细胞爬片免疫荧光实验具体操作步骤
单位实验室做过,小编顺便推荐一下细胞爬片是从上海晶安生物公司买的,实验效果不错.细胞爬片免疫荧光步骤:1.晶安生物细胞爬片;首先是玻片的处理,普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块,先用洗衣粉洗干净,用水冲静烤干,然后泡酸过夜,捞酸后流水洗净,烤干,置于器皿中高压灭菌,然后再烤箱中大约8小时烤干备用。爬片可以在培养皿 六孔板或24孔板中都可,我选择在培养皿中爬。一为节约经费(培养皿可以重复利用)二来觉得培养皿口大,操作比较方便。培养皿消毒同上,消毒时记得消两把镊子具体操作是:用胰酶消化好细胞,充分吹打,使之成单细胞悬液(注意:这一点很重要,关系到将来爬出来片子的质量)取出消毒的培养皿,可以先加少量培养基(以使玻片与培养皿紧密接触),将玻片小心放入摆放其中,然后将单细胞悬液一滴一滴的滴到玻片上。最后盖上培养皿置于37度5%CO2的暖箱中培养,根据细胞生长状况,24小时或更长时间适时取出爬片。爬片置于37度PBS中洗三次,每次3......阅读全文
Cell发现为何有些细胞能“踩着别人往上爬”?
“胜者为王,败者为寇”不仅是历史名言,在生物学上也成立,比如说一组最开始都是相同的细胞,但是其中的一个细胞会开始分泌抑制它身边细胞分化的分子信号,“踩”着其它细胞生长,最终产生了差异。 到目前为止,已知负责这种侧向抑制的唯一信号传导机制是Notch-Delta信号传导途径。近期来自奥地利科学技
昆明动物所发现爬鳅属一新种——禄峒爬鳅
禄峒爬鳅 在2008年5月对广西省靖西县的鱼类资源考察中,中国科学院昆明动物研究所杨君兴研究员课题组在左江流域禄峒乡采集到若干爬鳅属标本,经鉴定为爬鳅属一新种,按照采集地名命名的方式将其命名为禄峒爬鳅Balitora ludongensis。 禄峒爬鳅具有如下特征区别于同
快速爬四层证明身体棒
保持健康、争取长寿是许多成年人的追求,其实,一个关键指标就可知你的体力好不好。西班牙一项新研究发现,能够快速爬四层楼且中间不用休息的人,因心血管疾病、癌症等原因导致的早亡风险较低。 西班牙拉科鲁尼亚大学医院研究团队针对1.3万名已知或疑似冠心病患者进行观察研究。研究人员要求参试者在跑步机上或走
XRD的基线向上爬的原因
跟底噪有关,角度越高噪音越大基线越高。
细胞免疫荧光步骤
细胞免疫荧光可应用于:可以观察组织或细胞内抗原物质的定位,以及一些特殊信号分子蛋白的出核/入核的定位变化。实验方法原理在进行细胞免疫荧光过程中,需要用到细胞爬片,通过将爬片浸在细胞培养基内,细胞在爬片上生长,进而进行细胞的免疫荧光。实验材料细胞样品试剂、试剂盒多聚甲醛70%甲醇丙酮PBSTriton
细胞免疫荧光实验步骤
细胞免疫荧光主要用于蛋白定位研究和细胞内信号转导,细胞免疫荧光技术是利用免疫技术和荧光标记技术相结合,原理就是利用抗原-抗体反应之后,采用荧光标记,标记完成后,显微镜下观察细胞内某种抗原成分的多少,从而做出一个定位研究,也可以为细胞内信号传导提供一个明确的指导,细胞免疫荧光具有敏感性强、特异性高、速
细胞免疫荧光步骤
实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 多聚甲醛70%甲醇丙酮PBSTriton BSADAPI染液DABCOTris甘油仪器、耗材 玻片实验步骤 细胞爬片免疫荧光实验步骤第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次
激光共聚焦实验的样品准备新方法
激光共聚焦显微镜可以观察到细胞内已经标记好的蛋白质和分子,为生物学研究提供了更直观的观测方法。如今,激光共聚焦成像已经是一个非常常规的实验操作,应用于生物学各个研究领域中。 在细胞实验中,如果要进行一次激光共聚焦成像,除了要知道相关的显微镜参数设置和操作以外,样品的准备也是非常重要的一环。
激光共聚焦实验的样品准备方法对比
激光共聚焦显微镜可以观察到细胞内已经标记好的蛋白质和分子,为生物学研究提供了更直观的观测方法。如今,激光共聚焦成像已经是一个非常常规的实验操作,应用于生物学各个研究领域中。 在细胞实验中,如果要进行一次激光共聚焦成像,除了要知道相关的显微镜参数设置和操作以外,样品的准备也是非常重要的一环。 传统
激光共聚焦的前期步骤
1、做细胞爬片(爬片的步骤就不详述了),注意:洗片子的PBS和固定用的4%多聚甲醛一定要新鲜配制的(一周以内的都能用), 因为PBS和4%多聚甲醛放久了后,都会有自发荧光。2、抗体的孵育:预实验的时候荧光根据文献和经验设定一、二抗的浓度,一抗4度孵育过夜(时间8~12h);二抗(荧光抗体)孵育时要避
荧光原位杂交技术实验心得
荧光原位杂交技术( fluorescence in situ Hybridization,FISH)是一种非放射性原位杂交方法,用特殊的荧光素标记核酸探针,在细胞或组织切片标本上进行杂交,以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。FISH 实验操作与用非荧光标记探针的原位杂交基本相似。在组
神经细胞培养前怎样用多聚赖氨酸包被6孔板
神经细胞培养前怎样用多聚赖氨酸包被6孔板。第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤)
免疫荧光-玻片泡酸处理多长时间
