聚丙烯酰氨凝胶电泳的原理

1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二胺;过硫酸铵或加核黄素后用紫外光(波长253.7毫微米)引发聚合。3、聚合时丙烯酰胺分子通过加成反应形成长链,双体的作用是在长链之间形成交联,成为具有三维网状结构的凝胶。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用,从而增高了它的分辨能力。4、聚合时,根据分离的需要,可以用改变单体溶液浓度或增减双体比例的办法制成孔度大小不同的凝胶。在分离血清蛋白时,采用的丙烯酰胺总浓度为6.5%,内含单体96%,双体4.5%。5、聚合物分子中含有很多酰胺基,所以凝胶具有良好的亲水性,能在水中溶胀但不溶解。......阅读全文

酰氨咪唑的药代动力学

  酰氨咪唑口服吸收缓慢,且因人而异。口服酰氨咪唑400mg后4~5h血药浓度达峰值8~10μg/ml,但个体间差异很大,可在0.5~25μg/ml之间变动。酰氨咪唑抗癫痫作用的起效时间相差很大,约经8~72h可缓解三叉神经痛。达到稳态血药浓度的时间为40h(8~55h),成人的治疗性血药浓度为4~

丙氨酰谷氨酰胺的检查方法

酸度取本品1.0g,加水10ml使溶解,依法测定(通则0631),pH值应为5.0~6.0。溶液的澄清度与颜色取本品1.0g,加水5ml使溶解,溶液应澄清无色。如显浑浊,与1号浊度标准液(通则0902第一法)比较,不得更浓;如显色,与黄色1号标准比色液(通则0901第一法)比较,不得更深。氯化物取本

甘氨酰谷氨酰胺的检查方法

酸度取本品1.0g,加水20ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为4.5~6.0。溶液的透光率取本品1.0g,加水溶解并稀释至20ml后,照紫外可见分光光度法(通则0401),在430nm的波长处测定透光率,不得低于98.0%。溶液的澄清度取本品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中含0.10

关于氨酰tRNA合成酶的介绍

  氨酰-tRNA合成酶有四个结构域和三个活性位点。由于每种tRNA只能结合特定氨基酸,所以氨酰-tRNA合成酶必须确保tRNA和氨基酸之间的正确配对。  其四个结构域分别结合tRNA受体臂(第1结构域)、反密码子区域(第2结构域,其中1个碱基用来被识别)、ATP和正确AA(第3结构域)、错误AA(

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理特性和SDS聚丙烯酰胺凝胶电...1

聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂又称为共聚体的N, N-甲叉双丙烯酰胺(methylene-bisacrylamide,简称Bis)在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE)。与

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2.分子筛效应分子量或分子大小和形状不同的蛋白质通过一定孔径分离胶时,受阻滞的程度不同而表现出不同的迁移率,这就是分子筛效应。经上述浓缩效应后,快、慢离子及蛋白质均进入pH8.9的同一孔径的分离胶中。此时,高电压消失,在均一的电压梯度下,由于甘氨酸解离度增加,加之其分子量小,则有效泳动率增加,赶上并

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理特性和SDS聚丙烯酰胺凝胶电...2

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electrophoresis,简称PAGE)根据其有无浓缩效应,分为连续系统与不连续系统2大类,前者电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同,带电颗粒在电场作用下,主要靠电荷及分子筛效应;后者电泳体系中由于缓冲液离子

关于苯甲酰酪氨酰对氨基苯甲酸试验的简介

  苯甲酰-酪氨酰-对氨基苯甲酸试验是间接检测胰腺外分泌功能的一种试验,对诊断胰腺疾病有一定的特异性,但敏感性不高,仅能检出中度以上的胰腺外分泌功能不全,对轻度胰腺外分泌功能不全者敏感性差。  检查目的:本试验通过测定尿中对氨基苯甲酸含量,间接反映胰酶分泌或小肠吸收功能。

聚丙烯酰胺凝胶电泳的作用

  SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白 -SDS胶束,所带的负

聚丙烯酰胺凝胶电泳的介绍

  用聚丙烯酰胺为支持基质的电泳程序。一般说来,实现聚丙烯酰胺凝胶电泳有两种类型。⑴单向电泳:采用完整的蛋白质或用十二烷基硫酸钠(SDS)处理的蛋白质的单向泳动,在有凝胶的平板上平行分离(过去也有用在玻管中的圆筒形棒状凝胶进行电泳的,现已很少有人使用)。⑵双向电泳:首先用天然蛋白质进行分离,然后凝胶

RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳

一、原理核酸(ribonucleicacid,RNA)分子在一定pH值的缓冲液中带有电荷,将其放入电场中,可向与其所带电荷电性相反的电极移动。聚丙烯酰胺凝胶具有分子筛效应,核酸分子大小、形状不同,故在电场作用下,核酸分子在聚丙烯酰胺凝胶中泳动速度不同,依此可达到分离纯化的目的。二、材料、仪器设备及试

