蛋白制备方法介绍

胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.005Mol/L pH7.0 NaCl溶液中4℃透析过夜,以除去多余的盐离子,然后100 000g4℃离心1h,去除聚合物。2.待标胶体金溶液的准备 以0.1Mol/L K2CO3或0.1Mol/L HCl调胶体金液的pH值。标记IgG时,调至9.0;标记McAb时,调至8.2;标记亲和层析抗体时,调至7.6;标记SPA时,调至5.9~6.2;标记ConA时,调至8.0;标记亲和素时,调至9~10。由于胶体金溶液可能损坏pH计的电板,因此,在调节pH时,采用精密pH试纸测定为宜。3.胶体金与标记蛋白用量之比的确定(1)根据待标记蛋白的要求,将胶......阅读全文

蛋白制备方法介绍

胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.005Mo

融合蛋白的制备方法介绍

基于重复结构的融合蛋白大多为短肽,不具有复杂的空间结构,因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现,主要包括以下基本步骤:首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护,其次将羧基活化为活性中间体,待耦合过程结束后,对肽链上氨基酸的保

融合蛋白的制备方法介绍

  基于重复结构的融合蛋白大多为短肽,不具有复杂的空间结构,因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现,主要包括以下基本步骤::首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护,其次将羧基活化为活性中间体,待耦合过程结束后,对肽链上氨基

关于菜豆蛋白的制备方法介绍

  1、从白芸豆中提取菜豆素;  2、用曲霉(Aspergillus sojae)为诱导剂,诱导红芸豆产生菜豆素;  3、从刺桐(Erythrina addisoniae)中分离得到;  4、采用功能性寡糖(例如壳寡糖、果胶寡糖、纤维二糖、褐藻酸寡糖等)作为诱导剂,激发芸豆生成菜豆素。

关于酪蛋白的制备方法介绍

  (1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶

关于酪蛋白的制备方法介绍

  (1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶

融合蛋白的制备方法

基于重复结构的融合蛋白大多为短肽,不具有复杂的空间结构,因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现,主要包括以下基本步骤::首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护,其次将羧基活化为活性中间体,待耦合过程结束后,对肽链上氨基酸的

酪蛋白的制备方法

(1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶于强

融合蛋白的制备方法

基于重复结构的融合蛋白大多为短肽,不具有复杂的空间结构,因此只需简单的多肽合成过程即可获得目标蛋白。由单个氨基酸合成多肽主要通过两个氨基酸之间脱水形成肽键来实现,主要包括以下基本步骤::首先对两性离子结构的氨基酸进行相应的氨基或羧基保护,其次将羧基活化为活性中间体,待耦合过程结束后,对肽链上氨基酸的

蛋白酶的制备方法

制法 由黑曲霉变种(Aspergillus niger var,)、米曲霉变种(Aspergillus oryzae var.)或弗雷德氏链霉菌(Streptomyces fradiae)在受控条件下于液体或固体焙养基中培养繁殖后,用硫酸铵进行盐析,用乙醇或丙酮使之沉淀后精制而得。此外,亦可由枯草杆

蛋白样品制备方法学评估

蛋白质样品的制备,是蛋白质研究的第一步,不论后续采用何种分离或鉴定手段,样品制备都是重要步骤。蛋白质样品制备的意义生物的蛋白质种类多达 10 万种以上,样品中的蛋白质种类也可达到1万种以上,但大部分蛋白质的拷贝数很少,因此通过样品制备起到浓缩蛋白质的作用。去除样品中各种非蛋白质的影响。如何进行蛋白质

蛋白酶的制备方法

制法 由黑曲霉变种(Aspergillus niger var,)、米曲霉变种(Aspergillus oryzae var.)或弗雷德氏链霉菌(Streptomyces fradiae)在受控条件下于液体或固体焙养基中培养繁殖后,用硫酸铵进行盐析,用乙醇或丙酮使之沉淀后精制而得。此外,亦可由枯草杆

制备融合蛋白的过程介绍

  1、进行目的基因的克隆:根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cDNA为模板,利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。  2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个DNA片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质

siRNA制备方法介绍

体外制备1.化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3―4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的si

弹性蛋白酶的制备方法

一般由动物的胰脏用水提取而得,也可用细菌的培养液在低温下用水提取而得。包装和贮藏:密封包装后贮于阴冷处。

​-乙肝免疫球蛋白的制备方法

乙肝免疫球蛋白是从健康献血员中筛选出来的,其血浆含有滴度较高的乙肝表面抗体(抗-HBs),经过生物浓缩工艺制成的高效价乙肝免疫球蛋白 。我国生产的为每毫升含抗-HBs 100单位以上的注射剂。每升含抗-HBs 100单位以上的注射剂,这种含量的制剂完全可以中和入侵人体的乙肝病毒(HBV)并将其清除,

木瓜蛋白酶的制备方法

制法 由木瓜(Carica papaya)的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。

免疫球蛋白抗血清制备方法

免疫球蛋白抗血清制备方法此法用于制备间接法抗抗体。因抗原为可溶性,故多需加佐剂。(1)淋巴结注射法1)选择体重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),编号;2)在家兔两后脚掌共注射活卡介苗,50mg(约0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮内0.2mL)。7~10d后,鼠或国窝处淋巴结肿大如黄豆或

