重組DNA的简介

广义的遗传工程包括细胞水平上的遗传操作(细胞工程)和分子水平上的遗传操作,即重组DNA技术(有人称之为基因工程)。狭义的遗传工程则专指后者。 重组DNA技术中所用的载体主要是质粒和温和噬菌体(见转导)两类,而在实际应用中的载体几乎都是经过改造的质粒或温和噬菌体。英国微生物遗传学家W.海斯和美国微生物遗传学家,J·莱德伯格等在1952年首先认识到大肠杆菌的F因子(见细菌接合)是染色体外的遗传因子。1953年法国学者P·弗雷德里克等发现大肠杆菌产生大肠杆菌素这一性状为一种染色体外的大肠杆菌素因子所控制。1957年日本学者发现了抗药性质粒。后两类质粒都是在遗传工程中广泛应用的质粒。重组DNA技术来源于两个方面的基础理论研究——限制性核酸内切酶(简称限制酶)和基因载体(简称载体)。 限制酶的研究可以追溯到1952年美国分子遗传学家S·E·卢里亚在大肠杆菌中所发现的一种所谓限制现象——从菌株甲的细菌所释放的噬菌体能有效地感染同一菌......阅读全文

分离核仁实验

分离核仁从人肝脏或胎盘组织中分离核仁HeLa细胞细胞核或核仁的制备高镁法分离核仁实验材料肝脏                                                          试剂、试剂盒NKM                                    

分离核仁实验

分离核仁 从人肝脏或胎盘组织中分离核仁 HeLa细胞细胞核或核仁的制备 高镁法分离核仁             实验材料 肝脏

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定3

当多克隆位点有外源DNA片段插入时,破坏此酶的N端阅读框架,产生无α互补功能的N端片段,因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色,见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短,不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框,有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体1

载体(vector)是携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型,亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体3

在作为载体时,这些噬菌体有一个很大的优点,即克隆到M13mp载体的外源DNA片段(双链),在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆,可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板:①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板;②制备仅有一条

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定1

重组DNA是在体外用限制性内切酶,将不同来源的DNA分子进行特异地切割,获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接,从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞,在宿主细胞中进行无性增殖,获得大量的目的基因或DNA片段,此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定2

(1)CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子(如Ca2+、Mg2+等)低渗溶液中时,细菌细胞膨胀成球形,处于感受态;此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面,在丰富培养基中生长数小时后,球状细胞恢复原

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体2

二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体,大多数具有编码多种蛋白质的基因,能利用宿主细胞的蛋白质合成体系,进行生长和增殖。构建的噬菌体载体,以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA,全部序列已知,共编码50多个基因。其中约一半基因参与

重氮氨基苯和重氮甲烷的特性用途

1.品名:重氮氨基苯商品编码:2927.0000别名:三氮二苯;苯氨基重氮苯CAS号:136-35-6英文名:1,3-diphenyltri azene分子式:C12H11N3外观与性状:金黄色结晶。主要用途:用作染料中间体和分析试剂,用于有机合成。危险特性:本品遇强烈震动,加热至150℃或急剧加热

测布料克重专用电子克重仪套装

测布料克重专用电子克重仪套装 本仪器适用于切取各种毛纺、棉纺、化纤、针织等织物的圆形样品。取样面积:100cm2,所切样品用电子天平称出克重,再*100即为纺织品一平方米的克重,非常方便!!广泛应用于广大纺织、服装、纸张、皮革等企业和外贸公司市场占有率,深得广大新老用户的信赖和好评。将裁下的布料样品

影响热重分析仪热重分析的因素

  1、样量和试样皿   热重法测定,试样量要少,一般2~5mg。一方面是因为仪器天平灵敏度很高(可达0.1μg),另一方面如果试样量多,传质阻力越大,试样内部温度梯度大,甚至试样产生热效应会使试样温度偏离线性程序升温,使TG曲线发生变化,粒度也是越细越好,尽可能将试样铺平,如粒度大,会使分解反应

重铬酸钡和重铬酸铝的特性

1.品名:重铬酸钡商品编码:2841.5000CAS号:13477-01-5英文名:Barium dichromate分子式:BaCr2O7外观与性状:淡红棕色针状结晶。主要用途:用于制造铬酸盐和陶瓷工业。危险特性:本品为强氧化剂;与有机物、还原剂、易燃物如硫、磷等接触或混合时有引起燃烧爆炸的危险。

热重曲线怎么分析?热重分析原理看这里!

  热分析是仪器分析的一个重要分支,它对物质的表征发挥着不可替代的作用。热分许历经百年的悠悠岁月,从矿物、金属的热分析兴起,近几十年来,在高分子科学和药物分析等方面焕发了勃勃生机。  热重分析法(Thermogravimetry Analysis,简称TG或TGA)为使样品处于一定的温度程序(升/降

重折叠的定义

中文名称重折叠英文名称refolding定  义解折叠或错折叠的结构,重新变成有活性的立体结构的过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

重退火的定义

中文名称重退火英文名称reannealing定  义同一来源、具有互补碱基序列的单链核酸之间重新形成配对双链的过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

大国重器-舍我其谁

步入“奋进新时代”主题成就展地方展区安徽单元,超导量子计算原型机“祖冲之号”模型首先映入眼帘,满满的“科技风”迎面扑来。 “‘祖冲之号’是当时国际上超导量子比特数目最多、包含62个比特的可编程超导量子计算原型机。它在1.2小时内完成的采样任务,最强大的超级计算机至少需要8年时间……”随着解说员娓

什么是重链?

