沉降系数的测定方法
沉降系数通过分析离心机测定。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。 (1)样品:蛋白质(2)样品溶液与离心:将样品溶于缓冲液中,用一定规格的双槽分析池,一边加入溶液一边加入溶剂。分析池与平衡池平衡重量,使平衡池比分析池轻0.5g以内,然后分别装入分析转头。抽真空。开Schlieren光光源,选择工作速度,室温离心。转动腔达到真空后离心机开始运转加速,此时在观察窗口可以看到离心图型。达到工作速度后恒速离心。以蛋白质为例待看到样品峰的尖端后即可以间隔照相。照完相即可关机,取出样品液,清理转头和分析池。照相用强反差显影冲洗后即得Schlieren光路沉降图形照片。(3)沉降图像测量:Schlieren沉降图可......阅读全文
沉降系数的测定方法
沉降系数通过分析离心机测定。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。 (1)样品:
沉降系数测定
沉降系数测定是分析离心机最主要的用途。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。
离心机沉降系数的测定方法!
沉降系数测定是分析离心机最主要的用途。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。1.
沉降系数的测定原理
基本原理沉降系数的测定原理就是在恒定的离心力场下测定样品颗粒的沉降速度。因为样品颗粒很小,不能直接看到它们的沉降运动,所以把离心时样品颗粒的界面移动速度看作是样品颗粒的平均沉降速度。通常使用Schlieren和吸收光学系统来记录界面沉降图。在沉降图样品界面一般表现为一个对称的峰,峰的最高点代表界面位
离心机沉降系数的测定
沉降系数测定是分析离心机最主要的用途。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。
离心机沉降系数测定
沉降系数测定是分析离心机最主要的用途。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。
离心机沉降系数的测定原理
沉降系数测定是分析离心机最主要的用途。通常只需要几十毫克甚至几十微克样品,配制成1~2毫升溶液,装入分析池,以几小时的分析离心,就可以获得一系列的样品离心沉降图。根据沉降图可以作样品所含组分的定性分析,亦可以测定各组分的沉降系数和估计分子大小,作样品纯度检定和不均一性测定,以组分的相对含量测定。
离心机沉降系数测定实例
⑴样品:牛血清白蛋白 ⑵样品溶液与离心:按0.6%浓度将牛血清白蛋白溶于0.14M NaCl、0.01M磷酸缓冲液中,pH7.0。用12mm厚双槽分析池,一边加入溶液一边加入溶剂,约各0.3ml。分析池与平衡池平衡重量,使平衡池比分析池轻0.5g以内,然后分别装入分析转头。分析转头装于分析离心
沉降系数的应用
根据样品的质量、密度和摩擦系数进行分离的离心技术,已大量应用于生物大分子研究领域。沉降常数反映的是一定条件下沉降微粒的物理性质,当条件一定时为一常数,代表生物大分子的沉降特征和结构,可以研究生物大分子的自身聚合状态与均一性、大分子复合物的装配机制等。
超高速冷冻离心机测定生物大分子沉降系数的方法
生物大分子的沉降系数是一个很重要的物理化学参数,可用超高速冷冻离心机的界面移动法测定。超高速冷冻离心机的界面移动法可采用单扇形杯,使用Schlieren光学系统,将生物大分子样品溶液充注到分析池后,在离心力场的作用下,生物大分子在池中离开气液弯月面,从而测定其沉降速度。若样品为蛋白质溶液,可配置成1
超高速冷冻离心机测定生物大分子沉降系数的方法
生物大分子的沉降系数是一个很重要的物理化学参数,可用超高速冷冻离心机的界面移动法测定。 超高速冷冻离心机的界面移动法可采用单扇形杯,使用Schlieren光学系统,将生物大分子样品溶液充注到分析池后,在离心力场的作用下,生物大分子在池中离开气液弯月面,从而测定其沉降速度。若样品为蛋白质溶液,可
超高速冷冻离心机测定生物大分子沉降系数的方法
生物大分子的沉降系数是一个很重要的物理化学参数,可用超高速冷冻离心机的界面移动法测定。 超高速冷冻离心机的界面移动法可采用单扇形杯,使用Schlieren光学系统,将生物大分子样品溶液充注到分析池后,在离心力场的作用下,生物大分子在池中离开气液弯月面,从而测定其沉降速度
沉降系数的图像分析
当离心刚开始时如果见到有快速沉降的峰,几分钟内就到达分析池底部,一般多是由于样品发生部分聚合形成快速沉降的高聚物。离心达速后样品的的记心图像显示一个对称的峰形,一般可以认为样品是离心均一的。但是对样品的真正均一性还应用其他方法进一步检测,如电泳,层析等。某些混合样品偶然亦会给出一个对称峰的。峰形通常
什么是沉降系数?