核苷的制备方法介绍

核苷可从水解核酸来制备。用吡啶水溶液、氧化铝或酶促水解核糖核酸RNA,可得到核糖核苷;用氧化铝或酶水解脱氧核糖核酸DNA可得到脱氧核糖核苷。核苷也可用化学方法合成。适当保护的核糖或脱氧核糖与碱基衍生物缩合,可得到相应的核糖核苷和脱氧核糖核苷。或在糖的C1上先形成碳-氮和碳-碳键,然后闭环成杂环碱基而

siRNA的制备方法介绍

体外制备1.化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的si

肽的制备方法介绍

传统法主要有:微生物发酵法、酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法、酶解法等。·微生物发酵法:微生物发酵法的生产工艺技术主要是通过现代微生物发酵技术将大分子球蛋白转化为小分子肽,通过控制微生物的代谢和发酵条件可生产不同氨基酸排序和分子量不同的肽。在发酵过程中,产生的游离氨基酸被微生物再次吸收利用,

硅酸的制备方法介绍

实验室制法实验室采用水玻璃(硅酸钠水溶液)和盐酸反应或者硅酸钠和二氧化碳和水反应制得硅酸胶体。 化学方程式:Na2SiO3+2HCl=2NaCl+H2SiO3↓电离平衡常数:K1=2.2*10-10(30℃)工业制法1、盐酸法将细孔球形硅胶用盐酸浸泡4~6h后用纯水洗涤,烘干72h以上,用纯水洗涤后

弹性蛋白酶的用途和制备方法

在医学临床主要用于治疗高血脂症,防止动脉粥样硬化、脂肪肝。也可用于肉类和水产加工中的嫩化。制备方法一般由动物的胰脏用水提取而得,也可用细菌的培养液在低温下用水提取而得。包装和贮藏:密封包装后贮于阴冷处。

蛋白芯片技术的探针的制备方法

低密度蛋白质芯片的探针包括特定的抗原、抗体、酶、吸水或疏水物质、结合某些阳离子或阴离子的化学集团、受体和免疫复合物等具有生物活性的蛋白质。制备时常常采用直接点样法,以避免蛋白质的空间结构改变。保持它和样品的特异性结合能力。高密度蛋白质芯片一般为基因表达产物,如一个cDNA文库所产生的几乎所有蛋白质均

破伤风免疫球蛋白的制备方法

取用吸附破伤风疫苗,按国家批准的免疫程序对健康献血员进行自动免疫所采集的血浆。每批最少应由100名以上免疫献血员的血浆混合,合并后血浆的破伤风抗体效价每1ml应不低于8国际单位。用低温乙醇蛋白分离法分段沉淀提取免疫球蛋白组分,经超滤或冷冻干燥脱醇、浓缩和灭活病毒处理等工序制得,其免疫球蛋白纯度应大于

破伤风免疫球蛋白的制备方法

取用吸附破伤风疫苗,按国家批准的免疫程序对健康献血员进行自动免疫所采集的血浆。每批最少应由100名以上免疫献血员的血浆混合,合并后血浆的破伤风抗体效价每1ml应不低于8国际单位。用低温乙醇蛋白分离法分段沉淀提取免疫球蛋白组分,经超滤或冷冻干燥脱醇、浓缩和灭活病毒处理等工序制得,其免疫球蛋白纯度应大于

胰蛋白酶的制备方法及用途

制法 由猪或牛的胰腺抽提而得。用途 酶制剂。主要用于焙烤、肉类嫩化、蛋白质水解等。

免疫球蛋白的制备方法有哪些?

  乙醇沉淀法:这是最早用于从血浆中分离IgG的方法之一。通过在低温条件下向血浆中加入乙醇,使IgG沉淀,然后通过一系列的沉淀和溶解步骤来纯化IgG。这种方法相对简单,但纯度较低,需要进一步处理以获得高纯度的IgG。 色谱吸附法:现代免疫球蛋白生产中广泛使用色谱技术,如离子交换色谱、亲和色谱和凝胶过

牛乳中制备酪蛋白的原理和方法

酪蛋白定义:牛奶中的主要蛋白质,由α、β、γ和κ酪蛋白组成,其氨基酸组成和电泳行为有所不同。营养价值较高,经酸化或凝乳酶处理后沉淀。α和β酪蛋白有较多的丝氨酸被磷酸化,形成钙结合位点。原理牛乳和羊乳中含丰富的蛋白质,其中主要是酪蛋白。酪蛋白在羊乳罩中约占总蛋白量3/4,牛乳中约占总蛋白量的5/6。酪

破伤风免疫球蛋白的制备方法

取用吸附破伤风疫苗,按国家批准的免疫程序对健康献血员进行自动免疫所采集的血浆。每批最少应由100名以上免疫献血员的血浆混合,合并后血浆的破伤风抗体效价每1ml应不低于8国际单位。用低温乙醇蛋白分离法分段沉淀提取免疫球蛋白组分,经超滤或冷冻干燥脱醇、浓缩和灭活病毒处理等工序制得,其免疫球蛋白纯度应大于