自剪接

自剪接(self-splicing)出现在稀少的内含子组成核酸酶,核酸酶在只有RNA的情况下代替了剪接体的功能。自剪接的内含子有两种,称为I型及Ⅱ型。I型及Ⅱ型内含子以与剪接体类似的方式进行剪接,但不需要任何蛋白质。这种相似性使人相信这些内含子与剪接体在演化过程上有着关连。自剪接亦可能是非常古老,且可能出现在一个未有蛋白质的核糖核酸世界。虽然以下两种剪接可以在没有蛋白质的情况下进行,但依然会额外的使用5个RNA分子及超过50多个蛋白质,并水解多个三磷酸腺苷(ATP)分子。使用 ATP 是要提高剪接mRNA的准确性,避免出现错误。......阅读全文

纯化剪接因子SR蛋白实验

实验方法原理 前体 mRNA ( pre-mRNA ) 剪接因子 SR(serine/argininc rich,富含丝/苏氨酸)蛋白家族是将剪接体组装到前体 mRNA 上的重要参与者。SR 蛋白是重要的剪接因子,该家族的不同成员可以在体外或体内指导选择性剪接位点的选择。实验材料 超纯硫酸铵

什么是蛋白质剪接?

蛋白质剪接是特定蛋白质的分子内反应,其中从前体蛋白质中去除内部蛋白质片段(称为内含肽),并在两侧连接C端和N端外部蛋白质(称为内含肽)。前体蛋白的剪接点主要是半胱氨酸或丝氨酸,它们是含有亲核侧链的氨基酸。现在已知的蛋白质剪接反应不需要外源性辅助因子或能源,如三磷酸腺苷(ATP)或三磷酸鸟苷(GTP)

酵母剪接体分析实验(二)

4. 设备(1) 液氮 (N2)。(2) 离心机,匀浆器,旋转真空浓缩仪。(3) 各种试管、离心管。(4) 玻璃板:一块为 26.5 cm 高、20.2 cm 宽、0.4 cm 厚。带凹口的玻璃板尺寸同前一块,但带一 2.2 cm 深、16.3 cm 宽的凹口。(5) 聚四氟乙烯垫片和梳子:垫片和梳

分子遗传学词汇基因剪接

中文名称:基因剪接外文名称:Gene splicing别    名:重组DNA定    义:基因剪接是通过一些酶学操作使一条DNA分子与另一条DNA分子相连。即在mRNA成熟期,切除基因的内含子,连接基因的外显子的过程,称为基因剪接。而天然基因的某些片段被合成的DNA链所取代或连成整体的过程称为基因

发现重复基因剪接信号演化特点

  近日,中科院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所孔祥银课题组张振国等人发现基因重复后基因剪接信号演化特点,以及这些变化对基因新结构形成的影响,该成果在线发表在《基因组生物学》(Genome Biology)杂志上。   在物种进化过程中,基因重复是经常发生的。那么基因重复后,基

调控玉米性状-可变剪接“火”起来

  最近,中国农业大学国家玉米改良中心田丰教授团队与杨小红教授团队合作研究,以368份玉米自交系未成熟籽粒为实验材料,定位玉米种全基因组水平QTL(数量性状位点),全面解析了其可变剪接的调控机制,并为研究表型变异提供了重要线索。相关论文近日发表在《植物细胞》杂志上。   可变剪接,这个早在上世纪就

关于基因剪接的历史发现介绍

  1972年,加州大学旧金山分校的微生物学家赫伯特·伯耶(Herbert Boyer)、斯坦福大学的研究员史坦利·科恩(Stanley Cohen)在火奴鲁鲁参加学术会议时在一家现成食品店里遇到了对方。他们一边吃着熏牛肉三明治,一边构思除了一个开创了现代生物技术产业的实验。回到加州后,这两个人成功

分子遗传学词汇tRNA剪接

中文名称:tRNA剪接英文名称:tRNA splicing定  义:切除前体tRNA中的内含子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

