脱氧核酶的研究前景
对于脱氧核酶的研究有望成为基因功能研究、核酸突变分析、治疗肿瘤、对抗病毒及肿瘤等疾病的新型基因治疗药物的新型核酸工具酶。尽管自然界没有发现脱氧核酶,但实验已证明DNA具有酶活性。由于脱氧核酶比核酶更加稳定,且相对生产成本低廉,脱氧核酶的开发应用已成为新药开发的热门课题。目前对脱氧核酶的结构和功能已有初步了解,但多数研究仍处于实验阶段,还必须继续寻找新的催化效率更高的脱氧核酶,进一步了解其结构和功能特点。目前最具有应用前景的是脱氧核酶10-23,作为一种潜在的强有力的RNA特异性切割工具,无论是在体外应用于RNA限制性内切酶,还是在体内作为RNA水平上的基因失活剂,具有很好的应用前景。脱氧核酶10-23由29个核苷酸组成,其中催化中心有15个核苷酸(GGCTAGCTACAACGA),催化中心的两侧各连有7个核苷酸的结合臂,用于结合底物RNA。切割反应发生在RNA分子的嘌呤(G或A)与嘧啶(U或C)之间,切割反应产生的5′端产物带有......阅读全文
脱氧核酶的研究前景
对于脱氧核酶的研究有望成为基因功能研究、核酸突变分析、治疗肿瘤、对抗病毒及肿瘤等疾病的新型基因治疗药物的新型核酸工具酶。尽管自然界没有发现脱氧核酶,但实验已证明DNA具有酶活性。由于脱氧核酶比核酶更加稳定,且相对生产成本低廉,脱氧核酶的开发应用已成为新药开发的热门课题。目前对脱氧核酶的结构和功能已有
关于脱氧核酶的研究前景和展望介绍
对于脱氧核酶的研究有望成为基因功能研究、核酸突变分析、治疗肿瘤、对抗病毒及肿瘤等疾病的新型基因治疗药物的新型核酸工具酶。 尽管自然界没有发现脱氧核酶,但实验已证明DNA具有酶活性。由于脱氧核酶比核酶更加稳定,且相对生产成本低廉,脱氧核酶的开发应用已成为新药开发的热门课题。目前对脱氧核酶的结构和
脱氧核酶实验
实验方法原理 随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。实验材料 脱氧核酶试剂、试剂盒 脱氧核酶切割缓冲液终止缓冲液脂质体仪器、耗材
脱氧核酶实验
随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理随着体外分子实验技术的发展,近年
脱氧核酶实验
实验方法原理 随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。
脱氧核酶的分类
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调控蛋
关于脱氧核酶的简介
1994年,Gerald.F.Joyce等报道了一个人工合成的35bp的多聚脱氧核糖核苷酸能够催化特定的核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸形成的磷酸二酯键,并将这一具有催化活性的DNA称为脱氧核酶或DNA酶(DNA enzyme,DE)。 1995年,Cuenoud等在Nature报道了一个具有连接酶
脱氧核酶的分类介绍
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调
脱氧核酶的功能介绍
1、RNA切割作用脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式:(1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个
脱氧核酶的功能介绍
1、RNA切割作用脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式:(1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个
脱氧核酶的基本信息
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,具有
关于脱氧核酶的基本介绍
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,
脱氧核酶的作用和主要类型
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,具有
脱氧核酶的DNA切割作用介绍
脱氧核酶不仅具有RNA切割作用,而且也能切割DNA 分子。已筛选出了两类具有DNA自我切割作用的脱氧核酶,Ⅰ类自我切割脱氧核酶需要Cu2+和维生素C参与,而Ⅱ类脱氧核酶只需要Cu2+。Ⅱ类脱氧核酶以顺式方式切割DNA靶分子,与不加酶的反应相比,它提高催化效率106倍。多数脱氧核酶只能与底物形成二
脱氧核酶DNA激酶活性功能的介绍
脱氧核酶还具有DNA激酶活性,类似T4多核苷酸激酶的作用,能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基团转移到DNA的5′-OH上。从一个随机单链DNA库中筛选出50个不同序列类型的具有自我磷酸化作用的脱氧核酶,都能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基团转移到DNA的5′-OH上,实现DNA分子5′-OH端自
关于脱氧核酶的RNA切割作用介绍
脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式: (1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个随机序列库
