关于DNA探针的基本内容介绍
DNA探针是以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体。DNA探针将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针。可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。 DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获得DNA探针数量很多,有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针。这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。这些DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。以细菌为例,分子杂交技术用于细菌的分类和菌种鉴定比之G+C百分比值要准确的多,是细菌分类学的一个发展方向。加之分子杂交技术的高敏感性,分子杂交在临床微生物诊断上具有......阅读全文
关于体液免疫的基本内容介绍
1.参与的细胞:吞噬细胞、T细胞、B细胞、记忆细胞、浆细胞 2.免疫过程(如图《体液免疫的过程》所示) 感应阶段:抗原进入机体后,除少数可以直接作用于B细胞外,大多数抗原都要经过吞噬细胞的摄取和处理将其内部隐藏的抗原决定簇暴露出来。然后,吞噬细胞将抗原呈递给T细胞,刺激T细胞产生淋巴因子。这
关于随体的基本内容介绍
随体(satellite)是位于染色体末端的、圆形或圆柱形的染色体片段, 通过次缢痕与染色体主要部分相连,主要由异染色质组成,含高度重复的DNA序列,不具有常染色质的功能活性。随体的形态大小在染色体上是恒定的,因此是识别染色体的又一重要形态特征。带有随体的染色体称为Sat-染色体。 指在染色体
关于靶细胞的基本内容介绍
靶细胞是指能识别某种特定激素或神经递质并与之特异性结合而产生某种生物效应的细胞。细胞除通过相邻的连接物质外,更多的是通过分泌各种化学物质来调节其他细胞的代谢与功能。激素由特殊分化的内分泌细胞分泌,通过血液循环或组织液扩散,作用于特定的靶细胞,调节其代谢与功能。靶细胞中有一种特殊的糖蛋白分子,称受
关于糖脂相连的基本内容介绍
糖基酰基甘油的分子中,糖基和甘油的一个羟基以糖苷键相连,甘油的其他两个羟基各与一个脂肪酸相连;这类糖脂在动植物组织中均有发现。植物中还曾发现极少量的固醇糖苷。细菌中,除大分子脂多糖外,常产生各种结构的糖脂。包括:糖基甘油──糖和脂肪酸形成的脂类,其糖基部分多为D-甘露糖和D-葡萄糖;含糖磷脂──
关于农杆菌的基本内容介绍
农杆菌是指生活在植物根表面依靠由根组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。农杆菌主要有两种:根癌农杆菌和发根农杆菌。根癌农杆菌能在自然条件下趋化性地感染140多种双子叶植物或裸子植物的受伤部位,并诱导产生冠瘿瘤。引发冠瘿瘤的原因是,Ti质粒上的T-DNA上有8个左右的基
关于同源重组的基本内容介绍
我们可以看到,同源重组一般都在染色体内仍按DNA序列的原来排列次序。但是在所谓位点特异性重组(site-specific recombination)中,DNA节段的相对位置发生了移动,从而得到不同的结果─DNA序列发生重排。位点特异性重组不依赖于DNA顺序的同源性(虽然亦可有很短的同源序列),
关于衣原体的基本内容介绍
衣原体是介于细菌和病毒之间的微生物。它寄生于人体细胞内,含脱氧核糖核酸和核糖核酸。在其生活周期中,有原体和始体两种形态。原体体积较小(直径为200 ~ 300nm),细胞质致密,具有高度传染性。它进入敏感细胞后,体积变大(直径可达800^1 200nm),成为始体,细胞浆变得疏松或呈网状,因而始
关于吸附法的基本内容介绍
吸附就是固体或液体表面对气体或溶质的吸着现象。由于化学键的作用而产生的吸附为化学吸附。如镍催化剂吸附氢气,化学吸附过程有化学键的生成与破坏,吸收或放出的吸附热比较大,所需活化能也较大,需在高热下进行并有选择性。物理吸附是由分子间作用力相互作用而产生的吸附。如活性炭对气体的吸附,物理吸附一般是在低
关于显性标记的基本内容介绍
分子标记中,显性和共显性,对等位基因而言,即指所扩增的PCR产物(DNA片段)。像RAPD、ISSR等显性标记,PCR产物无法确切确定,因而无法区分杂合体(heterozygosity),只能按有带无带进行分析,记录为0/1;而SSR等共显性标记,则能区分杂合体,即二倍体及多倍体染色体DNA上的
关于质量性状的基本内容介绍
1、质量性状(discrete characters )指属性性状,能观察但不能量测的性状,是指同一种性状的不同表现型之间不存在连续性的数量变化,而呈现质的中断性变化的那些性状。按所属学科不同有三项不同定义。 2、在单基因遗传病中,基因型和表现型之间的对应关系较为明显,因此这一性状的变异在群体
关于基因诊断的基本内容介绍
某些受精卵(种质)或母体受到环境或遗传等的影响,引起的下一代基因组发生了有害改变,产生了(体质)疾病,为了有针对性的解决和预防,故需要通过实验室的基因诊断、基因分析才能得到确认。又称DNA诊断或分子诊断。用目前人类对基因组的认识和分子遗传学数据,检查分子结构水平和表达水平,对普通遗传病或家族遗传
关于ATP酶的基本内容介绍
ATP酶又称为三磷酸腺苷酶,是一类能将三磷酸腺苷(ATP)催化水解为二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根离子的酶,这是一个释放能量的反应。在大多数情况下,能量可以通过传递而被用于驱动另一个需要能量的化学反应。这一过程被所有已知的生命形式广泛利用。 ATP是三磷酸腺苷的英文缩写符号,它是各种活细胞内普遍
关于外显率的基本内容介绍
