开发出酪氨酸磷酸化监测新方法
近日,中科院大连化学物理研究所研究员卿光焱团队开发了一种无标记、通用、实时、高通量监测酪氨酸磷酸化的新方法。该研究为激酶抑制剂筛选、癌症靶向药物研发提供了新的方法。相关研究成果发表在中国化学会旗舰期刊CCS Chemistry上。 蛋白在各种激酶的催化下发生磷酸化反应,蛋白磷酸化异常与许多疾病有关,特别是癌症、神经疾病和代谢疾病等。激酶已经成为制药行业在癌症领域最重要的药物靶点类别,截至5月,美国食品药品管理局批准的小分子蛋白激酶抑制剂已有71种,集中在40多个激酶靶标。而靶向激酶抑制剂一直是全球药物开发和销售的热点。建立高灵敏度、高通量的激酶活性检测方法对于深入了解细胞信号转导的分子机制、疾病临床诊断,以及靶向药物的开发具有重要意义。 主流的检测方法是放射性同位素标记法及酶联免疫测定法,这两种方法均有其固有的缺陷,特别是价格十分昂贵,造成药物筛选成本居高不下,开发无标记、通用、低成本和高通量的激酶抑制剂筛选方法,能够显......阅读全文
开发出酪氨酸磷酸化监测新方法
近日,中科院大连化学物理研究所研究员卿光焱团队开发了一种无标记、通用、实时、高通量监测酪氨酸磷酸化的新方法。该研究为激酶抑制剂筛选、癌症靶向药物研发提供了新的方法。相关研究成果发表在中国化学会旗舰期刊CCS Chemistry上。 蛋白在各种激酶的催化下发生磷酸化反应,蛋白磷酸化异常与许多疾病
大连化物所卿光焱团队开发出酪氨酸磷酸化监测新方法
近日,大连化物所生物分离与界面分子机制创新特区研究组(18T7组)卿光焱研究员团队在前期工作(J. Am. Chem. Soc.,2020;Anal. Chem.,2021)的基础上,开发了一种无标记、通用、实时、高通量监测酪氨酸磷酸化的新方法。该研究为激酶抑制剂筛选、癌症靶向药物研发提供了新的
酪氨酸磷酸化相关蛋白western-blot条带
1.首先裂解液中应该有去污剂之类的如SDS、NP-40等2.为了防止蛋白降解,还要加入蛋白酶抑制剂之类的PMSF以及胰蛋白酶抑制剂等3.为了防止磷酸化蛋白的去磷酸化,还要加入磷酸酶抑制剂之类的如氟化钠、钒酸钠之类等
识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备
实验步骤基 本 方 案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料B S A -琼 脂 糖 亲 和 基 质(Sigma) 填 装(如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱(IOml 柱床体积;见辅助方案3)磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清PB S /叠氮钠.•含有0
方案6-MALDIMS确定酪氨酸磷酸化位点实验
实验材料在聚丙烯酰胺凝胶中的放射性标记的目标磷酸化蛋白试剂、试剂盒乙腈基质溶液NH4HCO3三氯乙酸KH2P04仪器、耗材超声仪离心干燥器HPLC柱HPLC 系统MALDI 板试管UV 检测器死体积T-分流器实验步骤一、SDS-PAGE 分离的 Gab-I 蛋白的消化1.把通过自显影确定的含有磷酸化
酪氨酸磷酸化激酶中为什么含有sh2结构域
其酪氨酸激酶活性并不高,是说它对下游底物的磷酸化活性较低,至于自身的磷酸化,则不一定。许多酪氨酸激酶受体可以催化自身磷酸化,如果你的那个受体只能通过自身磷酸化,那么就不容易磷酸化了。
小鼠药物干预后两种蛋白的磷酸化酪氨酸水平检测
小鼠XX细胞药物干预后两种蛋白的磷酸化酪氨酸水平检测 实验分组:小鼠XX细胞,按下面分组进行药物干预培养,并收集细胞进行免疫沉淀实验。 1正常对照组2高糖组3高糖+E药物4高糖+A药物(25μM)5高糖+A药物(50μM)6高糖+A药物(100μM)7高糖+A药物(100μM)+B药物(1mM)8高
大连化物所团队开发出一种检测酪氨酸磷酸化的新方法
近日,我所生物分离与界面分子机制创新特区研究组(18T7组)卿光焱研究员与中药科学研究中心(2800组)梁鑫淼研究员合作,在蛋白质磷酸化研究方面取得新进展,开发出一种智能聚合物功能化的仿生离子通道器件,实现了酪氨酸磷酸化的实时感知与测量,并在酪氨酸激酶抑制剂筛选中展现出较好的应用潜力。 蛋白酪
酪氨酸
性状本品为白色结晶或结晶性粉末;无臭本品在水中极微溶解,在无水乙醇、甲醇或丙酮中不溶;在稀盐酸或稀硝酸中溶解。比旋度取本品,精密称定,加1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1m1中约含50mg的溶液,依法测定(通则0621),比旋度为-11.3°至-12鉴别(1)取本品与酪氨酸对照品各适量,分别