沉降常数,又称为沉降系数(sedimentation coefficient)是指用离心法时,大分子沉降速度的量度,等于每单位离心场的速度。或s=v/(ω2‧r)。s是沉降系数,ω是离心转子的角速度(弧度/秒),r是到旋转中心的距离,v是沉降速度。沉降系数以每单位重力的沉降时间表示,并且通常为1~5
沉降系数的定义和发现
根据1924年Svedberg(离心法创始人--瑞典蛋白质化学家)对沉降系数下的定义:颗粒在单位离心力场中粒子移动的速度。沉降系数是以时间表示的。蛋白质,核酸等生物大分子的S实际上时常在10-13秒左右,故把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位,简写S,量纲为秒。因随溶剂的种类、温度的变
沉降系数的基本原理
沉降系数的测定原理就是在恒定的离心力场下测定样品颗粒的沉降速度。因为样品颗粒很小,不能直接看到它们的沉降运动,所以把离心时样品颗粒的界面移动速度看作是样品颗粒的平均沉降速度。通常使用Schlieren和吸收光学系统来记录界面沉降图。在沉降图样品界面一般表现为一个对称的峰,峰的最高点代表界面位置。通常
离心常用术语解析沉降系数
迄今为止,离心工作的重点的就是生物颗粒的制备,所以了解颗粒的沉降特性是至关重要的。沉降系数是生物大分子极其重要的物理参数,通过它可以了解生物大分子的相对分子量、分子形状和水化程度等。早在1940 年,Svedberg 和Pedersen 发展了用分析超速离心技术来测量生物大分子的沉降系数和分
离心机沉降系数值的校正
在了解了各种因素对测定值的影响后,便可拟定测定值实验方案,这包括: 1.实验应在几个离心机离心速度下进行,每个速度差应为50%; 2.溶液的pH值应在样品等电点附近; 3.避免电荷影响。介质离子强度应在0.05-1.0mol/L; 4.实验应在四种
颗粒的沉降速度与沉降系数
一个颗粒要沉降,它必须置换出位于它下方等体积的溶液,这只有当颗粒的质量大于被置换出的液体的质量时才能通过离心的手段达到,否则,在离心过程中颗粒将发生向上漂浮,而不是下沉。当颗粒在运动时,不论方向如何,它都要穿过溶剂分子,所产生的摩擦力总是与颗粒运动的方向相反。 摩擦力的大小与颗粒的运动速度成正比,
离心机沉降系数值的校正
在了解了各种因素对测定值的影响后,便可拟定测定值实验方案,这包括: 1.实验应在几个离心机离心速度下进行,每个速度差应为50%; 2.溶液的pH值应在样品等电点附近; 3.避免电荷影响。介质离子强度应在0.05-1.0mol/L; 4.实
颗粒的沉降速度与沉降系数
一个颗粒要沉降,它必须置换出位于它下方等体积的溶液,这只有当颗粒的质量大于被置换出的液体的质量时才能通过离心的手段达到,否则,在离心过程中颗粒将发生向上漂浮,而不是下沉。当颗粒在运动时,不论方向如何,它都要穿过溶剂分子,所产生的摩擦力总是与颗粒运动的方向相反。摩擦力的大小与颗粒的运动速度成正比,并且
低速大容量冷冻离心机的沉降系数
