脱氧核酶的DNA切割作用介绍
脱氧核酶不仅具有RNA切割作用,而且也能切割DNA 分子。已筛选出了两类具有DNA自我切割作用的脱氧核酶,Ⅰ类自我切割脱氧核酶需要Cu2+和维生素C参与,而Ⅱ类脱氧核酶只需要Cu2+。Ⅱ类脱氧核酶以顺式方式切割DNA靶分子,与不加酶的反应相比,它提高催化效率106倍。多数脱氧核酶只能与底物形成二联体形式,而Ⅱ类脱氧核酶能与底物形成二联体或三联体形式,结合并切割DNA底物,通过改变二联体或三联体的识别位点,就可以切割不同核苷酸序列的单链DNA分子。因此脱氧核酶还可以作为简单的限制性内切酶,位点特异性地切割单链 DNA分子。......阅读全文
脱氧核酶的DNA切割作用介绍
脱氧核酶不仅具有RNA切割作用,而且也能切割DNA 分子。已筛选出了两类具有DNA自我切割作用的脱氧核酶,Ⅰ类自我切割脱氧核酶需要Cu2+和维生素C参与,而Ⅱ类脱氧核酶只需要Cu2+。Ⅱ类脱氧核酶以顺式方式切割DNA靶分子,与不加酶的反应相比,它提高催化效率106倍。多数脱氧核酶只能与底物形成二
关于脱氧核酶的RNA切割作用介绍
脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式: (1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个随机序列库
脱氧核酶DNA激酶活性功能的介绍
脱氧核酶还具有DNA激酶活性,类似T4多核苷酸激酶的作用,能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基团转移到DNA的5′-OH上。从一个随机单链DNA库中筛选出50个不同序列类型的具有自我磷酸化作用的脱氧核酶,都能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基团转移到DNA的5′-OH上,实现DNA分子5′-OH端自
脱氧核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 脱氧核酶 无RNA酶的DMA酶 切割底物RNA 试剂、试剂盒 5X反应缓冲液
脱氧核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒 5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实验步骤 一、材料与设备1) 脱氧核酶 (其设计与制格参见脱氧核酶相关章节)2)5X 反应缓冲液:750Tnmol/LNaCl,200 mmol/LTris-HCl (pH8.0)3)5
3.8-脱氧核酶切割-RNA-专一位点
脱氧核酶是一类由三十几个脱氧核苷酸构成的寡聚脱氧核糖核苷酸,制备容易,使用方便,是体外在特定位点切割 RNA 的有效方法。常用于体外切割 RNA 底物的脱氧核酶是「10~23」型脱氧核酶。实验材料脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实
脱氧核酶的功能介绍
1、RNA切割作用脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式:(1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个
脱氧核酶的功能介绍
1、RNA切割作用脱氧核酶最重要的一种性质,也是目前研究最活跃的一个方面,是具有通过酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA这种独特的性质,使其有可能应用于破坏体内细胞和病毒的RNA,具有潜在的体内治疗作用。脱氧核酶发挥RNA切割作用有以下几种形式:(1)以金属离子为辅因子:用“催化洗脱”的方法从一个
脱氧核酶的分类介绍
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调
脱氧核酶的作用和主要类型
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,具有
关于脱氧核酶的基本介绍
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,
脱氧核酶实验
实验方法原理 随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。实验材料 脱氧核酶试剂、试剂盒 脱氧核酶切割缓冲液终止缓冲液脂质体仪器、耗材
脱氧核酶实验
随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理随着体外分子实验技术的发展,近年
脱氧核酶实验
实验方法原理 随着体外分子实验技术的发展,近年来相继发现了许多具有不同催化功能的 DNA 分子,这些被称为脱氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反应、连接反应、卟啉环金属化等许多化学反应,而且还具有 DNA 激酶活性。
脱氧核酶的分类
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调控蛋
脱氧核酶的研究前景
对于脱氧核酶的研究有望成为基因功能研究、核酸突变分析、治疗肿瘤、对抗病毒及肿瘤等疾病的新型基因治疗药物的新型核酸工具酶。尽管自然界没有发现脱氧核酶,但实验已证明DNA具有酶活性。由于脱氧核酶比核酶更加稳定,且相对生产成本低廉,脱氧核酶的开发应用已成为新药开发的热门课题。目前对脱氧核酶的结构和功能已有
关于脱氧核酶的简介