聚丙烯酰胺凝胶电泳的定义

聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。

聚丙烯酰胺凝胶电泳的介绍

  作用原理:聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开

聚丙烯酰胺凝胶电泳的定义

聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。

凝胶电泳的原理

当一种分子被放置在电场当中时,它们就会以一定的速度移向适当的电极,这种电泳分子在电场作用下的迁移速度,叫做电泳的迁移率。它同电场的强度和电泳分子本身所携带的净电荷数成正比。也就是说,电场强度越大、电泳分子所携带的净电荷数量越多,其迁移的速度也就越快,反之则较慢。由于在电泳中使用了一种无反应活性的稳定

蛋白质分析技术(Analytical-Techniques-for-Protein)2

二、透析和超滤1.透析(Dialysis):就是利用蛋白质分子不能通过半透膜(Semipermeable membrane)而小分子可以自由透过的性质,使蛋白质与小分子物质分开。作用:脱盐、无机离子和小分子物质等。透析膜:动物膜、羊皮纸、火棉胶、赛璐玢或其他材料等。2.超滤(ultrafiltrat

聚丙烯酰胺凝胶电泳法

1.仪器装置通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极,铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂 (1)溶液A 取三羟甲基氨基甲烷36.6g,四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml,再加水溶解并稀释至100ml,置棕色瓶内,在

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵 浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤 SDS 电泳的制胶方法与 “垂直平板电泳的制胶” 和 “水平平板电泳的制胶” 所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同,只是在 SDS 电泳制胶时单体贮液不需要抽气

中性聚丙烯酰胺凝胶电泳

            实验材料 DNA 样品 试剂、试剂盒 丙烯酰胺 亚甲双丙烯酰胺 过硫酸铵 乙醇

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

制胶(用于垂直电泳或水平电泳) 样品的准备 电泳 检测             试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液

聚丙烯酰胺凝胶电泳简介

  聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。  作用原理:聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Nati

中性聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验材料 DNA 样品试剂、试剂盒 丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺过硫酸铵乙醇凝胶载样缓冲液KOH 甲醇硅化液TBE 电泳缓冲液TEMED仪器、耗材 夹子或铁皮制纸夹电泳装置玻璃板梳子和间隔片凝胶密封带凝胶测温条微量移液器及拉长的塑料洗头凡士林注射器实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液丙烯酰胺:亚甲双丙烯酰

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)

  原理   聚丙烯酰胺(polyacrylamide,PAA)凝胶是丙烯酰胺(acry—lamide,Acr),在交联剂甲叉双丙烯酰胺(bisacrylamide,Bis)的作用下经聚合而形成的一种大分子化合物。 Acr的聚合作用只有在自由基存在时才能发生,需要一个催化诱发剂系

中性聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验材料DNA 样品试剂、试剂盒丙烯酰胺亚甲双丙烯酰胺过硫酸铵乙醇凝胶载样缓冲液KOH 甲醇硅化液TBE 电泳缓冲液TEMED仪器、耗材夹子或铁皮制纸夹电泳装置玻璃板梳子和间隔片凝胶密封带凝胶测温条微量移液器及拉长的塑料洗头凡士林注射器实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液丙烯酰胺:亚甲双丙烯酰胺(29

聚丙烯酰胺凝胶电泳概述

  聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE(Polyacrylamide gel electrophoresis),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过

丙氨酰谷氨酰胺的鉴别方法

(1)取本品约20mg,加水1ml使溶解,加茚三酮试液5滴,加热,即显蓝紫色(2)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致(3)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致(通则0402

甘氨酰谷氨酰胺的含量测定方法

取本品约0.15g,精密称定,加无水甲酸2ml,冰醋酸40ml,照电位滴定法(通则0701),用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1m高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于20.32mg的C7H13N3O4。

氨酰tRNA合成酶的基本信息

氨酰-tRNA合成酶(Aminoacyl-tRNA synthases )是一类参与将氨基酸结合到其对应的tRNA上的过程的酶 [1]  。氨酰-tRNA合成酶参与的合成分两步进行。第一步是氨酰-tRNA合成酶识别它所催化的氨基酸以及另一底物ATP,在氨酰-tRNA合成酶的催化下,氨基酸的羧基与AM

甘氨酰谷氨酰胺的鉴别方法

(1)取本品约20mg,加水约1ml溶解,加茚三酮试液5滴,加热,即显蓝紫色(2)取本品约0.2g,置试管中,加氢氧化钠试液5ml,缓缓煮沸,即发生氨臭,能使润湿的红色石蕊试纸变蓝。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致(通则

甘氨酰谷氨酰胺的基本性状

本品为白色或类白色结晶或结晶性粉末无臭。本品在水中易溶,在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。比旋度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含40mg的溶液,依法测定(通则0621),比旋度为-1.2°至-2.4°。