关于随机扩增多态性DNA的研究情况
由于随机引物在较低的复性温下能与基因组DM非特异性的结合,当相邻两个引物间的DNA小于2 000bp时,就能够得到扩增产物。与RFLP相比,RAPD具有很多优点。(1)不需要了解研究对象基因组的任何序列,只需很少纯度不高的模板,就可以检测出大量的信息。(2)无需专门设计RAW)反应引物,随机设计长度为8-10个碱基的核苷酸序列就可应用。(3)操作简便,不涉及分子杂交、放射自显影等技术。(4)需要很少的DNA样本。(5)不受环境、发育、数量性状遗传等的影响,能够客观地提示供试材料之间DNA的差异。可以检测出RFLP标记不能检测的重复顺序区。当然RAPD技术有一定的局限性,它呈显性遗传标记(极少数共显性),不能有效区分杂合子和纯合子。易受反应条件的影响,某些情况下,重复性较差,可靠性较低,对反应的微小变化十分敏感。如聚合酶的来源,DNA不同提取方法,Mg2+离子浓度等都需要严格控制_。......阅读全文
关于随机扩增多态性DNA的研究情况
由于随机引物在较低的复性温下能与基因组DM非特异性的结合,当相邻两个引物间的DNA小于2 000bp时,就能够得到扩增产物。与RFLP相比,RAPD具有很多优点。(1)不需要了解研究对象基因组的任何序列,只需很少纯度不高的模板,就可以检测出大量的信息。(2)无需专门设计RAW)反应引物,随机设计
随机扩增多态性DNA的简介
随机扩增多态 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美国学者Williams和Welsh于1990年首先提出的该技术是通过分析DNA的PCR产物的多态性来推测生物体内基因排布与外在性状表现的规律的技术。RAPD技术是以8-lObp的随机寡
随机扩增多态性DNA技术特点
(1)不需要了解研究对象基因组的任何序列,只需很少纯度不高的模板,就可以检测出大量的信息。(2)无需专门设计RAW)反应引物,随机设计长度为8-10个碱基的核苷酸序列就可应用。(3)操作简便,不涉及分子杂交、放射自显影等技术。(4)需要很少的DNA样本。 (5)不受环境、发育、数量性状遗传等的影
随机扩增多态性DNA技术简介
随机扩增多态 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美国学者Williams和Welsh于1990年首先提出的该技术是通过分析DNA的PCR产物的多态性来推测生物体内基因排布与外在性状表现的规律的技术。RAPD技术是以8-lObp的随机寡核苷
RAPD(randomly-amplifiled-polymorphic-DNA,随机扩增的多态性DNA
一、 原理运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体
RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术
实验方法原理RAPD作为单引物的PCR扩增产物,其产生机理是引物首先结合到模板链,沿模板5’端方向延伸而产生不同长度的DNA片段,然后以这些片段为模板继续大量扩增。由于RAPD反应中,在3’端没有相应引物和模板互补,这样必然存在一个由引物沿模板DNA 5’端方向延伸后再在3’端形成同一引物互补序
RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术
RAPD分析技术 实验方法原理 RAPD作为单引物的PCR扩增产物,其产生机理是引物首先结合到模板链,沿模板5'端方向延伸而产生不同长度的DNA片段
RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术
聚合酶链式反应(PCR)以其优越性极大地影响到了分子生物学的几乎所有领域,并以其基本程序和DGGE,开发出多种检测核苷酸变异的方法。RAPD(Random Amplifed Polymorphic DNA)是其中一种,可用于(1)遗传图谱的构建(2)系统学研究(3)目的基因的标记和定位(4)纯度和外
植物RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术
RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA),意为随机扩增多态性DNA,是利用PCR技术进行随机扩增,把扩增的DNA片段进行琼脂糖凝胶电泳,根据DNA条带的多态性来反应模板DNA序列上的多态性。RAPD同AFLP、SSR等分子标记一样都基于PCR扩增,只是RA
什么是随机扩增多态-DNA?
