辣根过氧化物酶的实验方法和原理
实验原理过氧化物酶催化以下反应：2 H2O2 →O2+2H2O这一类酶以铁卟啉为辅基，所以属血红素蛋白质类（hemeProteins）。过氧化物酶在生物界分布极广，在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。本实验是以辣根为原料，经过水的抽提，硫酸铵和丙酮分级分离，再经锌离子纯化，透析除盐，冷冻干燥，最后制得高纯度的辣根过氧化物酶。辣根过氧化物酶分子量在40,000左右，是一种含亚铁血红素的蛋白质，等电点7.2；易溶于水，溶解度为5%（W/V），溶液呈棕红色，透明；也溶于0.58饱和度以下的硫酸铵溶液，而0.62饱和度以上则不溶。该酶最适pH为7.0（对愈创木酚为氢给体而言）。在室温下HRP在几周内保持稳定，加热到63℃后15分钟内稳定。辣根过氧化物酶氧化还原电势很低，pH6.08时，E’0= -0.2070V；pH为7.71时，E’0= -0.5787V。辣根过氧化物酶的作用机理可分以下几步：第一步第一步，形成绿色有活性的酶一底物......阅读全文
辣根过氧化物酶的实验方法和原理
实验原理过氧化物酶催化以下反应：2 H2O2 →O2+2H2O这一类酶以铁卟啉为辅基，所以属血红素蛋白质类（hemeProteins）。过氧化物酶在生物界分布极广，在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。本实验是以辣根为原料，经过水的抽提，硫酸铵和丙酮分级分离，再经锌离子纯化，透析除盐，冷冻干燥，最
辣根过氧化物酶的实验原理
过氧化物酶催化以下反应： 2 H2O2 →O2+2H2O 这一类酶以铁卟啉为辅基，所以属血红素蛋白质类（hemeProteins）。过氧化物酶在生物界分布极广，在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。 本实验是以辣根为原料，经过水的抽提，硫酸铵和丙酮分级分离，再经锌离子纯化，透析除盐，冷冻
PCR实验的原理和方法步骤
原理就是碱基互补原则步骤模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至40~60℃左右，引物与模板
PCR实验的原理和方法步骤
原理就是碱基互补原则步骤模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至40~60℃左右，引物与模板
PCR实验的原理和方法步骤
原理就是碱基互补原则步骤模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至40~60℃左右，引物与模板
PCR实验的原理和方法步骤
原理就是碱基互补原则步骤模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至40~60℃左右，引物与模板
PCR实验的原理和方法步骤
原理就是碱基互补原则步骤模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至40~60℃左右，引物与模板
PCR实验的原理和方法步骤
原理就是碱基互补原则步骤模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时 聚合酶链式反应间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至40~60℃左右，引物与模板
牛顿环实验的方法和原理
牛顿环实验是这样的：取来两块玻璃体，一块是14英尺望远镜用的平凸镜，另一块是50英尺左右望远镜用的大型双凸透镜。在双凸透镜上放上平凸镜，使其平面向下，当把玻璃体互相压紧时，就会在围绕着接触点的周围出现各种颜色，形成色环。于是这些颜色又在圆环中心相继消失。在压紧玻璃体时，在别的颜色中心最后现出的颜色，
免疫印迹实验的原理和方法
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旷场实验原理和方法步骤
【实验目的】观察实验动物在新异环境中的自主行为、探究行为与紧张度。【实验器材】实验装置由旷场反应箱和数据自动采集和处理系统两部分组成，由上海欣软信息科技有限公司提供。大鼠旷场反应箱高30～40cm，底边长100cm，内壁涂黑，底面平均分为25个4cm×4cm小方格，正上方2 m处架一数码摄像头，其视
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RNA的提取和cDNA合成原理和实验方法
第一节 概 述 从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加
重组子筛选的原理和实验方法
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RNA干扰回复实验的方法和原理介绍
RNA干扰回复实验，主要是为了说明Off-target效应。Off-target效应Off-target effects（脱靶效应）最早由Dharmacon科学家Jackson和他的同事们提出（Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can Induce
沉淀反应实验原理、材料和实验方法（3）
