DNA微阵列技术的应用
一、检测表达状况,发现新基因。 Wodicka1997年将覆盖酵母基因组全部ORF的26万种25mer探针,阵列于4张玻片,每张6.5万个探针,将酵母分加富和低限两组培养,研究不同生长条件下基因表达水平,结果表明90%的基因在两种条件下均表达,36种mRNA更多地在加富培养下表达,140种mRNA在低限培养中表达。此外,还发现了一批未见报道的新基因。 二、检测突变和多态性进行遗传作图。 Hacia等1996年用96600寡核苷酸阵列,检测人癌基因BRCA1突变情况,将15个患者样品和对照样品分别用两种荧光标记,发现14人的该基因发生了一个剪辑突变,共出现8种多态性,突变表现在该基因外显子2的第22个密码子内。利用SNP制作人类遗传图谱,将是第三代遗传图谱,此技术完全以DNA微阵列为基础。 四,DNA序列分析。Donnel等1992,Pease等1994,Yershow等1996,Wallraff等1997都报道了采用D......阅读全文
DNA微阵列检测基因表达水平及识别基因序列
Schena等1996年用拟南芥光调基因微阵列,以不同器官中的mRNA为探针,检测其基因表达水平,结果表明叶mRNA的表达水平是根的500倍。Shelon等1996年将酿酒酵母基因组DNA克隆制成微阵列,用6条最大染色体和10条最小染色体DNA探针分别标记上红,绿荧光标记进行杂交检测,结果表明9
什么是生物芯片微阵列技术
生物芯片技术是通过缩微技术,根据分子间特异性地相互作用的原理,将生命科学领域中不连续的分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其它生物组分的准确、快速、大信息量的检测。按照芯片上固化的生物材料的不同,可以将生物芯片划分为基因芯片、蛋白质芯片、多糖芯片和神
DNA分型技术的工作原理及技术应用
工作原理 1.将送检的各种生物学检样,如毛发、血痕、精斑、人体组织或白骨等,把其中所含的DNA 提取出来。 2.选用与探针配对的限制性核酸内切酶,在长链DNA 位置上加以切割,将相对分子质量很大的DNA 长链切短成许多长度不同的小片段。 3.在胶板尺寸较长的凝胶电泳仪中,对完全酶解后的D
DNA分型技术的法医学应用
刑事侦查 DNA分型技术一种新的侦查手段,在侦查的旧技术时代,不完整或不清晰的指纹无法分辨指纹所有者的确切身份而失去作用,而通过DNA分型技术则可以通过分析指纹所留的油脂,汗液,皮屑等物的DNA以确定指纹所有者的确切身份,从而帮助分析案情。 亲子鉴定 自从杰弗里斯等人于1985年首次对一起
法医物证检测中DNA分析技术的应用
法医物证检测中DNA分析技术的应用摘 要:本文以DNA 分析技术为研究对象,对其常见技术在法医物证检测中的应用进行了探究,以期拓 展法医鉴定范围、增强物证检测质量的目的。 随着现代生物学和医学的发展, 逐步形成了许 多DNA提取、鉴定和分析技术。 这些技术在多个领 域中得到了广泛推广和应用;[1
PCR技术应用社会学DNA的检测
目前广泛采用的 DNA 测序方法有化学法和双脱氧法两种,它们对模板的需要量比较大。利用 PCR 方法可以比较容易地测定位于两个引物之间的序列。利用 PCR 测序有下列几种方法。(1)双链直接测序将 PCR 产物进行电泳回收或利用分子筛等方法除去小分子物质。采用热变性或碱变性的方法使双链 DNA 变成
生物芯片(DNA微阵列)荧光扫描仪中的激光共聚...(三)
以下要介绍共聚焦扫描微阵列的工作原理,顾名思义,共聚焦扫描仪将视野中的两个聚焦点的影象装配为二维图象,工作过程如所示:平行的激光束通过光束分离器后进入目镜,目镜采集到部分球状散射的荧光释放光并使这些光成为平行的光束,此外还采集被反射的激光,这些激光的强度要比荧光强度大3-7倍。采集回来的光束再次通过
生物芯片(DNA微阵列)荧光扫描仪中的激光共聚...(二)
释放光采集荧光由目镜的镜头来采集,该镜头聚焦于样品上并将一定区域内的光线收集到装置。收集的角度区域的大小非常关键,荧光释放是球形的,目镜对荧光的采集范围是决定仪器的采集效率关键指标之一。目镜采集光的角度由数值孔径来表示,图2表示了数值孔径与光采集效率之间的变化关系。当数值孔径为1.0时,目镜将收集到
生物芯片(DNA微阵列)荧光扫描仪中的激光共聚...(一)
生物芯片(DNA微阵列)荧光扫描仪中的激光共聚焦扫描技术所有的微阵列上的荧光须经荧光扫描装置来分析其上的荧光强度和分布,在这些装置中,激光共聚焦扫描仪具有优越的性能,能获取高质量的图像和数据,本文将分别介绍微阵列的相关特性和各种类型的微阵列扫描仪,激光共聚焦扫描仪的设计和关键特性,另外还将介绍一种已
