Ames检测法的原理及试验方法
原理 化学物质引起的诱变往往不是直接的，它要经过生物的消化吸收，特别是高等生物的肝脏中的有关酶的作用再起作用。而且，诱变剂仅仅改变突变频率，而不直接影响突变方向，所以同样的诱变剂也能导致回复突变。 实验方法 首先对一组雄性大鼠进行腹腔注射芳香族化合物，能大大增强鼠肝脏酶系的活性，4天后杀鼠取肝组织，捣碎后离心制备肝酶（S9）悬液，然后将待测产物和S9一级沙门氏菌的组氨酸突变株混合后倒平板，若能产生回复突变的待测产物则可判定为诱变物。......阅读全文
细胞生长检测4：MTS检测法
MTS检测法1．培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞（检测IL-2），或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞（检测IL-3）到对数生长期。2．取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml含1×104～2×104上述细胞之一的DMEM培养液（加10％小牛血清）。3．每孔加0.
细胞生长检测方法：MTT检测法
1、取96孔细胞培养板，每孔中加0.1ml含2×104 ～10×104 靶细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），在37℃ 5％CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2～3小时让细胞帖壁（如果是悬浮细胞可直接进行下一步）2、用RPMI-1640培养液2～10倍递次稀释细胞因子标准
细胞生长检测3：XTT检测法
XTT检测法用XTT代替MTT可省去溶解还原产物结晶的步骤，XTT可以被活细胞中的代谢酶还原成黄色水溶性的代谢产物（formazan）。代谢产物在OD450处有吸收峰。
细胞生长检测方法：NAG检测法
1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。 2、吸去培养液，用PBS洗涤两次（如为悬浮细胞，应在吸去上清液前先离心）。 3、每孔加60μl NAG染液，在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养4小时。 4、每孔加90μl终止液，混匀后置酶联检测仪上测定光密
细胞生长检测2：MTT检测法
MTT检测法1．取96孔细胞培养板，每孔中加0.1ml含2×104～10×104靶细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2～3小时让细胞帖壁（如果是悬浮细胞可直接进行下一步）2．用RPMI-1640培养液2～10倍递次稀释细胞
Ames试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则（二）
6.10 菌株鉴定用和特殊用途试剂 6.10.1 组氨酸—生物素平板成分：琼脂粉 15g蒸馏水 944mL(V-B)培养基E 20mL20%葡萄糖 20mL灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5g/100mL) 10mL灭菌0.5mmol/L生物素溶液 6mL配制：高压灭菌琼脂和水后，将灭菌20%葡萄糖，
Ames试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则（一）
鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验，Salmonella Typhimurium / Reverse Mutation Assay）于 1975年建立并不断发展完善，目前已被世界各国广为采用，已经成为毒理学实验室必需开展的重要实验项目。Ames实验用于检测待分析物质的致突变作用，该验灵敏、
Ames试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则（四）
试验设计及受试物的特殊处理1) 剂量设计 决定受试物最高剂量的原则是受试物对试验菌株的毒性和受试物的溶解度。对于纯的化学物质，一般最低剂量为每平皿0.2 μg，最高剂量为 5 mg，或溶解度允许，或饱和浓度，或对细菌产生最小毒性浓度。对于毒性很低、摄入量很大的定型产品，可根据其溶解度和对细菌
Ames试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则（三）
12 数据处理和结果判断记录受试物各剂量组、空白对照（自发回变）、溶剂对照以及阳性诱变剂对照的每皿回变菌落数，并求平均值和标准差。如果受试物的回变菌落数是溶剂对照回变菌落数的两倍或两倍以上，并呈剂量-反应关系者，则该受试物判定为致突变阳性。受试物经上述四个试验菌株测定后，只要有一个试验菌株，无论在
细胞生长检测7：碱性磷酸酶检测法（AKP法）
碱性磷酸酶检测法（AKP法）1．按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。2．向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3小
细菌生长检测之碱性磷酸酶检测法（AKP法）
碱性磷酸酶检测法（AKP法）：1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3
细胞生长检测方法：碱性磷酸酶检测法（AKP法）
1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2 ，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养3小时。3、在荧光计数仪上测
ELISA常用检测法——竞争法原理介绍
做ELISA实验，有几种常见的实验方法，他们分别是竞争法、捕获法、间接法、夹心法、而夹心法又可以分为双抗体夹心法和双抗原夹心法！在今天的文章中，将详细得跟大家讲述竞争法的实验原理！竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法，这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。直接竞争法，其基本原理是：将合适浓度的包被抗
核酸检测法的原理
所有生物都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒，病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒出现后，我国科学家在极短的时间里完成了对新型冠状病毒全基因组序列的解析，并通过与其它物种的基因组序列对比，发现了新型冠
ELISA法检测丝虫抗体
丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病，通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎，晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制
PCR法检测支原体
实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.