什么是磷酸化与去磷酸化
磷酸化,将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。去磷酸化:磷酸基团的除去,对许多生物起着“开/关”作用。防止质粒载体的自身连接,最常用于质粒进行单
应用于原代T细胞酪氨酸磷酸化蛋白质组的高灵敏度分析方法
应用于原代T细胞酪氨酸磷酸化蛋白质组的高灵敏度分析方法 梁富超#, 柯弥#, 田瑞军* 南方科技大学理学院化学系, 广东 深圳 518055 摘要 酪氨酸磷酸化在T细胞的信号转导过程中发挥着重要的作用,然而其丰度较低,鉴定困难。生物组织样本中分离获得的原代T细胞数量较少,培养和扩增的
酪氨酸介绍
性状本品为白色结晶或结晶性粉末;无臭本品在水中极微溶解,在无水乙醇、甲醇或丙酮中不溶;在稀盐酸或稀硝酸中溶解。比旋度取本品,精密称定,加1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1m1中约含50mg的溶液,依法测定(通则0621),比旋度为-11.3°至-12鉴别(1)取本品与酪氨酸对照品各适量,分别
酪氨酸酶的酪氨酸酶的种类及分布
酪氨酸酶的分布与动物的生理功能息息相关,不同动物的酪氨酸酶在体内分布的部位不同,多数昆虫在正常生理状态下,酪氨酸酶以酶原的形式存在,不同类型的酪氨酸酶存在于昆虫的特定部位,以完成特定的生理功能。美洲蜚螺存在于血红细胞内,而麻蝇则仅存在于血浆中,并且在表皮中主要以活化形式的酪氨酸酶存在,昆虫酪氨酸酶除
酪氨酸酶的酪氨酸酶的应用研究
作为1种重要的生物资源,酪氨酸酶有着广泛的用途,在生物体内具有多种重要的生理功能,特别在皮肤美白、抗氧化作用等方面表现尤为突出。另外,结合固定化59、生物传感器等技术,在有机合成、环境保护、生物检测等领域,利用酪氨酸酶进行催化氧化、处理工业废水、检测化合物等方向已经逐渐成为目前国内外研究的热点。
蛋白质磷酸化研究的相关方法节选
对于信号转导科研来说,抗酪氨酸磷酸化抗体的出现是一个意义重大的事件。在没有抗酪氨酸磷酸化抗体之前,蛋白质和酶的酪氨酸磷酸化只能通过非常危险的并且很费时的放射性实验来检测。而利用抗酪氨酸磷酸化抗体,则可以通过Western Blot或其它免疫学方法轻松地检测到磷酸化信号。常规的检测方法包括:用抗酪
酶的磷酸化与脱磷酸化的比较
磷酸化是一种常见的修饰形式。酶蛋白中带羟基的氨基酸残基Thr、Ser与Tyr可作为磷酸化修饰位点。磷酸化是由ATP提供磷酸基,并在蛋白激酶的催化下完成的。脱磷酸反应则是由磷酸酶的催化下完成的。有的酶在磷酸化修饰后活性增高,而另一些酶则在磷酸化修饰后活性反受抑制。由上可见,酶的化学修饰调节具有以下特点
如何查看抗体是磷酸化还是非磷酸化
磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有: 1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。 2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。 4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的
酪氨酸的用途
原料药、食品添加剂比旋光度:l-体:-10.6°(c=4.1mol/LHCl,25℃);d-体:+10.3℃(c=4.1mol/LHCl)。与糖类共热可产生氨基羰基间的反应,而产生一种特殊的香料。酪氨酸是酪氨酸酶单酚酶功能的催化底物,是最终形成优黑素和褐黑素的主要原料。在美白化妆品研发中,可以通过研
酪氨酸的用途
原料药、食品添加剂比旋光度:l-体:-10.6°(c=4.1mol/LHCl,25℃);d-体:+10.3℃(c=4.1mol/LHCl)。与糖类共热可产生氨基羰基间的反应,而产生一种特殊的香料。酪氨酸是酪氨酸酶单酚酶功能的催化底物,是最终形成优黑素和褐黑素的主要原料。在美白化妆品研发中,可以通过研
大连化物所等磷酸化蛋白质组分析方法研究取得新进展
近日,中国科学院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组(1809组)邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学教授李顺成研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的
