膜片钳技术的基本介绍
1976年德国马普生物物理研究所Neher和Sakmann创建了膜片钳技术（patch clamp recording technique）。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的或多个的离子通道分子活动的技术。它和基因克隆技术（gene cloning）并架齐驱，给生命科学研究带来了巨大的前进动力。 膜片钳技术是用微玻管电极（膜片电极或膜片吸管）接触细胞膜，以千兆欧姆以上的阻抗使之封接，使与电极尖开口处相接的细胞膜的小区域（膜片）与其周围在电学上分隔，在此基础上固定点位，对此膜片上的离子通道的离子电流（pA级）进行监测记录的方法 用场效应管运算放大器构成的I-V转换器是测量回路的核心部分。在场效应管运算放大器的正负输入端子为等电位，向正输入端子施加指令电位时，由于短路负端子以及膜片都可等电位地达到钳制的目的，当膜片微电极尖端与默片之间形成10GΩ以上封接时，其间的分流电流达到最小，横跨膜片的电流可100......阅读全文
膜片钳技术的基本介绍
1976年德国马普生物物理研究所Neher和Sakmann创建了膜片钳技术（patch clamp recording technique）。这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的或多个的离子通道分子活动的技术。它和基因克隆技术（gene cloning）并架齐驱，给生命科学研究
关于膜片钳技术的应用介绍
(1)与药物作用有关的心肌离子通道 心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。近年来，国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展，使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。 (2)对离子通道生理与病理情况下作用机制的研究 通过对各种生理
膜片钳记录技术的方法介绍
中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定 义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住（钳住）细胞膜片表面，然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
关于膜片钳的基本内容介绍
膜片钳又称单通道电流记录技术，用特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面，使之形成10～100的密封(giga-seal)，又称巨阻封接，被孤立的小膜片面积为μm量级，内中仅有少数离子通道。然后对该膜片实行电压钳位，可测量单个离子通道开放产生的pA（10的负12次方安培）量级的电流，这种通道开放是一种随机
膜片钳技术的应用学科相关介绍
膜片钳技术发展至今，已经成为现代细胞电生理的常规方法，它不仅可以作为基础生物医学研究的工具，而且直接或间接为临床医学研究服务， 目前膜片钳技术广泛应用于神经（脑）科学、心血管科学、药理学、细胞生物学、病理生理学、中医药学、植物细胞生理学、运动生理等多学科领域研究。 随着全自动膜片钳技术（Au
膜片钳记录技术
中文名称膜片钳记录技术英文名称patch-clamp recording定 义研究离子通过膜离子通道运动的一种技术。即用一微电极封住（钳住）细胞膜片表面，然后测量通过这一部分膜上的电流。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
膜片钳技术简介
膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”。是研究离子通道的最重要的技术。目前膜片钳技术已从常规膜片钳技术（Conventional patch clamp technique）发展到全自动膜片钳技术（Automated patch clamp technique）。 传统膜片钳技术每次只能记录
膜片钳技术原理
可兴奋膜的电学模型 细胞膜由脂类双分子层和和蛋白质构成。脂质层的电导很低，由于双分子层的结构特点，形成了细胞的膜电容，通道蛋白的开闭状况主要决定了膜电导的数值。在细胞膜的电学模型中，膜电容和膜电导构成了一个并联回路。在细胞膜的电兴奋过程中，脂质层膜电容的反应是被动的，其电流电压曲线是线
