噬菌体裂菌的原理

噬菌体吸附在目标细胞表面,破坏其膜结构,使细胞裂解死亡。(噬菌体是病毒,无细胞结构。)......阅读全文

细胞自噬的蛋白定位介绍

  在研究自噬相关蛋白时,需对其进行定位。由于自噬体与溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体关系密切,为了区别,常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位:  Lamp-2:溶酶体膜蛋白,可用于监测自噬体与溶酶体融合。  LysoTrackerTM 探针:有红或蓝色可选,显示所有酸性液泡。  pDsRed2

纳米机械力引发细胞自噬

  机械力刺激在细胞生长、分化与通讯等重要生命活动中发挥关键作用。近年来,机械门控离子通道蛋白Piezo的发现为在分子水平理解机械力对于生物体的作用奠定了基础。然而,如何在单细胞水平定量分析机械力对于细胞效应的作用仍然是一个难题。近日,上海交通大学樊春海院士、邵志峰教授与中国科学院上海高等研究院胡钧

检测自噬的方法有哪些

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):imp

检测自噬的方法有哪些

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):imp

一文了解自噬阶段

  自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物的过程,借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。  自噬在机体的生理和病理过程中都能见到,其所起的作用是正面还是负面的尚未完全阐明,对肿瘤的研究尤其如此,值得关注。

细胞自噬是怎么发生的?

细胞自噬是一种在进化上保守的细胞内分解代谢过程,在该过程中,细胞质大分子、聚集性蛋白、受损细胞器或病原体被运送至溶酶体,并被溶酶体水解酶降解,产生核苷酸、氨基酸、脂肪酸、糖和三磷酸腺苷,最终再循环到胞浆中。诸如饥饿、辐射、缺氧、细菌入侵、生长因子匮乏等多种因素均可诱导细胞自噬发生。细胞自噬的发生过程

检测自噬的方法有哪些

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):imp

发现自噬基因的过程简介

  大隅良典接着利用了他改造过的酵母菌株——在这些酵母挨饿时,它们的自噬体会积累起来。如果对自噬过程重要的基因被失活,那么自噬体积累就理应不会发生。大隅良典将酵母细胞暴露在一种能随机在多个基因里引起突变的药物中,然后诱导自噬过程。  他的策略奏效了!在他发现酵母自噬一年内,大隅良典就鉴定出了第一批对

检测自噬的方法有哪些

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):imp

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正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):imp

知识分享:细胞自噬研究详解

  一、自噬简介    1、大自噬(macroautophagy),也就是通常说的自噬(autophagy),是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分(细胞器、蛋白等)被双层膜的囊泡包裹,形成自噬体(autophagosome),进而传递到溶酶体进行降解的过程。    详

自噬受体蛋白STBD1介导糖原自噬的分子机制被阐明

中国科学院上海有机化学研究所潘李锋课题组和俞飚课题组合作,从生化和结构等角度系统阐明了自噬受体蛋白STBD1特异性识别糖原以及招募RB1CC1和ATG8家族蛋白的分子机制,扩展了领域内对于STBD1介导糖原自噬过程的分子机制的认识。相关研究发表于《美国国家科学院院刊》。在哺乳动物细胞中,糖原的分解代

内质网蛋白VAPA/B与自噬蛋白互作调控自噬小体形成

  4月23日,《当代生物学》(Current Biology)发表了中国科学院生物物理研究所张宏课题组的研究论文:The ER contact proteins VAPA/B interact with multiple autophagy proteins to modulate autopha

自噬受体蛋白STBD1介导糖原自噬的分子机制被阐明

中国科学院上海有机化学研究所潘李锋课题组和俞飚课题组合作,从生化和结构等角度系统阐明了自噬受体蛋白STBD1特异性识别糖原以及招募RB1CC1和ATG8家族蛋白的分子机制,扩展了领域内对于STBD1介导糖原自噬过程的分子机制的认识。相关研究发表于《美国国家科学院院刊》。在哺乳动物细胞中,糖原的分解代

噬菌体制备及定量的一般实验方案

大部分噬菌体展示方案都涉及这样一个基本步骤:从被感染的细菌中制备噬菌体或噬菌粒颗粒的储液(增殖),并滴定这些储液以测定有感染力的颗粒的浓度。对于噬菌体载体(以及辅助噬菌体),对于噬菌体载体(以及辅助噬菌体),要通过计数宿主菌菌苔上的噬菌体斑来测定这些可变颗粒的浓度。为了确保能得到一个能繁殖的噬菌体的

M13噬菌体液体培养

M13 噬菌体原种通常采用液体培养,感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 200 拷贝以上双链 RF DNA,每代分泌数百个噬菌体颗粒。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理M13 噬菌体原种通常采

M13噬菌体液体培养

            实验方法原理 M13 噬菌体原种通常采用液体培养,感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 200 拷贝以上双链 RF DNA,每代分泌数百个噬菌体颗粒。