外显率(penetrance)等于100%时称为完全外显(complete penetrance),低于100%时则为不完全外显(incomplete penetrance)或外显不全。譬如说,玉米形成叶绿素的基因型AA或Aa,在有光的条件下,应该 100%形成叶绿体,基因A的外显率是100%;
关于多巴胺通路的基本内容介绍
多巴胺神经元位于中脑与间脑交接处,有3条通路。第一条是黑质-纹状体通路,第二条是中脑-边缘通路,第三条是中脑-皮质通路。 (1)黑质-纹状体通路 黑质-纹状体通路起自黑质致密带,投射至尾核-壳核,该通路激活能增加运动,动物黑质损害能引起运动迟缓和反应时间延长。抗精神病药阻断多巴胺D2受体,表
关于cDNA探针的意义的介绍
逆转录现在已成为一项重要的分子生物学技术,广泛用于基因的克隆和表达。从逆转录病毒中提取的逆转录酶已商品化,最常用的有AMV逆转录酶。利用真核Mrna3’末端存在一段聚腺苷酸尾,可以合成一段寡聚胸苷酸(oligo(dT))用作引物,在逆转录酶催化下合成互补于mRNA的cRNA链,然后再用RNase
DNA片段探针的应用实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 杂交液洗膜液仪器、耗材 注射器超声仪水浴锅实验步骤 1. 用5~20 ml 杂交液Ⅰ依次浸泡10~20张硝酸纤维素滤膜。滤膜装入杂交袋中,加入足够的杂交液,密封后42℃预杂交1 h。 2. 往带螺盖的试管中,加入放射性探针和2 mg 超声波处理的鲱鱼精DNA,煮沸1
DNA探针的标记实验
核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据标记物不同,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀
DNA探针的标记实验
实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。
DNA探针的标记实验
探针标记法 实验方法原理 分子杂交是核酸链以碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一
DNA片段探针的应用实验
甲酰胺法 水溶液中杂交 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
DNA探针的技术优势
①DNA探针多克隆在质粒载体中,制备方法简便;②DNA探针相对RNA探针(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探针的标记方法较成熟,可用同位素或非同位素标记,有多种方法可供选择。
DNA探针的种类及其特点
核酸探针按性质划分可分为基因组 DNA 探针、cDNA 探针、RNA 探针和人工合成的寡核苷酸探针等几类。作为诊断试剂,较常使用的是基因组 DNA 探针和 cDNA 探针。其中,前者的应用最为广泛,它的制备可通过酶切或聚合酶链反应(PCR)从基因组中获得特异的 DNA 后将其克隆到质粒或噬菌体载体中
DNA探针检测法的原理
原理:碱基互补配对。。探针:DNA单链-化学连接的标记基团探针和目标DNA(经过加热,分成单链)混合,探针结合的目标DNA就会被标记
DNA探针原位杂交
1、4—6微米切片,用防脱片胶(多聚赖氨酸)处理过的玻片贴附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2(趁热脱蜡) 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml),37℃消化1
关于基因探针标记的方法介绍
探针的标记方式有放射性标记和非放射性标记。标记物质有放射性元素(如32P等)和非放射性物质(如生物素、地高辛等)。32P是最常用的核苷酸标记同位素,被标记的dNTP本身就带有磷酸基团,便于标记。特点是比活性高,可达9000Ci/mmol;发射的β射线能量高。用它标记的探针自显影时间短,灵敏度高。
关于盐效应的基本内容的介绍
往弱电解质的溶液中加入与弱电解质没有相同离子的强电解质时,由于溶液中离子总浓度增大,离子间相互牵制作用增强,使得弱电解质解离的阴、阳离子结合形成分子的机会减小,从而使弱电解质分子浓度减小,离子浓度相应增大,解离度增大,这种效应称为盐效应(salteffect)。当溶解度降低时为盐析效应(salt
关于萃取法的基本内容的介绍
利用溶质在互不相溶的溶剂里溶解度的不同,用一种溶剂把溶质从另一溶剂所组成的溶液里提取出来的操作方法。例如,用四氯化碳从碘水中萃取碘,就是采用萃取的方法。 萃取分离物质的操作步骤是:把用来萃取(提取)溶质的溶剂加入到盛有溶液的分液漏斗后,立即充分振荡,使溶质充分转溶到加入的溶剂中,然后静置分液漏
关于亲水性的基本内容的介绍
带有极性基团的分子,对水有大的亲和能力,可以吸引水分子,或溶解于水。这类分子形成的固体材料的表面,易被水所润湿。具有这种特性都是物质的亲水性。 亲水性指分子能够透过氢键和水形成短暂键结的物理性质。因为热力学上合适,这种分子不只可以溶解在水里,也可以溶解在其他的极性溶液内。一个亲水性分子,或说分
关于结构蛋白的基本内容的介绍
结构蛋白赋予生物成分以刚度和刚度。大多数结构蛋白是纤维蛋白。例如,胶原蛋白和弹性蛋白是结缔组织(例如软骨)的关键成分,而角蛋白存在于坚硬或丝状结构中,例如头发,指甲,羽毛,蹄和一些动物的外壳。一些球状蛋白也可以发挥结构功能,例如肌动蛋白和微管蛋白是球形的,可作为单体溶解,但会聚合形成构成细胞骨架
关于丝氨酸的基本内容的介绍
丝氨酸,因最早来源于蚕丝而得名,也称β羟基丙氨酸,即L-2-氨基-3-羟基丙酸 。丝氨酸是中性脂肪族含羟基氨基酸,是一种非必需氨基酸, 化学式为C3H7NO3,分子量105.09,熔点496~501 K,易溶于水,几乎不溶于非极性溶剂。 丝氨酸在脂肪和脂肪酸的新陈代谢及肌肉的生长中发挥着作用,