第一天:1.在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min,PBS浸洗玻片3次,每次3min;3.0.5%TritonX-100(PBS配制)室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);4.PBS浸洗玻片3次,每次3min,吸水纸吸干PBS
【锐赛小课堂】荧光原位杂交技术实验心得
锐赛小课堂1221-157 荧光原位杂交技术( fluorescence in situ Hybridization,FISH)是一种非放射性原位杂交方法,用特殊的荧光素标记核酸探针,在细胞或组织切片标本上进行杂交,以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。 FISH 实验
一体化细胞免疫荧光技术介绍(一)
免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。一.传统的免疫
“线上餐馆”实为黑作坊-后厨漆黑爬蟑螂
“线上餐馆”实为黑作坊 后厨漆黑爬蟑螂 随着美食外卖网站和手机订餐APP程序的普及,现在只要打开电脑或手机,图片上的一道道美食就能送到消费者的餐桌上来。这种“鼠标加车轮”的订餐模式,越来越受到白领和学生的喜爱。这类订餐平台不仅受到了品牌餐饮店的追捧,同时也有越来越多的小餐馆开始
如何应对粘度测量中的爬杆效应?(二)
2、 要想克服爬杆效应的方法:针对这类物料,不能采用同轴圆柱体转子,最简单的方法是采用 RST-CPS 锥板流变仪,根据物料的粘度范围选用 CP25-1 或 CP50-1 转子,可以先做一下剪切率扫描,得到基本的流变曲线,然后根据情况确定最后的测量条件,一般建议采用低剪切率进行测量。如下图所示,一个
如何应对粘度测量中的爬杆效应?(一)
爬杆效应是高聚物具有粘弹性的表现之一。对于粘性流体,由于离心力的作用,液面将呈凹形(左图);与粘性流体不同,盛在容器里的高分子液体(粘弹性流体),当这种样品中放入转子旋转时,没有因为惯性作用而甩向容器壁附近,反而环绕在棒附近,出现沿棒向上爬的“爬杆”现象(右图),这种现象称为韦森堡效应,法向应力效应
细胞免疫荧光的详细操作步骤
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍。4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分
细胞免疫荧光的详细操作步骤
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍。4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分
细胞核蛋白的免疫荧光染色方法
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P
免疫荧光染色能进行细胞平均荧光强度分析吗
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P
细胞核蛋白的免疫荧光染色方法
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(二)
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代,经第8
走最难的路、爬最高的山!亲历珠峰科考
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/1/516761.shtm文 | 周浙昆 珠峰及其山顶的旗云。作者供图我多次去过青藏高原,却一直没有见到过珠穆朗玛峰(以下简称珠峰),心中存下了一个大大的遗憾。当得知要进行“巅峰使命”珠峰科考(编者注:
吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色
AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅
如何利用苏木素伊红染色法检测细胞凋亡?
苏木素-伊红(hematoxylin/eosin)染色法是一种用普通光学显微镜观察凋亡细胞形态学特征的简便方法。细胞凋亡时主要的形态学变化为细胞体积变小,胞质浓缩,染色质高度凝集、边缘化,呈新月状,随后染色质裂解成大小不等的块状,核膜裂解,细胞以类似胞吐的方式形成凋亡小体。苏木素容易被氧化,其氧化产
细胞化学基础β片层
中文名称:β片层英文名称:β sheet定 义:免疫球蛋白分子中常见的二级结构,可分为平行式和反平行式两种类型,两条或多条几乎完全伸展的多肽链侧聚集在一起,相邻肽链间形成有规则的氢键。应用学科:免疫学(一级学科),免疫系统(二级学科),免疫分子(三级学科)
垃圾不再“爬”出来-和二次污染说拜拜
近日,大路边镇在镇区和村委会主干道放置了25个垃圾屋。新增设的垃圾屋可以将原来的垃圾桶安放在屋内,避免发出恶臭,同时避免了垃圾“爬”出屋外,改善了垃圾桶原先存在的弊端,使得该镇的垃圾收集方式得到进一步升级。 据悉,为提升镇内的环境,给群众营造一个干净舒适的生活环境,大路边镇政府去年在路旁放置
和泽生物干细胞ZL获批准东家ST中源望坐享其成
记者昨日获悉,和泽生物科技有限公司(下称:和泽生物)申报的三项关于干细胞技术的发明ZL已获得了国家知识产权局的授权。此前已披露拟全资收购和泽生物的ST中源将因此获得上述三项重要ZL。 作为申请人,和泽生物科技有限公司申报的三项ZL包括:脐带组织间充质干细胞爬片分离的