调控玉米性状-可变剪接“火”起来

  可变剪接,这个早在上世纪就被提出的概念,在近几年的研究中,又“火”了起来。科学家们发现,可变剪接不仅丰富蛋白质组多样性,还在生物体内起着重要的调控作用。  可变剪接是什么?这项研究有了什么新发现?是怎样得出来的?实验中的难点是什么?对之后的研究有怎样的借鉴意义?科技日报就此采访了该研究团队。  

酵母剪接体分析实验(一)

实验方法原理 前接体是真核细胞核内剪接 mRNA 前体的大分子核糖核蛋白复合体,它由 5 种 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白组成,每一种 snRNP 由一个 snRNA 和几种蛋白质构成。试剂、试剂盒 Tris HCI 溶液EDTATE乙酸钠SDSRNA 的匀浆缓冲液RNA 的溶解缓冲液T

METTL16介导通过阻碍对剪接位点的识别从而抑制RNA剪接

  RNA m6A修饰是目前RNA表观遗传领域研究的热点,对于m6A的甲基化酶和去甲基化酶,相信大家也是耳熟能详。事实上,大名鼎鼎的METTL3仅能结合约22%的m6A位点,这提示还有其他m6A甲基化酶。确实,在METTL3之后,METTL16也被鉴定为m6A甲基化酶,但是它的底物远不如METTL3

自噬性死亡的自噬机制

细胞为维持正常新陈代谢,其生长过程始终都有自噬现象,这已在形态学中得到证实。但自噬的消长受多种因素影响,营养缺乏、胰高血糖素可诱导自噬,胰岛素抑制自噬,细胞肿胀也同胰岛素一样有抑制自噬的作用,它们的作用点在于改变氨基酸的浓度。当氨基酸浓度降低时,自噬启动可产生氨基酸,保证器官成活;相反则自噬被抑制。

自噬的自噬发生过程

在此过程中,自噬体的形成是关键,其直径一般为 300 ~ 900 nm,平均 500 nm,囊泡内常见的包含物有胞质成分和某些细胞器如线粒体、内吞体、过氧化物酶体等。与其他细胞器相比,自噬体的半衰期很短,只有 8 min 左右,说明自噬是细胞对于环境变化的有效反应。由于自体吞噬较少受到关注,而且很难

溶酶体自噬与自溶的区别

溶酶体消化的主要功能。有消化底来源有三种:①自噬(自噬),细胞内原有的物质吞噬作用;有害物质②通过形成所提供的吞噬小体(吞噬体)吞噬作用; ③通过内吞作用(内吞作用)提供的营养素。因为吞噬作用和胞吞作用被从细胞中提供,在统称为异体吞噬(heterophagy)的物质这两种来源的转消化的物质被消化。后

自噬的自噬的研究方法

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激2)Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chloride

自噬体的自噬发生条件

自噬体(autophgosome)自噬溶酶体(autolysosome)当自噬体与溶酶体融合后,形成自噬溶酶体。自噬性溶酶体是一种自体吞噬泡, 作用底物是内源性的,即细胞内的蜕变、破损的某些细胞器或局部细胞质。这种溶酶体广泛存在于正常的细胞内,在细胞内起“清道夫”作用,作为细胞内细胞器和其它结构自然

RNA剪接和基因沉默之间的联系

为了识别在RNA干涉(RNAi)和微RNA介导的基因表达调控中所涉及的因素,Gary Ruvkun及其同事对86种真核生物进行了系统发生分析,所得到的候选物再用转录和蛋白组相互作用数据进行Bayesian分析,来估计它们参与小RNA调控的概率。所识别出的小RNA辅因子中大约一半是RNAi沉默所必需的

RNA剪接和基因沉默之间的联系

为了识别在RNA干涉(RNAi)和微RNA介导的基因表达调控中所涉及的因素,Gary Ruvkun及其同事对86种真核生物进行了系统发生分析,所得到的候选物再用转录和蛋白组相互作用数据进行Bayesian分析,来估计它们参与小RNA调控的概率。所识别出的小RNA辅因子中大约一半是RNAi沉默所必需的

RNA剪接和基因沉默之间的联系

为了识别在RNA干涉(RNAi)和微RNA介导的基因表达调控中所涉及的因素,Gary Ruvkun及其同事对86种真核生物进行了系统发生分析,所得到的候选物再用转录和蛋白组相互作用数据进行Bayesian分析,来估计它们参与小RNA调控的概率。所识别出的小RNA辅因子中大约一半是RNAi沉默所必需的