随机扩增多态 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美国学者Williams和Welsh于1990年首先提出的该技术是通过分析DNA的PCR产物的多态性来推测生物体内基因排布与外在性状表现的规律的技术。RAPD技术是以8-lObp的随机寡核苷
DNA扩增多态性的功能
中文名称DNA扩增多态性英文名称DNA amplification polymorphism定 义不同种属或个体间的DNA序列不完全相同,设计恰当的探针,以聚合酶链反应(PCR)扩增样品中的DNA,会得出不同长度的PCR产物,进一步用限制性内切酶消化PCR产物,经电泳分离可得出具有不同长短DNA片
关于DNA标记的酶切扩增多态性序列介绍
CAPS技术又称为PCR—RFLP,它实质上是PCR技术与RFLP技术结合的一种方法。CAPS的基本原理是利用己知位点的DNA序列资源设计出一套特异性的PCR引物(19—27bp),然后用这些引物扩增该位点上的某一DNA片段,接着用一种专一性的限制性内切酶切割所得扩增产物,凝胶电泳分离酶切片段,
DNA标记的扩增片段长度多态性介绍
AFLP是1995年荷兰科学家Zabeau和Vos等发展起来的一种检测DNA多态性的新方法,文章发表于Nucleic Acids Research。AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段,再使双链人工接头的酶切
新研究挑战DNA随机突变进化理论
根据美国加州大学戴维斯分校和德国马克斯普朗克发育生物学研究所开展的一项新研究,拟南芥可能是理解和预测DNA突变的关键。这一发表在12日《自然》杂志上的新发现,将从根本上改变人们对进化的理解,有朝一日或可帮助研究人员培育出更好的作物,甚至帮助人类对抗癌症。 当DNA受损且未修复时,就会发生突变,从
关于DNA芯片的核苷酸多态性
SNP标记是美国学者Lander E于1996年提出的第三代DNA遗传标记。SNP是指同一位点的不同等位基因之间仅有个别核苷酸的差异或只有小的插入、缺失等。从分子水平上对单个核苷酸的差异进行检测,SNP 标记可帮助区分两个个体遗传物质的差异。人类基因组大约每 1250 bp SNP 出现一次,已
关于阿米巴菌的DNA扩增的介绍
这是近十年来发展很快而且十分有效、敏感、特异的方法。主要提取脓液穿刺液或粪便培养物、活检的肠组织、皮肤溃疡分泌物、脓血便甚至成形便的DNA,而后以适当的引物,进行扩增反应。对反应产物进行电泳分析,可以区别溶组织内阿米巴和其他阿米巴原虫。引物种类很多,各有所长,但原则上是选择具有高丰度的基因,可以
DNA多态性的概念
DNA多态性是指群体内某个基因座存在2个或多个等位基因形成而造成的同种DNA分子的多样性,是单一基因座等位基因变异性在群体水平的体现。凡在群体中出现频率大于1%的变异体,不论其是正常还是致病性,称多态性;频率低于1%的变异体,则考虑为突变。
DNA多态性的概念
DNA多态性是指群体内某个基因座存在2个或多个等位基因形成而造成的同种DNA分子的多样性,是单一基因座等位基因变异性在群体水平的体现。凡在群体中出现频率大于1%的变异体,不论其是正常还是致病性,称多态性;频率低于1%的变异体,则考虑为突变。
DNA多态性的概念
DNA多态性在人群中不同个体之间的基因产物大多数是一致的,但每个个体在遗传上还是有所不同的,这种个体之间的差异从本质上讲是DNA碱基顺序存在的差异,它是通过用内切酶切割不同个体的基因组DNA出现不同长度的片段而被发现的,并通过孟德尔方式遗传,称为DNA多态性。
随机引物法标记-DNA
实验方法原理 利用寡核苷酸作引物,DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成(Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一,它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸(5' 端的核苷酸除外)的互补物将以同样
随机引物法标记-DNA
实验方法原理 利用寡核苷酸作引物,DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成(Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一,它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸(5' 端的核苷酸除外)的互补物将以同样的频率掺入产物。实验材料 大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ Kl
随机引物法标记-DNA
利用寡核苷酸作引物,DNA 聚合酶可沿单链模板起始 DNA 的合成(Gotilian 1969)。如果寡核苷酸的序列不均一,它们就可在模板的多位点上与模板杂交。因此模板上每一核苷酸(5' 端的核苷酸除外)的互补物将以同样的频率掺入产物。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法
扩增片段长度多态性的方法
AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段,再使双链人工接头的酶切片段相边接,作为扩增反应的模板 DNA,然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增,最后在接头互补链的基础上添加 1—3个选择性核苷酸作引物对模板 DNA
微卫星DNA的研究和分布情况
微卫星DNA,重复单位序列最短,只有1~6bp,串联成簇,长度50~100bp,又称为短串联重复序列(Short Tandem Repeat STR)。广泛分布于基因组中。 其中富含A-T碱基对,是在研究DNA多态性标记过程中发现的。1981年Miesfeld等首次发现微卫星DNA,其重复单位长度一
DNA序列多态性的定义
中文名称DNA序列多态性英文名称DNA sequence polymorphism定 义同一物种的不同基因组DNA等位序列之间的差异。包括长度多态、限制性酶切位点多态及单核苷酸多态等。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)
扩增片段长度多态性的基本介绍
扩增片段长度多态性(AFLP)Amplified Fragment Length Polymorphism,对基因组DNA进行双酶切,形成分子量大小不同的随机限制片段,再进行PCR扩增,根据扩增片段长度的多态性的比较分析,可用于构建遗传图谱、标定基因和杂种鉴定以辅助育种。
扩增片段长度多态性的方法介绍
AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段,再使双链人工接头的酶切片段相边接,作为扩增反应的模板 DNA,然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增,最后在接头互补链的基础上添加 1—3个选择性核苷酸作引物对模板 DN
扩增片段长度多态性的概念简介
扩增片段长度多态性(AFLP)Amplified Fragment Length Polymorphism对基因组DNA进行双酶切,形成分子量大小不同的随机限制片段,再进行PCR扩增,根据扩增片段长度的多态性的比较分析,可用于构建遗传图谱、标定基因和杂种鉴定以辅助育种。
扩增片段长度多态性的实现方法
AFLP 是 RFLP 与PCR相结合的产物,其基本原理是先利用限制性内切酶水解基因组 DNA 产生不同大小的 DNA 片段,再使双链人工接头的酶切片段相连接,作为扩增反应的模板 DNA,然后以人工接头的互补链为引物进行预扩增,最后在接头互补链的基础上添加 1—3个选择性核苷酸作引物对模板 DNA
分子生态学词汇随机扩增多态
随机扩增多态 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD),是美国学者Williams和Welsh于1990年首先提出的该技术是通过分析DNA的PCR产物的多态性来推测生物体内基因排布与外在性状表现的规律的技术。RAPD技术是以8-lObp的随机寡核苷