膜片钳技术的技术原理简介
膜片钳技术是用玻璃微电极吸管把只含1-3个离子通道、面积为几个平方微米的细胞膜通过负压吸引封接起来，由于电极尖端与细胞膜的高阻封接，在电极尖端笼罩下的那片膜事实上与膜的其他部分从电学上隔离，因此，此片膜内开放所产生的电流流进玻璃吸管，用一个极为敏感的电流监视器（膜片钳放大器）测量此电流强度，就代
膜片钳技术的操作步骤
（1）膜片微电极的制作 拉制 膜片微电极是将玻璃毛细管用拉管仪拉制而成。 涂硅酮树酯 将硅酮树酯涂于微电极的最尖端以外的部分，然后将其通过加热镍铬电阻线圈而烘干变固。 热刨光 在显微镜下，将微电极尖端接近热源进行热刨光处理可提高巨阻抗封接的成功率。 充灌微电极液 用于灌充微电极的
膜片钳技术（patch－clamp)
Instruments For ElectrophysiologyProducts include microelectrode, voltage and current clamp amplifiers, perfusion chambers, perfusion heating systems,
电生理专题——膜片钳技术基本原理与特点
膜片钳技术本质上也属于电压钳范畴，两者的区别关键在于：①膜电位固定的方法不同；②电位固定的细胞膜面积不同，进而所研究的离子通道数目不同。电压钳技术主要是通过保持细胞跨膜电位不变，并迅速控制其数值，以观察在不同膜电位条件下膜电流情况。因此只能用来研究整个细胞膜或一大块细胞膜上所有离子通道活动。目前
膜片钳技术的应用进展（二）
2.3 实验的一般操作步骤 ①拉制微电极和充灌微电极；②将预先处理的实验标本置于显微镜载物台上的灌流槽内；③于显微镜低倍镜下，用微操纵器将电极移动到浴液上方，换用高倍镜按一 定标准选择合适的细胞，然后接近靶细胞或组织，完成电极与标本的封接；④给予钳位电压或电流等指令条件并分别记
膜片钳技术的应用进展（三）
4 膜片钳技术的主要用途 膜片钳技术广泛用于研究细胞离子通道，已经成为研究细胞水平生理功能的常用技术。归纳其主要用途包括［4］ ：1）可分辨单通道电流，直接观察通道开启和关 闭的全过程。通过测得的单通道特征参数可鉴别通道类型，同时可验证和研究通道的开关动力学模型。2）单通道记录可以解释
膜片钳技术的应用进展（一）
【摘要】 膜片钳技术是研究离子通道的“金标准”，应用该技术可以证实细胞膜上离子通道的存在，并能对其电生理特性、分子结构、药物作用机制等进行深入的研究。 【关键词】 膜片钳技术 离子通道 进展 1976年由德国马普生物物理化学研究所的Neher和Sakamann首次报道了应用膜片钳技术在蛙胸
关于膜片钳技术的发展历史
该技术是由电压钳（voltageclamp）发展而来的，电压钳技术由Cole和Marment设计，后经Hodgkin和Huxley改进并成功地应用于神经纤维动作电位的研究 [2] 。其设计原理是根据离子作跨膜移动时形成了跨膜离子电流（I），而通透性即离子通过膜的难易程度，其膜电阻（R）的倒数，也
电生理专题——膜片钳技术的应用
膜片钳技术发展至今，已经成为现代细胞电生理的常规方法，它不仅可以作为基础生物医学研究的工具，而且直接或间接为临床医学研究服务。 目前膜片钳技术广泛应用于神经（脑）科学、心血管科学、药理学、细胞生物学、病理生理学、中医药学、植物细胞生理学、运动生理等多学科领域研究。 随着全自动膜片钳技术（Au
膜片钳的发展历史的介绍
1980年Sigworth等在记录电极内施加5-50 cmH2O的负压吸引，得到10-100GΩ的高阻封接（Giga-seal），大大降低了记录时的噪声实现了单根电极既钳制膜片电位又记录单通道电流的突破。 1981年Hamill和Neher等对该技术进行了改进，引进了膜片游离技术和全细胞记录技
膜片钳记录和分析技术（一）
细胞是动物和人体的基本组成单元，细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的，离子和离子通道是细胞兴奋的基础，亦即产生生物电信号的基础，生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。由此形成了一门细胞学科—电生理学（electrophysiology），即是用电生理的方法来记录和分析细胞产生电的大小