五 对流免疫电泳 【 实验原理 】 当抗原和抗体在琼脂介质中电泳时 ，抗体的 PI 比较高，在适当的 pH 值下，抗体带正电荷而抗原带负电荷，故在电场中抗体向阴极方向移动而抗原向阳极运动，直至相遇后形成沉淀线，其原理与双向免疫扩散相同，但具有方法简便，快速及一次电泳可以检测多个样品等特
沉淀反应实验原理、材料和实验方法（1）
可溶性抗原（如血清中的蛋白,组织浸出液,细胞裂解液等）与其相应的抗体在溶液中或凝胶中结合,若比例合适,可形成肉眼可见的抗原-抗体复合物,这就是免疫沉淀反应。免疫沉淀反应可以在小玻璃管中或毛细玻璃管及凝胶平板中进行。在用凝胶平板做实验时,常用琼脂糖凝胶做介质,有的加电流,使反应更快更灵
沉淀反应实验原理、材料和实验方法（1）
可溶性抗原（如血清中的蛋白,组织浸出液,细胞裂解液等）与其相应的抗体在溶液中或凝胶中结合,若比例合适,可形成肉眼可见的抗原-抗体复合物,这就是免疫沉淀反应。免疫沉淀反应可以在小玻璃管中或毛细玻璃管及凝胶平板中进行。在用凝胶平板做实验时,常用琼脂糖凝胶做介质,有的加电流,使反应更快更灵敏。一、环状沉淀
沉淀反应实验原理、材料和实验方法（2）
三 双向扩散 【 实验原理 】 双向免疫扩散是指抗原和抗体在同一凝胶内部扩散，彼此相遇后形成特 异性的沉淀线。该反应是将抗原和抗体加入同一凝胶中两个相隔一定间距的小孔内，使两者进行相互扩散。当抗原和抗体浓度之比相适宜时，彼此相遇形成一白色弧型沉淀线。 【 实验材料
沉淀反应实验原理、材料和实验方法（2）
三 双向扩散 【 实验原理 】 双向免疫扩散是指抗原和抗体在同一凝胶内部扩散，彼此相遇后形成特 异性的沉淀线。该反应是将抗原和抗体加入同一凝胶中两个相隔一定间距的小孔内，使两者进行相互扩散。当抗原和抗体浓度之比相适宜时，彼此相遇形成一白色弧型沉淀线。 【 实验材料
RNA的提取和cDNA合成原理和实验方法(3)
第三节 植物病毒RNA 提取大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获得满意结果。一、材料提纯TMV病毒液（10mg/ml）。二、设备冷冻台式离心机，低温真空干燥仪，电泳仪，电泳槽。三、试剂TE-饱和酚:氯仿（1:1），氯仿
犬硝酸测定尿蛋白的方法和实验原理
犬硝酸测定尿蛋白的方法和实验原理①凯氏定氮法 原理：蛋白质平均含氮量为16%。当样品与浓硫酸共热，蛋白氮转化为铵盐，在强碱性条件下将氨蒸出，用加有指示剂的硼酸吸收，最后用标准酸滴定硼酸，通过标准酸的用量即可求出蛋白质中的含氮量和蛋白质含量。 ②双缩脲法 原理：尿素在180℃下脱氨生成双缩
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
原理 在细胞凋亡的过程中，基因组DNA会断裂产生双链、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段，这些DNA链的缺口可以利用没标记法来识别。试剂盒就是通过催化DNA断端，来标记缺口。酶底物显色后，可以光镜检查被染色的细胞。
Southern印迹杂交实验原理和方法1
实验原理核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。但为了进一
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程，染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ² 和Mg² 依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180～200bp核小体DNA多聚体。
Southern印迹杂交实验原理和方法3
真空转移法的最大优点是迅速，可在转膜的同时进行DNA变性与中和整个过程约需30～60分钟。但在操作中应注意两个问题，一是真空压力不能太大，若压力过大，凝胶被压缩，转移效率会降低；二是真空转移液要密封严，防止漏气影响压力的产生。下表列出了不同的印迹方法。表10－2 不同印迹方法的比较表五、探针标记用于
JAM检测技术检测原理和实验方法
JAM检测技术是用于测定细胞死亡或凋亡的方法，如51Cr稀放法事基于细胞死亡往往伴随有细胞膜破裂及细胞质的释放，用51Cr或125I标记相关的靶细胞，与效应细胞共培养一定时间后，测定一定体积的培养上清中的放射性计数，以反映细胞损伤情况。而人们发现，细胞死亡的早期反应，细胞内DNA被酶裂解成180kb
Southern印迹杂交实验原理和方法2
（一） 细管虹吸印迹法此法是利用浓盐酸转移缓冲液的推动作用将凝胶中的DNA转移到固相支持物上，转移方式见图10－1：容器中的转移缓冲液含有高浓度的NaCl和柠檬酸钠，上层吸水纸的虹吸作用使缓冲液通过滤纸桥、滤纸、凝胶、硝酸纤维素膜或尼龙膜向上运动，同时带动凝胶中的DNA片段垂直向上运动而滞留在膜上。
琼脂糖凝胶电泳实验原理和实验方法
[实验原理]电泳是现在用于分离和纯化DNA片段的最常用技术。当装备一块“胶”即包含电解质的多孔支持介质并把它置于静电场中，DNA分子将向阳极移动，这是因为DNA分子沿其双螺旋骨架两侧带有含负电荷的磷酸根残基。当DNA长度增加时，来自电场的驱动力和来自凝胶的阻力之间的比率就会降低，不同长度的DNA片段
测定土壤微生物的实验原理和方法
一、实验原理测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，常不易分辨。菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板，一般细菌则采用彼得罗夫· 霍泽（Petrof Hausser）细菌计数板。两种计数板的原理