变性高效液相色谱分析巯嘌呤甲基转移酶基因多态性位点
摘要:目的 应用变性高效液相色谱技术(DHPLC) 分析巯嘌呤甲基转移酶(TPMT) 基因多态性位点。方法 用以PCR 为基础的DHPLC ,检测健康成人和脐血以及急性白血病病人,TPMT基因第5 外显子G238C、第7 外显子G460A 和第10 外显子A719G的3 个多态性位点。结果 健康成人、脐血和急性白血病病人全部DNA 样本,TPMT基因外显子区的3 个位点的多态性频率为3149 % ,远低于白种人和非洲人。变异的位点仅为第10 外显子A719G,且均为杂合变异。TPMT第5 外显子630 例标本的色谱峰均为单峰。第7 外显子有316 例为单峰,214(34 %) 为杂合峰。将单峰标本进行1∶1 混合后重新进样也有杂合峰出现。经DNA 测序分析,证实此区无序列变异;杂合峰标本在54 和60 ℃为单峰,55~59 ℃均为杂合峰。而单峰标本峰形未随温度发生变化。说明DHPLC的检测误差并不是柱箱温度不合适引起的。第10 ......阅读全文
巯嘌呤
性状本品为黄色结晶性粉末;无臭。本品在水或乙醇中极微溶解,在乙醚中几乎不溶。鉴别(1)取本品约20mg,加乙醇20ml,微温使溶解,加1%醋酸铅的乙醇溶液1ml,生成黄色沉淀(2)取本品约20mg,加硝酸数滴,置水浴上蒸干,遗留物为黄色,放冷后,加氢氧化钠试液1~2滴,即变为黄棕色。(3)取本品约1
巯嘌呤片
性状本品为淡黄色片。鉴别(1)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤30mg),加乙醇30ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(1)、(2)项试验,显相同的反应(2)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤10mg),加氨试液loml,搅拌使溶解,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(3)项试验
巯嘌呤片介绍
性状本品为淡黄色片。鉴别(1)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤30mg),加乙醇30ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(1)、(2)项试验,显相同的反应(2)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤10mg),加氨试液loml,搅拌使溶解,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(3)项试验
巯嘌呤的检查方法
硫酸盐取本品0.25g,加水25ml,振摇5分钟,滤过,滤液加稀盐酸1ml与氯化钡试液2ml,摇匀后,不得发生浑浊6-羟基嘌呤取含量测定项下的供试品溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定,在255mm与325nm波长处的吸光度比值不得过0.06。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法
巯嘌呤的检查方法
检查硫酸盐取本品0.25g,加水25ml,振摇5分钟,滤过,滤液加稀盐酸1ml与氯化钡试液2ml,摇匀后,不得发生浑浊6-羟基嘌呤取含量测定项下的供试品溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定,在255mm与325nm波长处的吸光度比值不得过0.06。水分取本品,照水分测定法(通则0832第
巯嘌呤片的成分
活血调经,化症止痛,软坚散结,用于症瘕积聚炎(卵巢囊肿、子宫肌瘤、增生、宫颈炎)、痛经闭经,赤白带下及慢性盆腔炎等。
巯嘌呤的鉴别方法
鉴别(1)取本品约20mg,加乙醇20ml,微温使溶解,加1%醋酸铅的乙醇溶液1ml,生成黄色沉淀(2)取本品约20mg,加硝酸数滴,置水浴上蒸干,遗留物为黄色,放冷后,加氢氧化钠试液1~2滴,即变为黄棕色。(3)取本品约10mg,加氨试液10ml溶解后,溶液应澄清;加硝酸银试液1ml,即生成白色絮
巯嘌呤片的检查方法
检查溶出度照溶出度与释放度测定法(通则0931第二法)测定。溶出条件以盐酸溶液(9→1000)900m为溶出介质,转速为每分钟100转,依法操作,经45分钟时取样测定法取溶出液10ml,滤过,精密量取续滤液适量,用溶出介质定量稀释制成每1ml中约含5g的溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),
巯嘌呤片的检查方法
溶出度照溶出度与释放度测定法(通则0931第二法)测定。溶出条件以盐酸溶液(9→1000)900m为溶出介质,转速为每分钟100转,依法操作,经45分钟时取样测定法取溶出液10ml,滤过,精密量取续滤液适量,用溶出介质定量稀释制成每1ml中约含5g的溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在3
巯嘌呤的含量测定方法
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5μg的溶液。测定法取供试品溶液,在325nm的波长处测定吸光度,按CH4N4S的吸收系数(E)为1265计算
巯嘌呤的鉴别检查方法
鉴别(1)取本品约20mg,加乙醇20ml,微温使溶解,加1%醋酸铅的乙醇溶液1ml,生成黄色沉淀(2)取本品约20mg,加硝酸数滴,置水浴上蒸干,遗留物为黄色,放冷后,加氢氧化钠试液1~2滴,即变为黄棕色。(3)取本品约10mg,加氨试液10ml溶解后,溶液应澄清;加硝酸银试液1ml,即生成白色絮
关于巯嘌呤的基本介绍
巯嘌呤(Mercaptopurine,6-MP)属于抑制嘌呤合成途径的细胞周期特异性药物,化学结构与次黄嘌呤相似,因而能竞争性地抑制次黄嘌呤的转变过程。本品进入体内,在细胞内必须由磷酸核苷糖转移酶转变为6-巯基嘌呤核糖核苷酸后,方具有活性。 适用于绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、急性淋巴细胞白血病及
巯嘌呤的鉴别方法
