基因扩增技术的标本制备
在将Taq DNA聚合酶引入PCR反应,并使之达到自动化之后,PCR反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单,而且,许多PCR的失败都归因于标本的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用,因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外,处理标本可使待扩增DNA暴露,能与引物复性。关于PCR标本制备各种专业书中介绍了许多,我们实验发现操作复杂、不慎便容易造成污染,且不实用。现介绍一种简单快速的处理方法即3%异硫氰酸胍和待检标本混合100℃,10min,离心取上清作为PCR模板即可。......阅读全文
正常细胞常规核型的标本制备实验
微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析 实验方法原理 采用微量全血培养人体外
离体蛙心标本的制备实验
实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤 (1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细
基因扩增PCR的扩增方法的注意事项
1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异; 2、配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)喷头以避免污染; 3、如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs; 4、当多重PCR扩增产物的长度均在1kb以内时,使用3%~4%浓度的Agarosegel进行电泳分离效果。
染色体CBG标本制备实验
基本方案 实验方法原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C
胸腹水染色体标本制备
某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中,并继续生长、增值。因此,由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多,异倍性,有结构畸变,常支持阳性诊断。二、用品和试剂同外周血染色体制备。三、操作步骤1. 新鲜胸腹水20-40毫升,以1000rpm离心10分钟。弃去
扫描电镜生物标本制备实验
实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似
水稻根尖染色体标本制备
实验概要 水稻根尖染色体标本制备实验步骤1.取材: 选取水稻种子,充分浸种后,将它们摆在铺有滤纸的培养皿内,在约28℃条件下发芽培养,当胚根长至1~1.5cm时,剪下备用。2.预处理 压片法:采用0.1%秋水仙素处理2h左右 去壁低渗法可采用以下四种方法处理
染色体GTG标本制备实验
基本方案 实验方法原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GT
胸腹水染色体标本制备
一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中,并继续生长、增值。因此,由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多,异倍性,有结构畸变,常支持阳性诊断。二、用品和试剂 同外周血染色体制备。三、操作步骤 l.新鲜胸腹水20—40毫升,以1
水稻根尖染色体标本制备
1.取材: 选取水稻种子,充分浸种后,将它们摆在铺有滤纸的培养皿内,在约28℃条件下发芽培养,当胚根长至1~1.5cm时,剪下备用。2.预处理 压片法:采用0.1%秋水仙素处理2h左右去壁低渗法可采用以下四种方法处理处理方法 0.002mol/L8-羟基喹啉 α-溴萘饱和溶液 低温(-4℃) 卡诺氏
染色体GTG标本制备实验
非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GTG即G 带,Trypsin(胰酶),Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪——曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红(2∶1)的沉淀物。实验方法原理非显
染色体GTG标本制备实验
实验方法原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GTG即G带,Trypsin(胰酶),Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪——曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红(2∶1)的沉淀物。着色