Western印迹法检测蛋白
实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng，0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg，所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一，即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时，应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭，靶蛋白与第一抗体的反应，结合靶蛋白的一抗
粪便检测浮聚法
实验方法原理适用于部分检查线虫、绦虫卵和部分原虫包囊的检测。可分为饱和盐水漂浮法、硫酸锌离心浮聚法及蔗糖离心浮聚法。实验步骤1、饱和盐水漂浮法（1）以竹签挑取黄豆大小粪便（约1克），置于漂浮杯中。（2）将粪便捣碎搅匀后，再加饱和盐水，加至略高于杯口但不外溢为止。（3）取洁净载玻片一块，盖于管口，与液
细胞增殖检测：MTT法
细胞增殖检测：MTT法 实验方法原理 MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-（4，5）-dimethylthiahiazo（-z-y1）-3，5-di-
粪便检测沉淀法
实验方法原理 适用于大多数蠕虫卵及部分原虫包囊的检测。可分为自然沉淀法、离心沉淀法及汞碘醛离心沉淀法。实验步骤 1. 自然沉淀法（1）以玻棒挑取粪便20～30g，通过40~60目铜筛调匀滤入盛满清水的锥形玻璃量杯中，静置25分钟；（2）倾去上层粪液，仅留沉淀物，再加满清水，按每隔20分钟换水1次，反
COD高锰酸钾法检测
高锰酸钾法 测定原理：以高锰酸钾作氧化剂测定COD，所测出来的COD称为高锰酸盐指数（CODMn）。水样加入硫酸呈酸性后，加入一定量的高锰酸钾溶液，并在沸水浴中加热反应30min。剩余的高锰酸钾加入过量草酸钠溶液还原，再用高锰酸钾溶液回滴过量的草酸钠，通过计算求出高锰酸盐指数。 优缺点：高锰
细菌学检测法
当水体污染程度增加时，腐生菌总量大大增加，因此可将其用于指示水体受有机污染的程度。但是，直接检验水中各种病源菌，方法复杂，难度较大，且结果也不能保证绝对安全。所以，在实际工作中，经常以检验细菌总数，特别是检验作为粪便污染的指示细菌如大肠菌群来间接判断水的卫生学质量。水体污染的两项常用细菌指标为细
多重PCR法检测STEC
产志贺毒素大肠杆菌（STEC）具有很强的致病性，全球范围内由其引发的食物中毒和其他公共卫生事件呈逐年升高之势，严重威胁人类的健康。开发快速可靠的检测手段对其引发的食源性疾病的监测、控制和预防意义重大。本文结合对STEC分子生物学特征的研究，着重介绍了多重PCR检测技术在检测食品中STEC方面的
细胞增殖检测：MTT法
MTT法，又称MTT比色法，可以用于：检测细胞存活和生长。实验方法原理MTT 分析法以活细胞代谢物还原剂 3-（4，5）-dimethylthiahiazo（-z-y1）-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT 噻唑蓝为基础。MTT 为黄色化合物，是一种接受氢离子的染
PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术，其基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点，但其对实验环境的要求严格，实验成本较高，有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设
粪便检测浮聚法
实验方法原理 适用于部分检查线虫、绦虫卵和部分原虫包囊的检测。可分为饱和盐水漂浮法、硫酸锌离心浮聚法及蔗糖离心浮聚法。实验步骤 1、饱和盐水漂浮法（1）以竹签挑取黄豆大小粪便（约1克），置于漂浮杯中。（2）将粪便捣碎搅匀后，再加饱和盐水，加至略高于杯口但不外溢为止。（3）取洁净载玻片一块，盖于管口，
粪便检测沉淀法
实验方法原理适用于大多数蠕虫卵及部分原虫包囊的检测。可分为自然沉淀法、离心沉淀法及汞碘醛离心沉淀法。实验步骤1. 自然沉淀法（1）以玻棒挑取粪便20～30g，通过40~60目铜筛调匀滤入盛满清水的锥形玻璃量杯中，静置25分钟；（2）倾去上层粪液，仅留沉淀物，再加满清水，按每隔20分钟换水1次，反复3
大鼠Ghrelin－ELISA检测法
大鼠Ghrelin ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Ghrelin 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 Ghrelin与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠Ghrelin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化
培养法检测支原体
培养法最为可靠且成本低廉，但培养周期较长。常用于细胞以及I临床治疗细胞的支原体检查。1、所需仪器设备及培养基（1）仪器设备：培养箱，显微镜。（2）培养基①支原体肉汤培养基。②精氨酸肉汤培养基。③支原体琼脂培养基。2、检查方法（1）样品的贮存：样品如在24h以内进行支原体检测，则可贮存在2—8℃；如果
PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术，其基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点，但其对实验环境的要求严格，实验成本较高，有时还有假阳性的现象出现。1、仪