(1)取本品约20mg,加乙醇20ml,微温使溶解,加1%醋酸铅的乙醇溶液1ml,生成黄色沉淀(2)取本品约20mg,加硝酸数滴,置水浴上蒸干,遗留物为黄色,放冷后,加氢氧化钠试液1~2滴,即变为黄棕色。(3)取本品约10mg,加氨试液10ml溶解后,溶液应澄清;加硝酸银试液1ml,即生成白色絮状沉
巯嘌呤的基本性状
本品为黄色结晶性粉末;无臭。本品在水或乙醇中极微溶解,在乙醚中几乎不溶。
巯嘌呤的基本性状
性状本品为黄色结晶性粉末;无臭。本品在水或乙醇中极微溶解,在乙醚中几乎不溶。
巯嘌呤的含量测定方法
含量测定照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5μg的溶液。测定法取供试品溶液,在325nm的波长处测定吸光度,按CH4N4S的吸收系数(E)为1265计算
TPMT基因的结构特点和生理作用
该基因编码通过S-腺苷-L-蛋氨酸作为S-甲基供体和S-腺苷-L-同型半胱氨酸作为副产物代谢硫嘌呤药物的酶。硫嘌呤类药物如6-巯基嘌呤被用作化疗药物。影响这种酶活性的遗传多态性与个体内对此类药物的敏感性和毒性的变化相关,从而导致硫嘌呤s-甲基转移酶缺乏。相关假基因已在第3、18和X染色体上鉴定。
巯嘌呤片的基本性状
本品为淡黄色片。
关于巯嘌呤的临床应用介绍
口服给药: ①绒毛膜上皮癌:成人常用量,每日6mg~6.5mg/kg,分两次口服,以10日为一疗程,疗程间歇为3~4周。 ②白血病:开始,每日2.5mg/kg或80~100mg/m,一日1次或分次服用,一般于用药后2~4周可见显效,如用药4周后,仍未见临床改进及白细胞数下降,可考虑在仔细观察
简述巯嘌呤的注意事项
对本品过敏者、妊娠及哺乳期妇女、严重肝肾功能损害者禁用。有尿酸盐肾结石、痛风及胆道疾病的患者慎用。用药期间应注意定期检查外周血象及肝、肾功能,每周应随访白细胞计数及分类、血小板计数、血红蛋白1~2次,对血细胞在短期内急剧下降者,应每日观察血象。
巯嘌呤的性状鉴别检查方法
性状本品为黄色结晶性粉末;无臭。本品在水或乙醇中极微溶解,在乙醚中几乎不溶。鉴别(1)取本品约20mg,加乙醇20ml,微温使溶解,加1%醋酸铅的乙醇溶液1ml,生成黄色沉淀(2)取本品约20mg,加硝酸数滴,置水浴上蒸干,遗留物为黄色,放冷后,加氢氧化钠试液1~2滴,即变为黄棕色。(3)取本品约1
巯嘌呤的类别及贮藏方法
类别抗肿瘤药。贮藏遮光,密封保存。制剂巯嘌呤片
巯嘌呤片的鉴别检查方法
鉴别(1)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤30mg),加乙醇30ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(1)、(2)项试验,显相同的反应(2)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤10mg),加氨试液loml,搅拌使溶解,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(3)项试验,显相同的反应。检查
巯嘌呤片的鉴别方法
鉴别(1)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤30mg),加乙醇30ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(1)、(2)项试验,显相同的反应(2)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤10mg),加氨试液loml,搅拌使溶解,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(3)项试验,显相同的反应。
巯嘌呤片的鉴别方法
(1)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤30mg),加乙醇30ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(1)、(2)项试验,显相同的反应(2)取本品细粉适量(约相当于巯嘌呤10mg),加氨试液loml,搅拌使溶解,滤过,滤液照巯嘌呤项下的鉴别(3)项试验,显相同的反应。
巯嘌呤片的含量测定方法
含量测定照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于巯嘌呤50mg),置100ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液50ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,用0.1moL盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液,用0.1mol/L
巯嘌呤片的含量测定方法
照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于巯嘌呤50mg),置100ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液50ml,置水浴中加热使巯嘌呤溶解,放冷,用0.1moL盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液,用0.1mol/L盐酸溶液
巯嘌呤片的基本性状
性状本品为淡黄色片。
TPMT基因编码的功能和结构描述
该基因编码通过S-腺苷-L-蛋氨酸作为S-甲基供体和S-腺苷-L-同型半胱氨酸作为副产物代谢硫嘌呤药物的酶。硫嘌呤类药物如6-巯基嘌呤被用作化疗药物。影响这种酶活性的遗传多态性与个体内对此类药物的敏感性和毒性的变化相关,从而导致硫嘌呤s-甲基转移酶缺乏。相关假基因已在第3、18和X染色体上鉴定。Th
实体肿瘤检测TPMT基因介绍
该基因编码通过S-腺苷-L-蛋氨酸作为S-甲基供体和S-腺苷-L-同型半胱氨酸作为副产物代谢硫嘌呤药物的酶。硫嘌呤类药物如6-巯基嘌呤被用作化疗药物。影响这种酶活性的遗传多态性与个体内对此类药物的敏感性和毒性的变化相关,从而导致硫嘌呤s-甲基转移酶缺乏。相关假基因已在第3、18和X染色体上鉴定。Th