SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳不出带的原因

如果Marker也没有出带,说明电泳及染色有问题,如电泳缓冲液的配制,胶的制备,染色方法等.如果Marker出带而目的片段没有,说明没有目的片段,应该是前期实验的原因.或跑出胶外,说明片段太小,或电泳时间太长.......阅读全文

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳不出带的原因

如果Marker也没有出带,说明电泳及染色有问题,如电泳缓冲液的配制,胶的制备,染色方法等.如果Marker出带而目的片段没有,说明没有目的片段,应该是前期实验的原因.或跑出胶外,说明片段太小,或电泳时间太长.

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳会产生误差的原因

不论标准品还是待测样品的蛋白质,在形态上都不可能达到理想的刚性标准球状,有的是棒状,有的是椭球状等等,这种形态上的差异导致即使分子质量相同的蛋白质在凝胶中的迁移率也会有所不同.

色谱不出峰的原因

色谱不出峰的原因:1、记录器(数据处理机)没有工作:(1)记录器:电平值选择太高或者太低,应在中间部分。(2)最小峰面积设置太大。2、检测器部分:(1)先判断极化电压有没有加上(260V左右)。用万用表直流电压1000V档,一端接接线排上极化电压处,另一端接机壳,若显示260左右,说明极化电压没有问

引物扩增不出的原因分析

(1) RT-PCR。请注意,很多基因通过常规RT –PCR方法是很难不增出来的。 RT-PCR成功的关键在于RT的反应的RNA质量和目标基因在特定组织和细胞中含量。(2)从基因组中扩增。一般情况下,基因在基因组中都是单拷贝,基因组作为模板需要严格控制用量。基因组DNA过高,会影响反应体系中的Mg和

液相不出峰原因

不出峰有三种原因,检测器损坏,进样失败,漏液或泵不出液体.检查一下检测器出口流动相流速对吗?不对的可能是漏液或泵没有泵出液体.只要不换柱不换流动相,两个泵和一个泵的压力应该都一样.检测器的波长和灯都检查一下.

液相不出峰原因

不出峰有三种原因,检测器损坏,进样失败,漏液或泵不出液体.检查一下检测器出口流动相流速对吗?不对的可能是漏液或泵没有泵出液体.只要不换柱不换流动相,两个泵和一个泵的压力应该都一样.检测器的波长和灯都检查一下.

液相不出峰原因

不出峰有三种原因,检测器损坏,进样失败,漏液或泵不出液体.检查一下检测器出口流动相流速对吗?不对的可能是漏液或泵没有泵出液体.只要不换柱不换流动相,两个泵和一个泵的压力应该都一样.检测器的波长和灯都检查一下.

液相不出峰原因

不出峰有三种原因,检测器损坏,进样失败,漏液或泵不出液体.检查一下检测器出口流动相流速对吗?不对的可能是漏液或泵没有泵出液体.只要不换柱不换流动相,两个泵和一个泵的压力应该都一样.检测器的波长和灯都检查一下.

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

制胶(用于垂直电泳或水平电泳) 样品的准备 电泳 检测             试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵 浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤 SDS 电泳的制胶方法与 “垂直平板电泳的制胶” 和 “水平平板电泳的制胶” 所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同,只是在 SDS 电泳制胶时单体贮液不需要抽气

pcr阳性对照不出条带的原因

阳性对照不出的原因很多,主要考虑试剂系统。包括Taq酶活性、引物设计、Mg离子含量、dNTP浓度。还可考虑模板DNA的提取方法,甚至你的引物是否正确稀释。

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的简介

  SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapiro建立,其原理:聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的特性

  (1)在一定浓度时,凝胶透明,有弹性,机械性能好;  (2)化学性能稳定,与被分离物不起化学反应,在很多溶剂中不溶;  (3)对pH和温度变化较稳定;  (4)几乎无吸附和电渗作用,只要Acr纯度高,操作条件一致,则样品分离重复性好;  (5)样品不易扩散,且用量少,其灵敏度可达10-6ug  

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳——电泳

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤一、垂直电泳SDS 和常规聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳的方法基本相同。将缓冲液贮液稀释一倍便为连续电泳的电极缓冲液。不连续 SDS 电泳的电极缓冲液常用 Tris-甘氨酸系统(0.025

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理

  聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。  聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳——检测

