基因枪的分类
这一方法是依靠一种基因枪来帮助导入外源基因。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒(金粒或钨粒),将DNA吸附在表面,以一定的速度射进植物细胞,由于小颗粒穿透力强,故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组,从而实现稳定转化的目的。它具有应用面广,方法简单,转化时间短,转化频率高,实验费用较低等优点。对于农杆菌不能感染的植物,采用该方法可打破载体法的局限。基因枪的转化频率与受体种类、微弹大小、轰击压力、制止盘与金颗粒的距离、受体预处理、受体轰击后培养有直接关系。......阅读全文
基因枪法的基本原理
这一方法是依靠一种基因枪来帮助导入外源基因。基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其基本原理是通过动力系统将带有基因的金属颗粒(金粒或钨粒),将DNA吸附在表面,以一定的速度射进植物细胞,由于小颗粒穿透力强,故不需除去细胞壁和细胞膜而进入基因组,从而实现稳定转化的目的。它具有
基因枪的使用注意事项
)质粒DNA的储存浓度在枪击前最好调至1ug/ul,这样有利于制备微粒子弹时的DNA取样。质粒DNA与金粉形成复合体的比例以0.75~1Pg/mg(金粉)为宜。 2)质粒DNA的纯度和浓度是影响转化率的重要参数之一。一般每枪用0.75~l/1gDNA。3)亚精胺最好是现用现配,或者储存于一20~C冰
基因枪技术的原理和过程
基因枪技术, 又被称为生物弹道技术(Biolistic Technology) 或微粒轰击技术(Particle Bombardment Technology),是 用火药爆炸或者高压气体加速将包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒直接送入完整的组织或者细胞中的一种技术。它是基因转移技术中的一种方法。其
基因枪法的定义和原理简介
基因枪法是一种基因导入仪技术,它把遗传物质或其他物质附着于高速微弹直接射入细胞、组织和细胞器,是目前国际上最先进的基因导入技术。气体基因枪以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,使气体基因枪枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室,因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤。气体基因枪可在广泛的
基因枪技术的作用和原理
基因枪技术, 又被称为生物弹道技术(Biolistic Technology) 或微粒轰击技术(Particle Bombardment Technology),是 用火药爆炸或者高压气体加速将包裹了DNA的球状金粉或者钨粉颗粒直接送入完整的组织或者细胞中的一种技术。它是基因转移技术中的一种方法。其
基因枪的正确使用方法
1、材料准备 在9cm2培养皿上铺一薄层培养基,把材料(一般用未成熟胚、成熟胚、小愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等)平铺于培养皿中心,直径在3cm范围内。 2、金粉的处理 取60mg金粉或钨粉置于离心管中,加入lml无水乙醇,充分振荡3min,以9615g离心1rain,去上清,
基因枪法转化小麦实验(二)
实验材料 BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒 无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中,加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min,短暂离心 3s,然后弃上清。
基因枪法转化小麦实验(一)
实验材料 幼胚盾片试剂、试剂盒 乙醇漂白消毒剂仪器、耗材 诱导培养基实验步骤 下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小
基因枪活体植物基因转染
本实验所用基因传递系统(基因枪)原理:低压基因递送系统(GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1),根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计,是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示,当左侧出现输入气体压力时(如:氦气),两个腔室之间将形成巨
转基因技术基因枪法简介
利用火药爆炸或高压气体加速(这一加速设备被称为基因枪),将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后通过细胞和组织培养技术,再生出植株,选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比,基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建
基因枪技术定义与原理
基因枪法是一种基因导入仪技术,它把遗传物质或其他物质附着于高速微弹直接射入细胞、组织和细胞器,是目前国际上最先进的基因导入技术。气体基因枪以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,使气体基因枪枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室,因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤。气体基因枪可在广泛的
基因枪法转化大麦实验(二)
4. 粒子轰击幼胚(1) 幼胚渗透处理轰击前,取分离 1 天后的幼胚,放在高渗培养基中处理 4 h。每皿 20~30 枚幼胚,置于培养皿中心 1.6 cm2 范围内,盾片朝上。胚可以放得紧密一些,但相互之间不要碰到。轰击之后幼胚继续高渗处理 16 h。(2) 基因枪准备① 基因枪所有组件和内部的枪体
基因枪法转化大麦实验(一)
实验材料 麦穗试剂、试剂盒 植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材 EP 管移液枪实验步骤 1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,