微阵列在材料科学研究中的应用
微阵列在材料科学研究中的国内主要发展:(1)阵列构筑技术基于氧化铝模板,通过气相法、电沉积、原位溶胶-凝胶等技术,构筑了各种纳米线、纳米管、异质结纳米线等的有序排列的阵列体系。发展了催化诱导CVD技术,在孔内预先置入金属纳米颗粒作为催化剂,通过CVD过程沿孔内生长出单晶Si,GaN,等纳米线阵列体系
组织微阵列的制作
实验概要本文介绍了组织微阵列(TMAs)的制作原理及基本操作流程。实验原理组织微阵列原理是借鉴计算机平行分析的思维 ,对生物信号进行平行分析。利用微点阵技术 ,借助于机械手将成千上万的组织片点阵固定于固相载体上,可进行常规 HE染色 ,也可以与标记的样品进行聚合酶链反应、荧光原位杂交、免疫组
DNA分析技术在法医物证检测中的应用
DNA分析技术在法医物证检测中的应用 摘要:现如今,DNA技术的发展为刑侦工作提供了更多的便利,在针对犯罪人DNA的提取、扩增:以及鉴定分析等方面也都有着非 常重要的作用,因此目前对于DNA分析技术在法医物证检测中的应用研究也有着非常重要的意义。主要介绍了DNA分析技术在法医 物证检测中的具体应用,
什么是微阵列?
微阵列(DNA Microarray)也叫寡核苷酸阵列(Oligonucleotide array),是人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)的逐步实施和分子生物学的迅猛发展及运用的产物,它是生物学家受到计算机芯片制造和广为应用的启迪,融微电子学、生命科学、计算机科学和光
DNA纤维荧光原位杂交技术技术的特点、分类和应用
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术,将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
微阵列技术或更精确诊断白血病
近日,乔治亚医学院在佐治亚大学分子病理学家-拉温德拉Kolhe博士经过多年的研究,发现微阵列技术探测对检测出白血病有更高的准确性和先知性。研究人员报告,近一半的成人白血病患者,似乎都不是遗传异常因素所致,因为研究者发现,他们的染色体都是正常的。这个发现可以更好地确定患病高风险人
数字PCR技术在DNA定量精准等领域的应用
数字PCR先进的数字PCR技术实现了样品中的单分子核酸扩增,从而使的DNA定量的精准度提高到了全新水平。Philip与Stilla Technologies的首席执行官兼联合创始人Rémi Dangla进行了交流,讨论了数字PCR技术领域的进展和挑战。Stilla Technologies公司总部位
DNA蛋白质印迹法的技术应用
中文名称DNA-蛋白质印迹法英文名称Southwestern blotting定 义将经过电泳分离的蛋白质转移到膜上再与某些特定序列的DNA片段相互作用,是研究蛋白质与DNA特异结合的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
DNA纤维荧光原位杂交技术的原理与应用
FISH的分辨率取决于载体DNA的浓缩程度,如何提高分辨率一直是一个重要课题。Wiegant等和Heng等首先利用化学方法对染色体进行线性化,再以此为载体进行FISH,使其分辨率显著提高,这就是最初的纤维-FISH。纤维-FISH应用各种不同技术,将待研究细胞的全部遗传物质即DNA在载玻片上制备出D
第二代DNA测序技术的应用展望
第二代测序技术--以Illumina/Solexa Genome Analyzer 为例1.概述DNA测序(DNA sequencing)作为一种重要的实验技术,在生物学研究中有着广泛的应用。早在DNA双螺旋结构(Watson and Crick,1953)被发现后不久就有人报道过DNA测序技术,但
DNA重组技术(DNA-Recombination)
一、DNA 的酶切与连接(1)酶切反应:同质粒DNA 的鉴定,只不过是质粒DNA 换为载体DNA 。若大量酶切,则成比例增加。(2)加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀,-20℃2h以上。(3)15000rpm离心15min,弃上清。(4)加入75%乙醇洗涤2次,离心弃
原位杂交HPV-DNA检测技术应用及体会
原位杂交技术是新近开展的一项新技术,其原理是采用荧光、生物素、地高辛等标记的探针,依据碱基对互补配对原理,与组织切片、细胞制片等标本中的靶序列特异杂交,经信号放大显色后,镜下观察结果。此方法具有很高的灵敏性和特异性。本文就HPV DNA检测技术在常规实验中的操作体会等问题,总结如下。 1材料与方
DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体3
在作为载体时,这些噬菌体有一个很大的优点,即克隆到M13mp载体的外源DNA片段(双链),在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆,可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板:①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板;②制备仅有一条
DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体2
二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体,大多数具有编码多种蛋白质的基因,能利用宿主细胞的蛋白质合成体系,进行生长和增殖。构建的噬菌体载体,以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA,全部序列已知,共编码50多个基因。其中约一半基因参与
DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体1
载体(vector)是携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型,亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下
DNA测序技术的技术原理
化学修饰法测序原理化学试剂处理末段DNA片段,造成碱基的特异性切割,产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物,经凝胶电泳分离。化学切割反应:包括碱基的修饰,修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。Sanger法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物
DNA技术的概念
DNA(Deoxyribonucleic acid),中文译名为脱氧核糖核酸,是染色体的主要化学成分,同时也是基因组成的,有时被称为“遗传微粒”。DNA是一种分子,可组成遗传指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为“蓝图”或“食谱”。其中包含的指令,是建构细胞内其
微阵列的功能和原理介绍
微阵列(DNA Microarray)也叫寡核苷酸阵列(Oligonucleotide array),是人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)的逐步实施和分子生物学的迅猛发展及运用的产物,它是生物学家受到计算机芯片制造和广为应用的启迪,融微电子学、生命科学、计算机科学和光
数字PCR技术在DNA甲基化检测中的应用
DNA甲基化是目前研究最多的表观遗传修饰之一,发生于CpG二核苷酸序列C5位置的胞嘧啶上,多发生于CpG岛上,研究发现,DNA甲基化参与调节多种细胞过程,包括胚胎发育,转录,X染色体失活,基因组印迹、染色体稳定性等。许多研究发现,DNA甲基化在一系列的疾病(如癌症等)起到十分重要的作用。在癌症患者中
DNA合成(DNA-synthesis-)技术介绍
蛋白质概念提出:DNA多肽合成(DNA synthesis ):按照预定核苷酸的顺序,将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法,即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸,可自动化操作。)目前,oligo DNA合成一般都采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,此方法具有高效
反义DNA的应用介绍
反义DNA 被广泛地应用于反义技术中用以“封闭”或“抑制”目的基因表达,被应用的反义DNA多采用化学合成法得到,长度一般在8~28bp,1978年Zamecnik首次利用13bp的反义DNA抑制劳氏肉瘤病毒(RSV)增殖。为了提高半衰期对天然结构反义DNA片断的加工和修饰也应运而生,相继出现了甲