排阻色谱法的原理
排阻色谱的分离机理是立体排阻,样品组分与固定相之间不存在相互作用的现象。色谱柱的填料是凝胶,它是一种表面惰性,含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴大小与被分离的试样大小相当。仅允许直径小于孔开度的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出人。对不同大小的组分分子,可分别渗入到凝胶孔内的不同深度,大个的组分分子可以渗入到凝胶的大孔内,但进不了小孔,甚至于完全被排斥。小个的组分分子,大孔小孔都可以渗进去,甚至进入很深,一时不易洗脱出来。因此,大的组分分子在色谱柱中停留时间较短,很快被洗出,它的洗脱体积(即保留时间)很小。小的组分分子在色谱柱中停留时间较长,洗脱体积卿保留时间)较大,直到所有孔内的最小分子到达柱出口,这种按分子大小而分离的洗脱过程才告完成。 因为分子尺寸一般随分子量的增加而增大,所以根据分子量表达分子尺寸比较方便。将因分子过大而不能部分地进入某一给走固定相孔内的最小的样......阅读全文
分子排阻色谱法的分离机理介绍
1、主要取决于凝胶的孔径大小与被分离组分分子尺寸之间的关系,与流动相的性质没有直接的关系。 2、样品分子与固定相之间不存在相互作用,色谱固定相是多孔性凝胶,仅允许直径小于孔径的组分进入,这些孔对于溶剂分子来说是相当大的,以致溶剂分子可以自由的扩散出入。样品中的大分子不能进入凝胶孔洞而完全被排阻
关于凝胶排阻色谱法的基本要求介绍
1、凝胶排阻色谱法— 掌握色谱法的分类,色谱流出曲线及有关术语; 2、凝胶排阻色谱法— 掌握色谱法的基本理论,了解柱效的影响因素; 3、凝胶排阻色谱法— 掌握分离度与柱效、选择因子、容量因子、分析时间之间关系; 4、凝胶排阻色谱法— 了解定性、定量分析方法; 5、凝胶排阻色谱法— 掌握气
关于空间排阻色谱法(Steric-Exclusion-Chromatography)的简介
空间排阻色谱法以凝胶 (gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及
空间排阻色谱法的基本原理介绍
空间排阻色谱法以凝胶 (gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及
分子排阻色谱法的简介和适用范围介绍
分子排阻色谱法又称空间排阻色谱法(SEC)是利用多孔凝胶固定相的独特性产生的一种,主要根据凝胶孔隙的孔径大小与高分子样品分子的线团尺寸间的相对关系而对溶质进行分离的分析的方法。分子排阻色谱又叫凝胶色谱法。 适用范围:适用于对未知样品的探索分离,它能很快提供样品按分子大小组成的全面情况,并迅速判
高效液相色谱仪离子交换色谱法和分子排阻色谱法
固定相是离子交换树脂。树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离。 分子排阻色谱法又称凝胶色谱法,它是按照分子尺寸大小顺序进行分离的一种色谱方法。分子排阻色谱法的固定相凝胶是一种多孔性的聚合材料,有一定的形状和稳定性
实验室分析方法体积排阻色谱法概念介绍
体积排阻色谱法(SEC, size exclusion chromatography)用化学惰性的多孔性物质作为固定相,试样组分按分子体积(严格来讲是流体力学体积)进行分离的液相色谱法。
尺寸排阻色谱法是依据什么来是实现分离的
是利用样品分子大小尺寸来进行分离的。色谱柱里面有许多带有孔洞的球型颗粒,小分子的物质分子会进入这些孔洞再出来,所以会增加停留时间,而大分子进不去这些孔洞,就在球型颗粒之间的缝隙直接通过。所以大分子先出色谱柱,先出峰,小分子后出色谱柱,后出峰。
《中国药典》0514-分子排阻色谱法标准草案的公示
我委拟修订《中国药典》0514分子排阻色谱法。为确保标准的科学性、合理性和适用性,现将拟修订的0514分子排阻色谱法公示征求社会各界意见(详见附件)。公示期自发布之日起三个月。请认真研核,若有异议,请及时在线反馈,并附相关说明、实验数据和联系方式。来函需打印后加盖公章,个人来函需打印后本人签名,
Zenix体积排阻色谱柱