重链(heavy chain,H链)大小约为轻链的2倍,含450~550个氨基酸残基,分子量约为55或75kD。每条H链含有4~5个链内二硫键所组成的环肽。不同的H链由于氨基酸组成的排列顺序、二硫键的数目和位置、含的种类和数量不同,其抗原性也不相同,根据H链抗原性的差异可将其分为5类:μ链、γ链、α

什么是恒重

恒重是指两次称量所得质量之差不得超过一定的允许误差,《火电厂排水水质分析方法》(DL/T 938-2005)对恒重的定义:连续两次烘干或灼烧后的质量,其差值不超过0.0003g。在重量分析法中,经烘干或灼烧的坩埚或沉淀,前后两次称重之差小于0.2mg(中国药典规定为0.3毫克),则认为达到了恒重。

热重分析系统

  热重分析系统是一种用于化学、材料科学、能源科学技术领域的分析仪器,于2013年04月12日启用。  技术指标  1.温度范围:室温~1500℃。2.天平灵敏度:0.1μg。3天平称重范围:~200mg。4.升温速率:室温~1000℃,0.1~50℃/min;室温~1500℃,0.1~25℃/mi

tga热重分析

  接着上期说的,越来越多的对照品厂家开始重视产品质量,许多厂家会在质控报告中提供热分析数据,最常见即TGA,那么什么是TGA呢?   热重分析法(TGA)是在规定程序控制变化的温度范围内,测量被分析样品的重量相关量(如质量、固体残留量或残留率等)随温度或时间的变化关系。  通过分析热重曲线,我们可

热重分析简介

  热重分析(Thermogravimetric Analysis,TG或TGA)是指在程序控制温度下测量待测样品的质量与温度变化关系的一种热分析技术,用来研究材料的热稳定性和组分。TGA在研发和质量控制方面都是比较常用的检测手段。热重分析在实际的材料分析中经常与其他分析方法联用,进行综合热分析,全

制药检重秤

适用于制药应用、序列化以及跟踪与追溯的高效解决方案安全过程有助于最大限度保证产品安全-用于动态行业的解决方案减少生产容差和成本压力的同时,确保产品和生产过程的安全需要在生产效率、OEE与可靠性之间折衷平衡的解决方案。 梅特勒-托利多的动态自动检重、电子监管码和生产线末端解决方案,可确保对您企业最重要

恒重的标准

第一:是在试验指定的方法的温度下烘干,既不是150度,也不是105!不同的重量法烘干温度有不同的标准!比如钼的8羟基喹啉法是135度烘,你比如镍的丁二污沉淀是120度烘(沉淀较多的时候用150度烘),你比如样品做水分测试,一般是105度到110度烘!第二:有些器皿本身是很难恒重的,比如瓷坩埚就很难恒

DNA合成(DNA-synthesis-)技术介绍

蛋白质概念提出:DNA多肽合成(DNA synthesis ):按照预定核苷酸的顺序,将脱氧核苷酸逐个进行人工连接合成DNA链的方法。目前多是采用固相合成法,即是在多聚体支持物上从3′端延伸核苷酸,可自动化操作。)目前,oligo DNA合成一般都采用固相亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,此方法具有高效

DNA-指纹的概念高变区DNA与DNA指纹

人的卫星DNA 或称随体DNA 是由一些短的DNA 片段(10bp 左右)多次重复所构成的。重复片段的组成和拷贝数在不同的个体及基因组的不同位置上不一样。提取不同个体的基因组DNA 后,用其切点能识别序列为4 个碱基而又不切割该重复片段的限制性内切酶在重复片段的两侧切割基因组DNA ,然后将样品进行

北京发布空气重污染蓝色预警-29日迎重污染

  今日22时,北京市空气重污染应急指挥部办公室发布空气重污染蓝色预警。据介绍,12月28日白天,北京空气质量总体较好,入夜后,受高压后部影响,污染物扩散条件转差,预计29日将达到重度污染状态,请公众做好健康防护。  应急指挥部预计,后天空气质量降为三级轻度,31日为四级中度。不过,元旦当天或将再遇

危机三重门:三鹿无法承受之重

多年后,三鹿奶粉将演变成小学课本中的名词,与“正龙拍虎”一样,成为中国轰轰烈烈社会进程中某个特定的耻辱代名词。三鹿危机是企业无法承受之重。为什么说三鹿必亡谁都没想到,一家企业的产品危机,竟然在不到二周时间内演变成全国性的社会危机。三鹿粉奶被爆出含有三聚氰胺之后,引起了社会各界的强烈震动:各地百货商场

热重分析仪的构造和热重分析相关

  热重分析(Thermogravimetric Analysis,TG或TGA)是指在程序控制温度下测量待测样品的质量与温度变化关系的一种热分析技术,用来研究材料的热稳定性和组分。TGA在研发和质量控制方面都是比较常用的检测手段。热重分析在实际的材料分析中经常与其他分析方法联用,进行综合热分析,全

三重四极杆-为什么叫三重

碰撞池也是四极杆一级和三级可以筛选检测,二级作为碰撞反应池。这几个都是四极杆(六极杆),所以称为三重四极。

三重四极杆-为什么叫三重

碰撞池也是四极杆一级和三级可以筛选检测,二级作为碰撞反应池。这几个都是四极杆(六极杆),所以称为三重四极。