扫描电镜生物标本制备实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标
染色体CBG标本制备实验
实验方法原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C显带技术呈现,故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA,但在C带区有很强抗性,仍保留大部
染色体提前凝集标本制备
实验方法原理 七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyCond
关于基因扩增技术—聚合酶链反应的试剂介绍
(1)基因扩增技术—聚合酶链反应— 引物:决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同,选用不同引物,每种病原微生物都有自己特异的引物。 (2)基因扩增技术—聚合酶链反应— 耐热的DNA聚合酶:此酶是从耐热细菌中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。 (3)基因扩增技术—聚合酶链反应— 10×P
关于基因扩增技术—聚合酶链反应的引物介绍
基因扩增技术—聚合酶链反应结果的特异性取决于引物的特异性,扩增产物的大小也是由特异引物限定的。因此,引物的设计与合成对PCR的成功与否起着决定性的作用。合成的引物必须经聚丙烯酰胺凝胶电泳或反向高压液相层析(HPLC)纯化。因为合成的引物中会有相当数量的“错误序列”,其中包括不完整的序列和脱嘌呤产
关于基因扩增技术—聚合酶链反应的特点介绍
1、高度敏感 理论上基因扩增技术—聚合酶链反应可以按2n倍数扩增DNA十亿倍以上,实际应用已证实可以将极微量的靶DNA成百万倍以上地扩增到足够检测分析量的DNA。能从100万个细胞中检出一个靶细胞,或对诸如病人口液等只含一个感染细胞的标本或仅含0.01pg的感染细胞的特异性片段样品中均可检测。
关于天然基因扩增的介绍
天然基因扩增,也称为染色体复制,或基因复制,是生物分子进化过程中产生新遗传物质的主要机制。它指的是任何含有基因的DNA片段的复制。 基因复制可能源于DNA复制和修复错误,也可能源于自私遗传元件的偶然捕获。常见的几种基因复制的原因包括:异位重组(重组过程的交叉发生在非同源位点)、逆转录事件、非整
基因扩增子的定义
扩增子为基因组的一个DNA片段,当生物接触某种抑制该片段所含基因的功能的药物后,该DNA片段可形成多个线性拷贝。例如,哺乳动物中二氢叶酸还原酶可被甲氨喋呤抑制,当哺乳动物接触该药物后,则引起二氢叶酸还原酶基因(dihydrofolate reductase)的扩增。扩增片段常会有除被抑制基因序列以外
基因扩增仪的功能原理
ZL技术应用实现快速高效均衡扩增检测由光开关阵列、自聚焦透镜和尾纤准直器及变增益微光O/E装置组成的MEMS有机整体,在以16位单片机为核心的电控装置管理下,能在毫秒级时间内完成多个标本快速均衡扫描检测,避免了机械扫描方式或CCD扫描方式引起的时间滞后或渐晕误差。实现标准样本的PCR热循环扩增及
PCR基因扩增仪的用途
西安天隆科技有限公司DTC-3G型PCR基因扩增仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测D
基因扩增仪的产品参数
标本载体 0.2ml薄壁PCR离心管 标本数量 标本数量48个,包括4个标准品 试 剂 SYBR Green I,FAM,Tex Red,FITC等荧光染料,开放式PCR试剂 反应体系 10-100μL 建议质控 四个阳性标准品、阴性对照 指标 荧光激发波长 470nm 荧光发射波长
人工基因扩增的方法
在研究或诊断中,DNA扩增可以通过以下方法进行:聚合酶链反应(PCR):一种简单、廉价、可靠的通过聚合核苷酸,重复复制靶标DNA片段的方法 [2] 。连接酶链反应(LCR):一种扩增核酸获得探针的基因扩增方法。对于两条DNA链中的每一条,连接酶连接两个部分探针成实际的一条。因此,LCR使用两种酶:
基因扩增仪的性能规格
规格:48x0.2ml/0.5ml 96x0.2ml 普通/热盖等多种规格 样品温度范围:1-100℃ 热盖温度范围:100-120℃ 工作区温度准确性:≤0.3℃ 工作区温度均匀性:≤0.3℃ 工作区温度过冲量:≤0.3℃ 速度:升温≥3℃/S 降温≥2℃/S 1-9个温阶,1
基因扩增的概念和原因
基因扩增(gene amplification)是指某一个特定基因的拷贝数选择性地增加而其它基因的拷贝数并未按比例增加的过程 [1] 。基因扩增产生的可能原因:1)由错误的DNA复制和修复导致的基因复制;2)自私遗传元件偶然捕获而导致的DNA重复;3)人工聚合酶链式反应(PCR)扩增。
基因扩增仪的性能规格
规格:48x0.2ml/0.5ml 96x0.2ml 普通/热盖等多种规格 样品温度范围:1-100℃ 热盖温度范围:100-120℃ 工作区温度准确性:≤0.3℃ 工作区温度均匀性:≤0.3℃ 工作区温度过冲量:≤0.3℃ 速度:升温≥3℃/S 降温≥2℃/S 1-9个温阶,1