根据催化功能将脱氧核酶分类
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调控蛋
脱氧核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 脱氧核酶 无RNA酶的DMA酶 切割底物RNA 试剂、试剂盒 5X反应缓冲液
脱氧核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒 5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实验步骤 一、材料与设备1) 脱氧核酶 (其设计与制格参见脱氧核酶相关章节)2)5X 反应缓冲液:750Tnmol/LNaCl,200 mmol/LTris-HCl (pH8.0)3)5
核酶的研究历史
1982年,美国科学家T.Cech和他的同事在对“四膜虫编码rRNA前体的DNA序列含有间隔内含子序列”的研究中发现,自身剪接内含子的RNA具有催化功能,并因此获得了1989年诺贝尔化学奖。为了与酶(enzyme)区分,Cech将它命名为ribozyme,其中文译名“核酶”已得到大多数人的认可。因为
3.8-脱氧核酶切割-RNA-专一位点
脱氧核酶是一类由三十几个脱氧核苷酸构成的寡聚脱氧核糖核苷酸,制备容易,使用方便,是体外在特定位点切割 RNA 的有效方法。常用于体外切割 RNA 底物的脱氧核酶是「10~23」型脱氧核酶。实验材料脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实
核酶的发现与研究
核酶最早由Cech和 Altman(1989年诺贝尔化学奖获得者)发现。1967年,Woese、 Crick与 Orgel等基于RNA二级结构的复杂程度提出其可能有催化活性;1982年,Cech在研究四膜虫rRNA前体剪接时发现其内含子有自我剪接活性;1983年,Altman在研究细菌tRNA前体时
核酶研究的意义和应用
①核酶的发现和研究使我们对RNA的生理功能有了进一步的认识,即它既是遗传信息的载体,又是生物催化剂,兼有DNA和蛋白质两类生物大分子的功能。 [2] ②核酶的发现动摇了所有生物催化剂都是蛋白质的传统观念。 ③核酶的发现对于了解生命进化过程具有重要意义,RNA或许是最早出现的生物大分子。 4.核酶应用
核酶种类哪些核酶属于天然核酶
目前发现的天然核酶其化学本质均为RNA,其催化作用主要有:①核苷酸转移作用,②水解反应,即磷酸二酯酶作用,③磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用,④脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用,⑤RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用.而人工合成的核酶其化学本质为DNA,故又称为脱氧核酶,其催化作用为水解RNA分子的
核酶实验——其他类型的核酶
实验方法原理除锤头型核酶与发夹型核酶以外,还有肝炎 δ 核酶和 Neurospara VS 核酶等小分子核酶。此外,自然界中还存在着大分子核酶,包括 Ⅰ 型内含子、Ⅱ 型内含子和 RNaseP 的 RNA 亚基。实验材料RNase T1RNase U2试剂、试剂盒上样缓冲液终止缓冲液仪器、耗材聚丙烯
核酶实验——发夹型核酶实验
实验方法原理作为有催化活性的 RNA,发夹型核酶在生物体内的作用是位点特异的核酸酶以及 RNA 连接酶。发夹型核酶的催化基序最先是在烟草环斑病毒负链的卫星 RNA 中发现的,它表现一种可逆的自切割反应,最终使滚环复制的产物形成成熟的病毒核酸。发夹型核酶与锤头型核酶都能催化产物的连接,但是发夹型核酶的
核酶实验——锤头型核酶实验
核酶(ribozyme ) 是一类具有酶特性的 RNA 分子,通过催化靶位点 RNA 链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物 RNA 分子,从而阻断基因的表达。核酶广泛存在于从低等到高等的多种生物中,参细胞内 RNA 及其前体的加工和成熟过程。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法
脱氧核酶的卟啉金属螯合作用和过氧化物酶活性
已筛选出一个只有24 nt富含鸟嘌呤G的脱氧核酶“PS5M”,PS5M形成一个G四聚体结构的催化活性中心,结合一个扭曲的卟啉分子,使卟啉分子类似于金属螯合反应的中间过渡态,从而促进了金属的螯合作用,PS5M还能与血红素结合,形成的复合物具有过氧化物酶活性,能催化氯高铁血红素-氢过氧化物的分解。
核酶的作用
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。核酶一词用于描述具有催化活性的RNA
核酶的分类
核酶是具有催化活性的RNA ,主要参加RNA的加工与成熟。天然核酶可分为四类:(1)异体催化剪切型,如RNaseP;(2)自体催化的剪切型,如植物类病毒、拟病毒和卫星RNA;(3)第一组内含子自我剪接型,如四膜虫大核26SrRNA;(4)第二组内含子自我剪接型。利用反义技术研制的药物称反义药物。反