脱氧核酶切割RNA专一位点
实验材料 脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒 5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实验步骤 一、材料与设备1) 脱氧核酶 (其设计与制格参见脱氧核酶相关章节)2)5X 反应缓冲液:750Tnmol/LNaCl,200 mmol/LTris-HCl (pH8.0)3)5X 乙酸镁或氯化镁:300 mmol/L4) 无 RNA 酶的 DMA 酶5) 切割底物 RNA6) 无水乙醇7) 水饱和酚二、操作方法1) 脱氧核酶切割底物 RNA 反应体系:加入底物 RNA(终浓度为 1~10umol/L、脱氧核酶 (终浓度为 30umol/L)、反应缓冲液 (终浓度为 15 mmol/LNaCl),4 mmol/LTris-HCl(pH8.0)2) 于 95°C 加热 3~4 min 从而变性 RNA 底物和脱氧核酶,然后置于冰上 5 min3) 再于 25℃ 温育 10 min4) 添加 5X 反应缓冲液,使......阅读全文
脱氧核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒 5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实验步骤 一、材料与设备1) 脱氧核酶 (其设计与制格参见脱氧核酶相关章节)2)5X 反应缓冲液:750Tnmol/LNaCl,200 mmol/LTris-HCl (pH8.0)3)5
脱氧核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 脱氧核酶 无RNA酶的DMA酶 切割底物RNA 试剂、试剂盒 5X反应缓冲液
3.8-脱氧核酶切割-RNA-专一位点
脱氧核酶是一类由三十几个脱氧核苷酸构成的寡聚脱氧核糖核苷酸,制备容易,使用方便,是体外在特定位点切割 RNA 的有效方法。常用于体外切割 RNA 底物的脱氧核酶是「10~23」型脱氧核酶。实验材料脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实
核酶切割-RNA-专一位点
核酶切割 RNA 专一位点 实验材料 合成的核酶分子 切割底物RNA 试剂、试剂盒
核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 合成的核酶分子切割底物RNA试剂、试剂盒 Tris-HClMgCl2实验步骤 一、材料与设备1)500 mmol/LTris-HCl(pH7.4)2)100 mmol/LMgCl23) 合成的核酶分子4) 切割底物 RNA二、操作方法1) 制备切割混合构:不超过 l0 pmol 底物 RN
3.7-核酶切割-RNA-专一位点
核酶是获得长片段 RNA 特定位点切割产物的有用工具,可用于研究 RNA 修饰,修饰位点分析,以及获得具布不间长度末端的 RNA 转录产物。实验材料合成的核酶分子切割底物RNA试剂、试剂盒Tris-HClMgCl2实验步骤一、材料与设备1)500 mmol/LTris-HCl(pH7.4)2)100
关于脱氧核酶的RNA切割作用介绍
脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式: (1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个随机序列库
脱氧核酶的DNA切割作用介绍
脱氧核酶不仅具有RNA切割作用,而且也能切割DNA 分子。已筛选出了两类具有DNA自我切割作用的脱氧核酶,Ⅰ类自我切割脱氧核酶需要Cu2+和维生素C参与,而Ⅱ类脱氧核酶只需要Cu2+。Ⅱ类脱氧核酶以顺式方式切割DNA靶分子,与不加酶的反应相比,它提高催化效率106倍。多数脱氧核酶只能与底物形成二
位点专一诱变的概念
中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
位点专一诱变的定义
中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
什么是位点专一诱变?
中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
位点专一诱变的定义
中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
脱氧核酶实验
实验方法原理 随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。
脱氧核酶实验
实验方法原理 随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。实验材料 脱氧核酶试剂、试剂盒 脱氧核酶切割缓冲液终止缓冲液脂质体仪器、耗材
脱氧核酶实验
随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理随着体外分子实验技术的发展,近年
脱氧核酶的功能介绍
1、RNA切割作用脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式:(1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个
脱氧核酶的功能介绍
1、RNA切割作用脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式:(1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个
核酶和核酸酶的区别
核酶是有催化活性的RNA, 即化学本质是RNA,却具有酶的催化功能。核酶的功能很包括切割RNA、切割DNA,、连接RNA、磷酸酶活性等。与蛋白质酶相比,核酶的催化效率较低,是一种较为原始的催化酶。核酶可降解特异的mRNA序列。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。 它的发现打破了酶是蛋白质的传
脱氧核酶的分类
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调控蛋
分子遗传学词汇位点专一诱变
中文名称:位点专一诱变英文名称:site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定 义:使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
凝血酶切割位点的定义
中文名称凝血酶切割位点英文名称thrombin cleavage site定 义基因工程表达系统中融合蛋白常用的连接序列,凝血酶处理可将融合蛋白中目的蛋白与非目的蛋白的肽段分离,最适切割位点是:P4-P3-P2-Arg↓-P1′-P2′,式中P4和P3为疏水氨基酸,P1′和P2′为非酸性氨基酸,↓
脱氧核酶的研究前景
对于脱氧核酶的研究有望成为基因功能研究、核酸突变分析、治疗肿瘤、对抗病毒及肿瘤等疾病的新型基因治疗药物的新型核酸工具酶。尽管自然界没有发现脱氧核酶,但实验已证明DNA具有酶活性。由于脱氧核酶比核酶更加稳定,且相对生产成本低廉,脱氧核酶的开发应用已成为新药开发的热门课题。目前对脱氧核酶的结构和功能已有
脱氧核酶的分类介绍
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调
关于脱氧核酶的简介
1994年,Gerald.F.Joyce等报道了一个人工合成的35bp的多聚脱氧核糖核苷酸能够催化特定的核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸形成的磷酸二酯键,并将这一具有催化活性的DNA称为脱氧核酶或DNA酶(DNA enzyme,DE)。 1995年,Cuenoud等在Nature报道了一个具有连接酶
根据催化功能将脱氧核酶分类
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调控蛋
概述位点专一重组的相关信息
溶原状态同裂解状态是可以转换的。当λ噬菌体DNA整合在宿主基因组中,则进入溶原状态;当噬菌体DNA从宿主基因组中切离下来,则转入裂解状态。这种整合和切离,都是通过DNA和细菌DNA特定的附着位点之间的重组来实现的。大肠杆菌DNA上的att(attach)位点记为attλ或attB,长度为23 b
关于位点专一重组的基本介绍
λ噬菌体感染大肠杆菌后,或是进入裂解生长,或是进入溶原生长。当噬菌体裂解宿主细胞的功能受到抑制,噬菌体DNA整合进宿主染色体并随宿主染色体而进行复制,或作为一个独立的郊犹?/SPAN>(如P22)。这称为溶原性(lysogeny),这类噬菌体称为溶原性噬菌体(lysogenic phage)。当
脱氧核酶的基本信息
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,具有
关于脱氧核酶的基本介绍
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,
关于脱氧核酶的研究前景和展望介绍
对于脱氧核酶的研究有望成为基因功能研究、核酸突变分析、治疗肿瘤、对抗病毒及肿瘤等疾病的新型基因治疗药物的新型核酸工具酶。 尽管自然界没有发现脱氧核酶,但实验已证明DNA具有酶活性。由于脱氧核酶比核酶更加稳定,且相对生产成本低廉,脱氧核酶的开发应用已成为新药开发的热门课题。目前对脱氧核酶的结构和