内含肽剪接调控以作为药物“开关”

  含肽作为药物靶标的研究于内含肽这种可调控的作用机制,Bonnanl51为,通过改变剪接结构域上、下游的序列,自主设蛋白质内含肽,可以调控蛋白质的剪接。因为包含内含肽的前体蛋白无活性的,所以那些能阻断剪接的化学物质将具有重要的药用价值。由于目前在动物和人体正常新陈代谢中没有发现内含肽的报道,作为药

致癌新机制:“选择性剪接”

  由于正常细胞周期基本机制(如复制、DNA修复和细胞死亡)遭到破坏,在世界范围内,癌症已成为死亡的主要原因之一。  在基因组测序技术的帮助下,如今的生物医学研究人员已经可以鉴定不同肿瘤患者体内的常见遗传突变。  通常情况,人们认为只有DNA突变会导致癌症。9月21日《Cell Reports》杂志

剪接体功能研究取得新突破

在国家自然科学基金等项目的资助下,广东省科学院南繁种业研究所教授王振宇、副研究员顾进宝团队联合海南波莲生物有限公司副研究员安保光,在剪接体功能研究方面取得新突破:基因编辑技术揭示水稻OsSm基因家族的作用。相关成果近日发表于《植物杂志》(The Plant Journal)。水稻SM基因突变体的发育

《自然》:科学家破解DNA中“剪接密码”

  加拿大多伦多大学教授布雷登·费雷率领的研究团队发现,在DNA中一个隐藏的“剪接密码”可用来解释为什么有限数目的人体基因能够产生出如此巨大数量的遗传信息。相关文章将发表在5月6日出版的《自然》(Nature)杂志上。  该发现揭开了遗传学研究中最主要的奥秘之一。科学家可据此来解

Science挑战传统认知,剪接的多样性

  大多数的哺乳动物蛋白编码基因都可能有许多种转录物,它们是由纳入外显子变化所导致。过去人们认为所谓的选择性剪接(alternative splicing)事件在物种间有可能是保守的,然而发表在12月20日《科学》(Science)杂志上的两项研究表明大多数并非如此。研究人员甚至认为,高度的选择

杨力受邀发表MolecularCell综述解析可变剪接

中国科学院上海生命科学研究院计算生物学研究所杨力研究组受邀在《分子细胞》(Molecular Cell)发表了题为RNA structure switches RBP binding 的专评文章,对该刊同期发表的一项题为RNA sequence context effects measured in

酵母前体mRNA剪接提取物实验

真核生物前体 mRNA ( pre-mRNA ) 的剪接分为两步,即先从前体切去内含子,然后将两个外显子连接在一起形成成熟的  mRNA。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使

酵母前体mRNA剪接提取物实验

            实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。

PNAS:RNA剪接调控研究方面新的进展

  近日,PNAS在线发表了中科院上海生科院营养科学研究所冯英研究组的最新研究进展。该研究揭示了RNA二级结构在剪接调控中的新机制,并首次证明了MYC调控蛋白FUBP1同样具有剪接调控活性。   RNA剪接是连接转录与翻译的重要桥梁,也是生物体蛋白质多样性的重要保证。在真核生物中,mRNA前体被剪

简述RNA剪接和基因沉默之间的联系

  为了识别在RNA干涉(RNAi)和微RNA介导的基因表达调控中所涉及的因素,Gary Ruvkun及其同事对86种真核生物进行了系统发生分析,所得到的候选物再用转录和蛋白组相互作用数据进行Bayesian分析,来估计它们参与小RNA调控的概率。所识别出的小RNA辅因子中大约一半是RNAi沉默所必

Nature:针对RNA转录和剪接的新观点!

  细胞通常产生区室来控制重要的生物功能。细胞核就是一个很好的例子;它被核膜包围着,容纳着基因组。然而,细胞还含有未被膜包围的较为短暂存在的封闭室,就像水中的油滴。在过去两年中,这些称为液滴状“凝聚物(condensates)”的封闭室已越来越多地被认为是控制基因的主要参与者。如今,在一项新的研究中