉

蛋白质盐析法的原理

蛋白质颗粒表面带有很多极性基团,如-NH+、-COO-、-CONH2、-OH、-SH等,和水有高度亲和性,当蛋白质与水相遇时,蛋白质吸水,在蛋白质颗粒外面形成一层密度较厚的水膜(水化层)。水膜的存在使蛋白质颗粒之间不会碰撞,因此蛋白质在水溶液中比较稳定而不易沉淀,是一种比较稳定的亲水胶体。蛋白质能形

蛋白质沉淀方法-有机溶剂沉淀法介绍

  多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化  有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数,导致具有表面水层的生物大分子脱水,相互聚集,最后析出。  该法优点在于:  1)分辨能力比盐析法高,即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀;  2)沉淀不用脱盐,过滤较为容易;  3)在生化制备中应

蛋白质沉淀方法-等电点沉淀法介绍

  此法单独应用较少,多与其它方法结合使用  两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低,不同的两性电解质具有不同的等电点,以此为基础可进行分离。如工业上生产胰岛素时,在粗提液中先调PH8.0去除碱性蛋白质,再调PH3.0去除酸性蛋白质。利用等电点除杂蛋白时必须了解制备物对酸碱的稳定性,不然盲目使用十

蛋白质的盐析分离法

一、蛋白质盐析分离的原理:蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值时,其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,zui后经

蛋白质盐析分离法介绍

摘要 : 盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,最后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。一、蛋白质盐析分离的原理:蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值

蛋白质的盐析分离法

一、蛋白质盐析分离的原理:蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值时,其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,最后经离心

蛋白质沉淀方法-重金属盐沉淀法简介

  常用于抢救误服重金属盐中毒的病人  许多有机物质包括蛋白在内,在碱性溶液中带负电荷,能与金属离子形成沉淀。根据有机物与它们之间的作用机制,可分为羧酸、胺及杂环等含氮化合物类,如铜锌镉;亲羧酸疏含氮化合物类,如钙镁铅;亲硫氢基化合物类,如汞银铅。蛋白质-金属离子复合物的重要性质是它们的溶解度对溶液

冻干机冻干蛋白质及盐析法

在冷冻干燥过程中 ,加热温度高、升温速率快将使干燥时间缩短 ,但同时过高的加热温度和过快的升温速率将导致蛋白质失去活性。以玻璃态存在的保护剂呈现出复杂的特性 ,当低于解链温度时 ,玻璃态物质具有粘度大和易脆的特点。当温度超过解链温度 ,玻璃态物质变软 ,随着干燥的进行 ,不断变型以至形成坍塌而失去活

盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂盒使用说明

主要用途 盐析法大量蛋白浓缩沉淀试剂是一种旨在使过于稀释的大容量蛋白质溶液,通过改良的高浓度饱和化学盐类物质的作用,非特异性地将所有蛋白质从溶液中结晶析出沉积,而最大程度获得浓缩型蛋白成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种蛋白后续操作,包括蛋白纯化、蛋白电泳