1994年,Gerald.F.Joyce等报道了一个人工合成的35bp的多聚脱氧核糖核苷酸能够催化特定的核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸形成的磷酸二酯键,并将这一具有催化活性的DNA称为脱氧核酶或DNA酶(DNA enzyme,DE)。 1995年,Cuenoud等在Nature报道了一个具有连接酶
脱氧核酶的基本信息
脱氧核酶(deoxyribozyme)是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段,具有高效的催化活性和结构识别能力。自 1994年首次发现脱氧核酶以来,迄今已发现了几十种脱氧核酶。根据其功能可分为7大类:具有RNA切割活性,具有DNA连接酶活性,具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性,具有
关于脱氧核酶的研究前景和展望介绍
对于脱氧核酶的研究有望成为基因功能研究、核酸突变分析、治疗肿瘤、对抗病毒及肿瘤等疾病的新型基因治疗药物的新型核酸工具酶。 尽管自然界没有发现脱氧核酶,但实验已证明DNA具有酶活性。由于脱氧核酶比核酶更加稳定,且相对生产成本低廉,脱氧核酶的开发应用已成为新药开发的热门课题。目前对脱氧核酶的结构和
核酶的作用特点及天然核酶种类介绍
核酶是具有催化活性的RNA ,主要参加RNA的加工与成熟。天然核酶可分为四类:(1)异体催化剪切型,如RNaseP;(2)自体催化的剪切型,如植物类病毒、拟病毒和卫星RNA;(3)第一组内含子自我剪接型,如四膜虫大核26SrRNA;(4)第二组内含子自我剪接型。利用反义技术研制的药物称反义药物。反义
核酶的具体作用介绍
随着对核酶的深入研究,已经认识到核酶在遗传病,肿瘤和病毒性疾病上的潜力。比如,对于艾滋病毒HIV的转录信息来源于RNA而非DNA,核酶能够在特定位点切断RNA,使得它失去活性。如果一个能专一识别HIV的RNA的核酶存在于被病毒感染的细胞内,那么它就能建立抵抗入侵的第一防线。甚至,HIV确实进入到了细
根据催化功能将脱氧核酶分类
根据催化功能的不同,可以将脱氧核酶分为5大类:切割RNA的脱氧核酶、切割DNA的脱氧核酶、具有激酶活力的脱氧核酶、具有连接酶功能的脱氧核酶、催化卟啉环金属螯合反应的脱氧核酶。其中以对RNA切割活性的脱氧核酶更引人注意,不仅能催化RNA特定部位的切割反应,而且能从mRNA水平对基因进行灭活,从而调控蛋
核酶切割-RNA-专一位点
实验材料 合成的核酶分子切割底物RNA试剂、试剂盒 Tris-HClMgCl2实验步骤 一、材料与设备1)500 mmol/LTris-HCl(pH7.4)2)100 mmol/LMgCl23) 合成的核酶分子4) 切割底物 RNA二、操作方法1) 制备切割混合构:不超过 l0 pmol 底物 RN
核酶切割-RNA-专一位点
核酶切割 RNA 专一位点 实验材料 合成的核酶分子 切割底物RNA 试剂、试剂盒
核酶的作用
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。核酶一词用于描述具有催化活性的RNA
核酶和核酸酶的区别
核酶是有催化活性的RNA, 即化学本质是RNA,却具有酶的催化功能。核酶的功能很包括切割RNA、切割DNA,、连接RNA、磷酸酶活性等。与蛋白质酶相比,核酶的催化效率较低,是一种较为原始的催化酶。核酶可降解特异的mRNA序列。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。 它的发现打破了酶是蛋白质的传
3.7-核酶切割-RNA-专一位点
核酶是获得长片段 RNA 特定位点切割产物的有用工具,可用于研究 RNA 修饰,修饰位点分析,以及获得具布不间长度末端的 RNA 转录产物。实验材料合成的核酶分子切割底物RNA试剂、试剂盒Tris-HClMgCl2实验步骤一、材料与设备1)500 mmol/LTris-HCl(pH7.4)2)100
核酶的作用特点
与一般的翻译RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到RNA酶的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,又可从杂交链上解脱下来,重新结合和切割其它的mRNA分子。核酶可通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断靶基因的表达。核酶一词用于描述具有催化活性的RNA
核酶的具体作用
1. 核苷酸转移作用。2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。3. 磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。5. RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用。核酸内切酶可以催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键,把磷酸基团留在3′位置上,称为5′-
核酶的具体作用
1. 核苷酸转移作用。2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。3. 磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。5. RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用。核酸内切酶可以催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键,把磷酸基团留在3′位置上,称为5′-