凝胶过滤层析和离子交换层析分离蛋白质的原同
所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同.离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用.凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离.......阅读全文
纸层析分离中的显色与结果分析
一、纸层析分离中的显色: 1、显色剂显示:被分离物质与显色剂生成有颜色的化合物,显示斑点位置。常用喷雾法 、浸渍法和涂刷法。 2、紫外光显示:有些物质受紫外光照射会发出荧光,可在紫外光照射下观察到被分离物质的斑点。 3、荧光薄层检测:如果样品斑点在紫外光照射下不显荧光,可在吸附剂中加入荧光物质
薄层层析分离中的薄层板制作
薄层层析分离中的薄层板制作是指将经离心机处理后的固定相支持剂均匀地涂布在玻璃板上形成薄层。玻璃板要求表面平滑、清洁,大小按需要选定。一、干板制作: 干板是将不加粘合剂的支持剂干粉均匀地涂布在玻璃板上制成的薄层板。干板制作简单,展开快,但极易吹散。制作方法如下: 1、选直径约为5
薄层层析分离中的显色与定量
一、薄层层析分离中的显色: 薄层层析分离中的薄层板展开后,从展开装置中取出,放入干燥器中干燥,然后根据被分离物质的种类和性质,选用相应的显色剂显色或用紫外光检测被分离物质的斑点,测量和计算各斑点的迁移率。 样品所含溶质较多或某些组分在单相薄层层析分离中的迁移率比较接近,不
关于薄层层析分离技术的特点介绍
各种薄层层析的原理与其对应的柱层析原理相同,但比其相应的柱层析具有更多的优越性。它同柱层析一样,可选择不同的支持剂和不同的处理方法进行薄层层析,它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点。同时,层析速度快,一般仅需15~20分钟,混合物易分离,分辨力一般比纸上层析高10倍,甚至100倍,它既适用
特异性IgG抗体技术都有什么?
1.盐析法 多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。 2.凝胶过滤法 蛋白质分子量不同,通过凝胶介质时的洗脱速度不同。血清蛋白的分级分离常用该法。按分子大小可分为3组:第1组:IgM和一些脂蛋白;第2组:IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等;第3组:白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。该法过滤条
离子交换层析法
离子交换层析法(ion exchange chromatography,简称IEC)是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性、极性,也就是所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离
离子交换层析法
离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处
离子交换层析实验
离子交换层析技术 实验方法原理 离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离
凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量
实验目的掌握凝胶层析的基本原理。学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶
离子交换层析中流出物质顺序是什么
若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白
离子交换层析中流出物质顺序是什么
若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白
离子交换层析中流出物质顺序是什么
若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白
离子交换层析中流出物质顺序是什么
若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。 由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电
生物大分子样品的保存
生物大分子制成品的正确保存极为重要,一旦保存不当,辛辛苦苦制成的样品失活、变性、变质,使前面的全部制备工作化为乌有,损失惨重,全功尽弃。影响生物大分子样品保存的主要因素有:⑴空气:空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动氧化。空气中微生物的污染可使样品腐败变质,样品吸湿后会引起潮解变性,同时也为微生物
蛋白质脱盐有哪些方法
常用的脱盐方法有透析法、电透析法和凝胶过滤法。透析法及电透析法耗时长,样品稀释度大,不易放大进行大规模生产,所以工业生产中应用较少。凝胶过滤层析脱盐过程中盐分子和蛋白质分子大小差异巨大,蛋白质溶液中小分子的盐分子随着层析流动相进入孔径较小的固定相,使其在层析中的迁移速率小,而蛋白质因分子尺寸较大,不
蛋白质脱盐有哪些方法
常用的脱盐方法有透析法、电透析法和凝胶过滤法。透析法及电透析法耗时长,样品稀释度大,不易放大进行大规模生产,所以工业生产中应用较少。凝胶过滤层析脱盐过程中盐分子和蛋白质分子大小差异巨大,蛋白质溶液中小分子的盐分子随着层析流动相进入孔径较小的固定相,使其在层析中的迁移速率小,而蛋白质因分子尺寸较大,不
色谱层析分离大孔吸附树脂用途
色谱层析分离大孔吸附树脂用途;D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂,D113弱酸性苯乙烯系大孔阳离子交换树脂,201*7强碱性阴离子交换树脂,001*7强碱性阳离子交换树脂,天津市西金纳环保材料科技有限公司技术宣传部;1、从废水、地下水、蒸汽中除去有机污染物。从工艺水中和极性溶剂中除去小分子
色谱层析分离大孔吸附树脂用途
色谱层析分离大孔吸附树脂用途;D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂,D113弱酸性苯乙烯系大孔阳离子交换树脂,201*7强碱性阴离子交换树脂,001*7强碱性阳离子交换树脂,天津市西金纳环保材料科技有限公司技术宣传部;1、从废水、地下水、蒸汽中除去有机污染物。从工艺水中和极性溶剂中除去小分子有机
色谱层析分离大孔吸附树脂用途
色谱层析分离大孔吸附树脂用途;D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂,D113弱酸性苯乙烯系大孔阳离子交换树脂,201*7强碱性阴离子交换树脂,001*7强碱性阳离子交换树脂,天津市西金纳环保材料科技有限公司技术宣传部;1、从废水、地下水、蒸汽中除去有机污染物。从工艺水中和极性溶剂中除去小分子有机
色谱层析分离大孔吸附树脂用途
色谱层析分离大孔吸附树脂用途;D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂,D113弱酸性苯乙烯系大孔阳离子交换树脂,201*7强碱性阴离子交换树脂,001*7强碱性阳离子交换树脂,天津市西金纳环保材料科技有限公司技术宣传部;1、从废水、地下水、蒸汽中除去有机污染物。从工艺水中和极性溶剂中除去小分子
蛋白质分离纯化常用技术
1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。4、层析:利用蛋白质在固定相与流动相之间不同的分配比例,达到分离目的的技术。a.离子交换层析,利用蛋白
什么叫层析法
层析法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异(如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等),使各组分在两相(一相为固定的,称为固定相;另一相流过固定相,称为流动相)中的分布程度不同,从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。小知识:层析法也称色谱法,是1906年俄国植物学家Michael
什么叫层析法
层析法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异(如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等),使各组分在两相(一相为固定的,称为固定相;另一相流过固定相,称为流动相)中的分布程度不同,从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。小知识:层析法也称色谱法,是1906年俄国植物学家Michael
纯化凝胶选择的具体方法(2)
9.纯化——包涵体蛋白包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。高化学稳定性的Superose 12及Sepharose 6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然构象。Superdex 75、Q Sepharose FF和Phenyl Sepharo
蛋白质纯化八联管离心机技术文章
是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有: 1、沉淀, 2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。 3、透析:利用透析袋把大分子
蛋白质纯化混匀仪技术文章
是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分
蛋白质纯化
是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分
解析蠕动泵在层析法中的应用
层析法是一类混合物分离技术,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有广泛的应用。层析法利用混合物中各组分理化性质的差异,将多组分混合物进行分离及测定。按层析机理可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。 泵送和分配培养基、缓冲溶液或其他液体是实验室所执行的常见任务。确保液体以高
层析法有哪些
◆按层析的机理划分: 吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。 吸附层析:利用吸附剂表面对不同组分吸附性能的差异,达到分离鉴定的目的。 分配层析:利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数不同,使之分离。 离子交换层析:利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同。 凝胶层
三种柱层析的原理
在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或