安捷伦Seahorse技术助力监测白血病氧化磷酸化阻断过程
安捷伦细胞分析网络研讨会3月7日“使用安捷伦Seahorse技术监测白血病中氧化磷酸化阻断引起的代谢重编程”,欢迎注册参加。 白血病是人体造血组织包括骨髓(急性髓性白血病-AML)和淋巴系统(急性淋巴性白血病-ALL)产生的癌症。从代谢角度来看,获得性药物抗性与细胞趋向氧化磷酸化依赖性高能状态
大连化物所等对磷酸化蛋白质组分析方法研究
近日,中国科学院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组(1809组)邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学教授李顺成研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析
大化所磷酸化蛋白质组分析方法研究取得新进展
近日,我所生物分离分析新材料与新技术研究组(1809组)邹汉法、叶明亮等在磷酸化蛋白质组分析新方法研究方面取得新进展。该团队与加拿大西安大略大学李顺成教授研究团队利用生物分子之间的特异性识别作用建立了一种非抗体的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,显著提高了酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析覆盖率和灵敏度,相关
磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别
磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有: 1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。 2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。 4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的
磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别
1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的多肽-〉人工体外磷酸化-〉链接半抗原-〉免疫动物-
抗体磷酸化与非磷酸化的区别与关系
非磷酸化是测该蛋白的含量,不能知道其活性状态,抗体磷酸化是测该蛋白的磷酸化水平如何,侧重于了解该蛋白的一种活性状态。很多信号通路的蛋白在受到某些刺激后都是通过改变其磷酸化水平的改变而引起细胞的一系列反应,其蛋白含量并不见得会有多大的变化。首先要说明的就是检测的蛋白质在你检测的组织或者细胞中是表达的,
SH2功能域的主要功能介绍
信号蛋白的相互连接是通过的一个多肽分子上SH-2结构域与另一分子磷酸化的酪氨酸残基直接相互作用而完成的,并通过酪氨酸残基的磷酸化或去磷酸化而得到调控。胞浆内信号蛋白分子中SH-2作为一种具有识别功能的结构可以同具有PTK活性的细胞因子受体或PTK相关分子相结合。如小鼠血小板衍生的生长因子受体β(
举例介绍SH2结构域的功能
信号蛋白的相互连接是通过的一个多肽分子上SH-2结构域与另一分子磷酸化的酪氨酸残基直接相互作用而完成的,并通过酪氨酸残基的磷酸化或去磷酸化而得到调控。胞浆内信号蛋白分子中SH-2作为一种具有识别功能的结构可以同具有PTK活性的细胞因子受体或PTK相关分子相结合。如小鼠血小板衍生的生长因子受体β(PD
SH2功能域的主要功能
信号蛋白的相互连接是通过的一个多肽分子上SH-2结构域与另一分子磷酸化的酪氨酸残基直接相互作用而完成的,并通过酪氨酸残基的磷酸化或去磷酸化而得到调控。胞浆内信号蛋白分子中SH-2作为一种具有识别功能的结构可以同具有PTK活性的细胞因子受体或PTK相关分子相结合。如小鼠血小板衍生的生长因子受体β(PD
什么氨基酸残基能被磷酸化
苏氨酸,丝氨酸、酪氨酸等氨基酸残基能被磷酸化,因为他们有羟基基团,可以和磷酸基团脱水生成磷酸酯。磷酸化(英语:Phosphorylation)或称磷酸化作用,指在蛋白质或其他类型分子上,加入一个磷酸(PO32-)基团,也可定义成“将一个磷酸基团导入一个有机分子”。此作用在生物化学中占有重要地位。蛋白