Zenix体积排阻色谱柱:Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 µm硅胶作为填料。3μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前国际上分辨率优良的体积排阻柱。成都摩尔科学仪器有限公司独有的表面键合技术保证了填料表面键合的很大化,使其具有高的化学稳定性及小的非特异
高效排阻液相色谱
高效排阻液相色谱又叫体积排阻色谱( SEC),分子筛色谱,凝胶过滤等,生化界常用凝胶过滤。SEC是一种纯粹按照溶质分子在流动相溶剂中的体积大小分离的色谱法,填料具有一定范围的孔尺寸,大分子进不去而先流出色谱柱,小分子后流出。用于生物大分子分离的传统SEC填料主要是多糖聚合物软胶,只能在低压下作慢速分
高效排阻液相色谱
实验材料 nrhTNF 试剂、试剂盒 氯化钠 PB 仪器、耗材
分子排阻色谱探究竟
分子排阻色谱,有时又叫“尺寸排阻色谱”或“体积排阻色谱”,是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。 分子排阻色谱法的分离原理为分子筛机制,色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶,如葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等为填充剂,这些填充剂表面分布着不同孔径尺寸的孔。分子进入色谱柱后,它们中
分子排阻色谱探究竟
分子排阻色谱,有时又叫“尺寸排阻色谱”或“体积排阻色谱”,是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。 分子排阻色谱法的分离原理为分子筛机制,色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶,如葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等为填充剂,这些填充剂表面分布着不同孔径尺寸的孔。分子进入色谱柱后,它们中
选择合适尺寸排阻色谱法分离蛋白质—选择流动相
选择色谱柱之后,下一个最重要的决定就是准确选择将进入流动相的物质。如上所述,SEC分离的基本原则之一是应选择条件,以使保留(化学意义上)最小。如果实现了此方法,则可确保洗脱体积是分子大小的指标。乍一看,这似乎应该很简单-我们应该选择一种固定相,该固定相不会通过与分析物的特定类型的相互作用而强烈地
实验室分析方法体积排阻色谱法原理及发展
体积排阻色谱法(SEC)又称凝胶色谱法,通常用于分子量大于2000的样品的分离。SEC方法最广泛的用途是测定聚合物的分子量分布,对某些大分子样品如蛋白质、核酸等,也是种很有效的分离纯化手段。SEC方法能简便快速地分离样品中分子量相差较大的组分,因而适合于未知样品的初步探索性分离,无需进行复杂实验就能
薄层色谱分析法—体积排阻色谱法的基本介绍
薄层色谱分析法—体积排阻色谱法:溶质分子在多孔填料表面上受到的排斥作用称为排阻。产生排阻现象的原因很多,如带电粒子的电荷,溶质分子的大小和空间结构等等。根据这种现象,将溶质分离的色谱过程称为排阻色谱,这种分离的依据是分子的大小。虽然排阻现象早为人知,但直到20世纪60年代初期,由于填料的商品化才
离子排阻色谱仪分类
离子排阻色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:实验室离子排阻色谱仪和工业离子排阻色谱仪。2、按结构可分:台式离子排阻色谱仪和落地式离子排阻色谱仪。3、按分离规模可分:小型离子排阻色谱仪和大型离子排阻色谱仪。4、按功能可分:离子排阻分析色谱仪和离子排阻制备色谱仪。5、按用途可分:离子排阻生物色谱仪、离
Zenix-体积排阻色谱柱特点
Zenix 体积排阻色谱柱特点:● 3 μm粒径● 100、150、300 Å的孔径选择● 极高的分离效率和分辨率● 高容量● 在低和高盐浓度下有高稳定性● 批间重复性● 高的蛋白回收率而不破坏生物活性● 可忽略的非特异性反应● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒类生物分子能实现理想的分析和分离● 自
离子排阻色谱仪概述
离子排阻色谱仪是利用溶质和固定相之间的Donnan排斥、吸附和空间排阻作用而达到分离。一、分离模式:1、Donnan排斥:带负电荷的Donnan膜允许未离解的化合物通过,而不允许完全离解的化合物通过。2、吸附:保留时间与有机酸的烷基键的长度有关。通常烷基键越长,保留时间越长。3、空间排阻:有机酸的分