M13噬菌体液体培养

实验方法原理 M13 噬菌体原种通常采用液体培养,感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 200 拷贝以上双链 RF DNA,每代分泌数百个噬菌体颗粒。实验材料 M13 噬菌斑大肠杆菌 F' 菌株仪器、耗材 LB

双层平板法测噬菌体效价的优缺点

双层平板法的优点:①加了底层培养基后,可使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补;②所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上,因此不仅每一-噬菌斑的大小接近、边缘清晰,而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象;③因上层培养基中琼脂较稀,故形成的噬菌斑较大,更有利于计数。

中大吴耀文eLife:肺炎细菌抵御人体细胞自噬的清除作用

  一项新的研究成果揭示了细菌毒性效应子抑制细胞自噬的分子机制,该研究详细地阐释了嗜肺军团菌(Legionellapneumophila)利用其分泌的毒性效应子RavZ切除细胞自噬的关键蛋白质LC3-PE(磷脂酰乙醇胺修饰的LC3蛋白)的分子机制,嗜肺军团菌利用该机制导致宿主细胞自噬体无法形成,从而

λ噬菌体的铺平板培养实验

噬菌斑起源于单个噬菌体颗粒对单个细菌的感染。第一次感染后合成的子代病毒颗粒吸附和感染邻近细菌,后者依次释放另一代子代病毒颗粒。如果细菌生长在半固体培养基(如含琼脂糖或琼脂)上,这种子代病毒颗粒的扩散是有限的。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理噬菌斑起源于单个噬菌体颗粒对单个

单链丝状噬菌体展示系统、λ噬茵体展示系统和T4噬茵体...

单链丝状噬菌体展示系统、λ噬茵体展示系统和T4噬茵体展示系统一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白,pIII有两个位

第三军医大自噬研究刊登权威期刊

  生物通报道:类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)是类鼻疽的病原体,类鼻疽是死亡率较高的一种疾病,流行于世界热带地区。最近的一项研究表明,由于类鼻疽伯克霍尔德菌能够规避细胞的自噬,因此它们可以生存在哺乳动物细胞内。然而,潜在机制尚不明确。  七月七日,国际自噬研

λ噬菌体的铺平板培养实验

实验方法原理 噬菌斑起源于单个噬菌体颗粒对单个细菌的感染。第一次感染后合成的子代病毒颗粒吸附和感染邻近细菌,后者依次释放另一代子代病毒颗粒。如果细菌生长在半固体培养基(如含琼脂糖或琼脂)上,这种子代病毒颗粒的扩散是有限的。实验材料 λ 噬菌体原种大肠杆菌菌株试剂、试剂盒 MgSO4SM 和 SM+

λ噬菌体的铺平板培养实验

            实验方法原理 噬菌斑起源于单个噬菌体颗粒对单个细菌的感染。第一次感染后合成的子代病毒颗粒吸附和感染邻近细菌,后者依次释放另一代子代病毒颗粒。如果细菌生长在半固体培养基(如含琼脂糖或琼脂)上,这种子代病毒颗粒的扩散是有限的。

为什么噬斑可以检出纯化噬菌体

M13KO7噬菌体感染TG1,不见噬菌斑噬菌体有烈性的和非烈性噬菌体.烈性的噬菌体侵染细菌后会快速造成细菌菌体裂解,培养液呈现清凉透明有破碎残渣.非裂解性的可以铺顶层琼脂板(可以查阅噬菌体滴度的测试实验方案),培养后看顶层琼脂层中有没有噬菌斑,也可以在底层培养基中加些IPTG/X-gal若噬菌体带有

噬血细胞综合征的病因

  噬血细胞综合征主要分为原发性(遗传性)及继发性。前者为常染色体隐性遗传或X连锁遗传,存在明确基因缺陷或家族史。后者可由感染(主要为EB病毒感染)、恶性肿瘤、自身免疫性疾病、药物、获得性免疫缺陷(如移植)等多种因素引起。

噬血细胞综合征的病因

  噬血细胞综合征主要分为原发性(遗传性)及继发性。前者为常染色体隐性遗传或X连锁遗传,存在明确基因缺陷或家族史。后者可由感染(主要为EB病毒感染)、恶性肿瘤、自身免疫性疾病、药物、获得性免疫缺陷(如移植)等多种因素引起。

自噬信号通路相关PARP1

聚[ADP-核糖]聚合酶1(PARP-1)也称为NAD + ADP-核糖基转移酶1或聚[ADP-核糖]合酶1是人类中由PARP1基因编码的酶。 它是PARP家族的酶之一。 PARP1的工作原理: · 通过聚ADP-核糖基化修饰核蛋白。 · 与BRCA一起发挥作用于双链; PARP家庭的成员以单股行事

Nature揭示自噬命运的控制开关

  来自瑞典Karolinska学院、密歇根大学、加州大学圣地亚哥分校的科学家们展开合作,在新研究中解析了细胞核中事件对于自噬的影响。他们惊讶地发现,细胞核中的一个信号链充当了一种分子开关,决定了细胞的生死。   简而言之,自噬就是指细胞消化自身蛋白质或细胞内结构(细胞器)的一种自食过程。自噬作为