膜片钳法的各种模式介绍
细胞吸附模式 将膜片微电极吸附在细胞膜上对但离子通道电流进行记录的模式。其优点是在细胞内环境保持正常的条件下可以对离子通道活动进行观察记录。但是由于不能认为直接地控制细胞内环境条件也不能确切的潘明细胞内点位，所以其缺点是不清楚膜片上的实效点位。 膜内面向外模式 从细胞吸附模式将已形成巨阻抗
非损伤微测技术与膜片钳技术的主要区别
1976年膜片钳技术的诞生是现代生命科学研究史上的重要事件，两位德国科学家因应用膜片钳技术进行离子通道研究所取得的成就而荣获1991年诺贝尔生理学或医学奖。膜片钳技术对离子通道开闭情况的研究，成为连接生物分子和生物功能研究的重要桥梁，催生了大量高水平研究成果。 但随着膜片钳技术的广泛应
膜片钳的在离子通道技术中的应用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型，并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率，还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细胞分
膜片钳的简介
膜片钳又称单通道电流记录技术，用特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面，使之形成10～100的密封(giga-seal)，又称巨阻封接，被孤立的小膜片面积为μm量级，内中仅有少数离子通道。然后对该膜片实行电压钳位，可测量单个离子通道开放产生的pA（10的负12次方安培）量级的电流，这种通道开放是一种随机过程
膜片钳技术在通道研究中的重要作用
应用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程、区分离子通道的离子选择性、同时可发现新的离子通道及亚型，并能在记录单细胞电流和全细胞电流的基础上进一步计算出细胞膜上的通道数和开放概率，还可以用以研究某些胞内或胞外物质对离子通道开闭及通道电流的影响等。同时用于研究细胞信号的跨膜转导和细
膜片钳技术中高阻封接什么意思？
电极尖端与细胞膜接触后，电极与其对应的以小片膜之间形成的电阻。电阻越大，漏电流越小，说明封接的越成功。一般到G欧姆（好的到10几G欧姆）就形成高阻封接。然后就可以选择记录模式了（全细胞、内面向外等）。
膜片钳技术在神经药理方面的应用（3）
２． 溶液的组成 (1) 电极液：根据记录的电流不同电极液的成分也不同。基本要求是等张的KCI 溶液，Ca2+ 浓度为10~100nmol (pCa 7~8)，pH 值7~7.4。这里介绍一个在全细胞记录模式时，通过改变保持电位，能分别记录到Na+、K+、Ca2+ 电流的电极液成分(mmol/
膜片钳技术在神经药理方面的应用（2）
二 操作步骤 １． 膜片钳微电极制作 (1) 玻璃毛细管的选择：有二种玻璃类型，一是软质的苏打玻璃，另一是硬质的硼硅酸盐玻璃。软质玻璃在拉制和抛光成弹头形尖端时锥度陡直，可降低电极的串联电阻，对膜片钳的全细胞记录模式很有利；硬质玻璃的噪声低，在单通道记录时多选用。玻璃毛细管的直径应符合电极支
膜片钳技术在神经药理方面的应用（1）
1976 年Neher 和Sakmann 建立了膜片钳技术（Patch clamp technique），这是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一的或多数的离子通道分子活动的技术。1981 年Hamill, Neher 等人又对膜片钳实验方法和电子线路进行了改进，形成了当今广泛应用
卵泡穿刺技术的基本介绍
卵泡穿刺一种治疗不孕症的方法。卵泡穿刺时应选择靠近卵巢边缘且距离阴道壁穿刺点较近卵泡进行穿刺，有利于卵子排出。 方法：对21例PCOS不孕患者在超声引导下进行未成熟卵泡穿刺，抽吸卵泡液，对比观察穿刺抽吸前后患者内分泌功能的变化。结果：21例患者分别经过2个周期～3个周期的穿刺治疗后，所有患者血
血管造影技术的基本介绍
血管造影，是一种介入检测方法，将显影剂注入血管里。因为X光无法穿透显影剂，血管造影正是利用这一特性，通过显影剂在X光下所显示的影像来诊断血管病变的。 血管造影是一种辅助检查技术，在当代技术发达时期，血管造影技术普遍用于临床各种疾病的诊断与治疗当中，有助于医生及时发现病情，控制病情进展，有效地提