关于离子排阻色谱的简介
排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,以使组分分离。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载体和试样的性质,选用水或有机溶剂为流动相。 分析柱后接有银离子的阳离子交换抑制柱,淋洗液中的氢离子被交换成银离子,
关于分子排阻色谱的介绍
SEC 是利用多肽分子大小、形状差异来分离纯化多肽物质,特别对一些较大的聚集态的分子更为方便,如人重组生长激素(hgH)的分离,不同结构、构型的GH 在SEC 柱上分离行为完全不同,从而可分离不同构型或在氨基酸序列上有微小差异的变异体,利用SEC 研究修饰化的PEG 的分离方法,此PEC 具有半
离子排阻色谱仪概述
离子排阻色谱仪是利用溶质和固定相之间的 Donnan 排斥、吸附和空间排阻作用而达到分离。一、分离模式:1、Donnan 排斥:带负电荷的 Donnan 膜允许未离解的化合物通过,而不允许完全离解的化合物通过。2、吸附:保留时间与有机酸的烷基键的长度有关。通常烷基键越长,保留时间越长。3、空间排阻:
分子排阻色谱的原理简介
分子排阻色谱,有时又叫“尺寸排阻色谱”或“体积排阻色谱”,是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。 分子排阻色谱法的分离原理为分子筛机制,色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经过修饰的凝胶,如葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等为填充剂,这些填充剂表面分布着不同孔径尺寸的孔。分子进入色谱柱后,它们中的不
选择合适尺寸排阻色谱法分离蛋白质—选择合适的色谱柱
(1)粒径和柱长 在近年来SEC色谱柱技术得到发展之前,大多数使用的SEC色谱柱的直径通常相对较大,通常为7.8 mm,长度为150至300 mm。由于使用了较大的颗粒,因此需要较长的色谱柱长度,其中大多数颗粒的机械强度不高,必须在相对较低的压力下使用。SEC色谱柱技术的最新趋势集中在开发具有
尺寸排阻分析色谱仪分类
尺寸排阻分析色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:化验室尺寸排阻分析色谱仪和工业尺寸排阻分析色谱仪。2、按作用可分:尺寸排阻定量分析色谱仪和尺寸排阻定性分析色谱仪。3、按进样自动性可分:自动进样尺寸排阻分析色谱仪和手动进样尺寸排阻分析色谱仪。4、按色谱柱容量可分:微量尺寸排阻分析色谱仪和大容量尺寸排
尺寸排阻色谱仪分离原理
尺寸排阻色谱仪不是根据组分与两相的相互作用的不同进行分离,而是根据组分分子体积(流体力学体积)或分子大小进行分离。尺寸排阻色谱仪简称排阻色谱仪,又称凝胶色谱仪或分子筛色谱仪,主要用于溶解度、极性、吸附或离子特征无足够差异的高分子化合物的分离和合成聚合物分子量分布的测定。尺寸排阻色谱仪采用具有一定孔径
关于离子排阻色谱的应用介绍
离子排阻色谱法具有灵敏、快速、简便易行的优点,已广泛应用于化学、能源、环保、电子工业、食品、医药卫生、造纸、石油化学、纺织等领域中,完成了阴离子、阳离子、过渡金属、有机酸、氨基酸和肽类等数百种离子和化合物的分析。以下重点叙述离子色谱法在医药研究中的应用。 制药生产过程中需要高纯水。采用离子排阻
分子排阻高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SE缓冲液仪器、耗材 层析柱实验步骤 1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析,检测器
分子排阻高效液相层析实验
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SE缓冲液仪器、耗材层析柱实验步骤1. 用已脱气HPLC级水洗去SE柱的贮存溶剂,流速1 ml/min。在室温以已脱气的SE缓冲液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基线稳定。2. 注射100 μl 缓冲液进行一次空白样品的假层析,检测器设定在210