低速大容量冷冻离心机的沉降系数是低速大容量冷冻离心机中颗粒沉降速度的量度,数值上等于每单位离心力场的沉降速度,单位是秒。一、沉降系数的作用: 1、描述颗粒大小。 2、预计沉降时间。 3、测定物质的分子量。二、影响沉降系数的因素: 1、颗粒大小。 2、颗粒形状。 3、颗粒密度。
低速大容量冷冻离心机的沉降系数
低速大容量冷冻离心机的沉降系数是低速大容量冷冻离心机中颗粒沉降速度的量度,数值上等于每单位离心力场的沉降速度,单位是秒。一、沉降系数的作用: 1、描述颗粒大小。 2、预计沉降时间。 3、测定物质的分子量。二、影响沉降系数的因素: 1、颗粒大小。 2、颗粒形状。 3、颗粒密度。 4、介质
离心原理及沉降速度与沉降系数
离心是蛋白质、酶、核酸及细胞亚组分分离的最常用的方法之一,也是生化实验室中常用的分离、纯化或澄清的方法。尤其是超速冷冻离心已经成为研究生物大分子实验室中的常用技术方法。离心机(centrifuge)是实施离心技术的装置。离心机的种类很多,按照使用目的,可分为两类,即制备型离心机和分析型离心机。前者主
水分测定的测定方法
包括:卡尔·费休水分测定、库仑水分测定、露点水分测定等一.卡尔费休水分测定:卡尔费休法简称费休法,是1935年卡尔·费休(Karl·Fischer)提出的测定水分的容量分拆方法。费休法是测定物质水分的各类化学方法中,对水最为专一、最为准确的方法。经过不断改进,提高了准确度,扩大了测量范围,已被列为许
尿素测定的测定方法
(1)酶偶联速率法(尿素酶法偶联谷氨酸脱氢酶) 适于自动化分析,注意氨污染。 (2)二乙酰一肟显色法(Fearon反应) 尿素与二乙酰一肟热强酸溶液中生成红色复合物,不稳定试剂腐蚀性强现临床少用。
关于C肽测定方法的测定方法介绍
1、血清C肽测定 正常人用放射免疫测定法测C肽,一般为0.3~0.6pmoL/mL,均值为0.56±0.29pmoL/mL,葡萄糖负荷试验后,高峰出现的时间与胰岛素一致,比空腹时高5~6倍 2、24小时尿C肽测定 近年来国外已开展了24小时尿测定C肽水平的方法。这种方法不仅标本留取方便,病
血钙测定的测定方法
(1)离子钙测定:采用钙离子选择性电极进行测定。(2)总钙测定:原子吸收分光光度法、染料结合法和滴定法等。普遍应用的是络合滴定法,优点操作简便,不需特殊设备,用血量少,准确性符合要求。(总钙通常指血清或血浆钙)原子吸收分光光度法是总钙测定的参考方法,使用空气-乙炔焰,钙焰的光吸收特征是422.7nm
分析溶液的方法沉降速度法的应用
聚合物分子量的测试与表征 聚合物由一种或几种单体通过共价键连接起来的高分子量化合物,又称高分子化合物。对聚合物来说,通常所指的分子量是平均值,也就有了分子量分布。 超速离心机运转的速度范围很大,使它可测定小到蔗糖大到病毒的分子量值。它也可以测定多分散性大分子的平均分子量和分子量分布。超速离心
斯韦德贝里单位的定义
中文名称斯韦德贝里单位英文名称Svedberg unit定 义沉降系数的单位,用符号“S”表示。常用来表示生物大分子和细胞颗粒物质的沉降系数,1 S=10-13s。由于测定时的温度和溶剂对沉降系数数值有影响,因此常以水为溶剂、温度在20℃时的S值表示,写作SW,20。应用学科生物化学与分子生物学(