气体基因枪技术的原理及应用
气体基因枪以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,使气体基因枪枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室,因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤。气体基因枪可在广泛的细胞型中得到瞬时的、稳定的和高效率的转化作用。气体基因枪有一个产生冲击波的特殊结构,在恰当的气压范围内从3.5MPa-10MPa
基因枪应用技术问答解疑
1. 基因枪转化法对受体有啥要求?基因枪对动物:任何可暴露于基因枪口外的组织(皮肤、器官)细胞、外植体和器官培养;植物:田间和温室使用、植物培养细胞和外植体;酵母、细菌、其它微生物细胞器、叶绿体、线粒体;受体广泛。2. 基因枪(颗粒轰击法)相比传统的转化那些优势?简单快速功能灵活,各类细胞类型通用只
基因枪在棉花转基因中的优势
在迄今发展起来的棉花转基因技术中,农杆菌介导的遗传转化应用最为广泛。自1987年Umbeck等通过农杆菌介导法成功获得坷字棉转基因植株后,农杆菌介导法逐渐成为国际上最普遍的转化手段,并且取得很大进展。中国农科院棉花研究所成功建立了20多个棉花品种的高效、稳定的规模化转化体系,实现了流水线操作,建立了
基因枪在棉花转基因中的优势
在迄今发展起来的棉花转基因技术中,农杆菌介导的遗传转化应用最为广泛。自1987年Umbeck等通过农杆菌介导法成功获得坷字棉转基因植株后,农杆菌介导法逐渐成为国际上最普遍的转化手段,并且取得很大进展。中国农科院棉花研究所成功建立了20多个棉花品种的高效、稳定的规模化转化体系,实现了流水线操作,建立了
基因枪在棉花转基因中的应用
在迄今发展起来的棉花转基因技术中,农杆菌介导的遗传转化应用最为广泛。自1987年Umbeck等通过农杆菌介导法成功获得坷字棉转基因植株后,农杆菌介导法逐渐成为国际上最普遍的转化手段,并且取得很大进展。中国农科院棉花研究所成功建立了20多个棉花品种的高效、稳定的规模化转化体系,实现了流水线操作,建立了
基因枪法转化小麦实验——准备供体材料
实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒乙醇漂白消毒剂仪器、耗材诱导培养基实验步骤下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小麦亚族 Tr
基因枪(颗粒轰击法)相比传统的转化优势?
简单快速功能灵活,各类细胞类型通用只需要少量的DNA和细胞能进行多质粒共同导入能输送大片段DNA没有无光的基因或蛋白被转导
基因枪的操作方法及注意事项
一.基因枪的操作方法 1.材料准备 在9cm2培养皿上铺一薄层培养基,把材料(一般用未成熟胚、成熟胚、小愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等)平铺于培养皿中心,直径在3cm范围内。 2.金粉的处理 取60mg金粉或钨粉置于离心管中,加入lml无水乙醇,充分振荡3min,以961
基因枪子弹制备仪使用注意事项
子弹制备仪最大的注意事项就是在吹气之前,钢瓶的压力要调到0.1MPa以下,太大了容易爆破子弹制备仪的软管。
基因枪都应用于哪些方面
基因表达研究、基因治疗、遗传免疫、神经细胞染料标记、遗传育种。
基因枪法可以得到永久转基因植株吗?
基因枪法注入基因后,该植物原则上一直都是转基因植物,无性繁殖的后代也一直是转基因植物,而其种子繁殖的下一代则不一定,有可能种子繁殖的下一代含有目标基因,也可能没有。
基因枪转化法对受体有啥要求?
基因枪对动物:任何可暴露于基因枪口外的组织(皮肤、器官)细胞、外植体和器官培养;植物:田间和温室使用、植物培养细胞和外植体;酵母、细菌、其它微生物细胞器、叶绿体、线粒体;受体广泛。
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇),高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar),无水乙醇,无菌去离子水,12.5 M CaCl2 ,0.1 M亚精胺,等渗培养基(MS培养基)实验设备高速离心机,1.5 ml Ep管,涡旋器,超净台,基因枪,气瓶,激光共聚焦显微
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验概要本实验在构建了OsAGAP瞬时表达载体的基础上,采用基因枪轰击洋葱表皮观察了GFP的瞬时表达。主要试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇),高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar),无水乙醇,无菌去离子水,12.5 M CaCl2,0.1 M亚精胺,等渗培养基
基因枪法转化小麦实验——DNA包裹金粉颗粒
实验材料BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材离心管实验步骤1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中,加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min,短暂离心 3s,然后弃上清。重复用乙
美国Wealtec-最新推出基因枪GDS80
美国Wealtec公司是一家实验室科学仪器的专业研发生产商,其最新研发的基因枪GDS-80,是一款创新的基因传递工具。因其低压传送基因细胞损害小、可不用金粉直接传送裸DNA方便又费用低、还有便携及噪音低等优点,刚推向市场即受到热捧,迅速成为广大转基因科研工作者的首选。 产品特点:
实验室检验检测设备基因枪的使用方法
1、材料准备在9cm2培养皿上铺一薄层培养基,把材料(一般用未成熟胚、成熟胚、小愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等)平铺于培养皿中心,直径在3cm范围内。2、金粉的处理取60mg金粉或钨粉置于离心管中,加入lml无水乙醇,充分振荡3min,以9615g离心1rain,去上清,再加入lml无菌水充分混匀后