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1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异; 2、配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)喷头以避免污染; 3、如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs; 4、当多重PCR扩增产物的长度均在1kb以内时,使用3%～4%浓度的Agarosegel进行电泳分离效果。......阅读全文
1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异; 2、配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)喷头以避免污染; 3、如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs; 4、当多重PCR扩增产物的长度均在1kb以内时,使用3%～4%浓度的Agarosegel进行电泳分离效果。
①引物的序列应位于基因组DNA的高度保守区,且与非扩增区无同源序列。这样可以减少引物与基因组的非特异性结合,提高反应的特异性 ②引物长度:15-40bp为宜。引物过短或过长均可使反应的特异性下降。 ③引物的碱基尽可能随机发布,避免出现数个嘌呤或嘧啶的连续排列,G+C碱基的含量在40%-75%
实验概要 PCR扩增目标DNA片段。 实验原理 多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板DNA的变性：模板DN
实验概要进行目的基因的PCR扩增实验原理PCR（聚合酶链式反应）是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。它包括3个基本步骤：⑴变性：目的双链DNA片段在94℃下解链；⑵退火：两种寡核苷酸引物在适当温度（50℃左右）下与模板上的目的序列通过氢键配对；⑶延伸：在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
大家对PCR基因扩增仪的使用还不太了解，下面我们来看下PCR基因扩增仪的使用方法： (1)首先准备好反应管； (2)打开机盖，将反应管平稳、端正地置入，盖好机盖； (3)打开电源开关，按照机器屏幕显示的提示设定程序。 用Proceed键起动扩增，结束时出现“Complete”，待风机
PCR 扩增模板和抗体可变区基因的扩增 如果构建Fab抗体库,必需利用RT-PCR获取抗体基因;构建ScFv抗体库,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在构建小鼠ScFv抗体库过程中,主要采用DNA作为扩增模板。 【材料和试剂】 （1）PCR仪 （2）Taq酶
PCR基因扩增仪使用方法：(1)首先准备好反应管；(2)打开机盖，将反应管平稳、端正地置入，盖好机盖；(3)打开电源开关，按照机器屏幕显示的提示设定程序。用Proceed键起动扩增，结束时出现“Complete”，待风机停止工作，关闭电源，取出样品盖好PCR基因扩增仪护套。PCR基因扩增仪维护注意事
（4）引物的熔点温度（Tm值）要适当。Tm值与引物的碱基组成和长度有关；PCR引物的GC/AT应与要扩增的模板DNA相当或略高些。一般熔点温度以大于55℃为宜。（5）引物的3，末端必须与模板严格互补，而5，末端的要求可灵活些。（6）目前在引物选择中已广泛应用计算机软件，从EMBL或Genebank中
[实验目的] 通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。 [实验原理] 多聚酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