实验方法原理在 SDS 电泳中,由于 SDS 和还原试剂使蛋白质变性而失去生物活性,所以电泳后的检测方法不如常规聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳多,一般为考马斯亮蓝染色和银染色,其次为荧光方法和转移后检测。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理

聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳特性

(1)在一定浓度时,凝胶透明,有弹性,机械性能好;(2)化学性能稳定,与被分离物不起化学反应,在很多溶剂中不溶;(3)对pH和温度变化较稳定;(4)几乎无吸附和电渗作用,只要Acr纯度高,操作条件一致,则样品分离重复性好;(5)样品不易扩散,且用量少,其灵敏度可达10-6ug(6)凝胶孔径可调节,根

气相色谱的不出峰的原因

气相色谱的不出峰的原因有:1、样品在色谱柱上保留:确认色谱柱不会永久吸附待测组分,提高柱温观察组分是否流出;2、灵敏度不够:检查检测器状态,或增加进样浓度;3、溶剂峰包覆:样品和溶剂的保留性能相近时,大的溶剂峰有可能将待测物峰包盖;4、进单标确认问题,或采用分流进样模式、加大分流比等方式优化溶剂与组

气相色谱的不出峰的原因

气相色谱的不出峰的原因有:1、样品在色谱柱上保留:确认色谱柱不会永久吸附待测组分,提高柱温观察组分是否流出;2、灵敏度不够:检查检测器状态,或增加进样浓度;3、溶剂峰包覆:样品和溶剂的保留性能相近时,大的溶剂峰有可能将待测物峰包盖;4、进单标确认问题,或采用分流进样模式、加大分流比等方式优化溶剂与组

计量泵打不出料的原因

  计量泵打不出料的原因较为复杂,这一故障现象在实际使用中也比较常见,通常考虑是管路线路或者单向阀发生了堵塞,若在清洗疏通后问题依然存在,就需要对泵体内部进行拆检,详情可参阅由中成螺杆泵业整理的以下内容。   关于计量泵打不出料的原因,出现此类异常故障,往往是因为作为加药计量泵时,因运输的化学成分

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验步骤

1.样品的浓缩效应以往不连续电泳系统中,含有上、下槽缓冲液(Tris—Gly,pH8.3)、浓缩胶缓冲液(Tris—HCl,pH6.8)、分离胶缓冲液(Tri s—HCl, pH8.8),两种凝胶的浓度(即孔径)也不相同。在这种条件下,缓冲系统中的HCl几乎全部解离成Cl一,两槽中的Gly(pI一6

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳——样品的准备

试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤一、样品缓冲液的配制根据 SDS 电泳的原理,样品缓冲液中必须含有 3~4 倍于蛋白的 SDS 和足以断裂二硫键的还原试剂(2%~3% 二硫苏糖醇或 4%~5% β-巯基乙醇 )。

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)实验原理和操作步骤

实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶

蛋白质单向SDS凝胶电泳实验——连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳

电泳可用于分离复杂的蛋白质混合物,研究蛋白质的亚基组成以及证实蛋白质的均一性等,还能纯化出蛋白质用于后续的研究工作。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,凝胶的孔径,蛋白质的电荷、大小、性质等因素共同决定了蛋白质的电泳迁移率。实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS磷酸仪器、耗材电泳仪离心机实验步骤1.  按“Laemm

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的注意事项

  1.SDS与蛋白质的结合按质量成比例(即:1.4g SDS /g蛋白质),蛋白质含量不可以超标,否则SDS结合量不足。  2.用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时,必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用。并且SDS—PAGE 测定分子量有10%误差,不可完全信任。  

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的注意事项

1.SDS与蛋白质的结合按质量成比例(即:1.4g SDS /g蛋白质),蛋白质含量不可以超标,否则SDS结合量不足。2.用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时,必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用。并且sDs—PAGE 测定分子量有10%误差,不可完全信任。3.有些蛋白

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的注意事项

1.SDS与蛋白质的结合按质量成比例(即:1.4g SDS /g蛋白质),蛋白质含量不可以超标,否则SDS结合量不足。2.用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子量时,必须同时作标准曲线。不能利用这次的标准曲线作为下次用。并且sDs—PAGE 测定分子量有10%误差,不可完全信任。3.有些蛋白

冰箱外壳带静电的原因

1.任何通过变化电流的线圈周围都会产生电场,冰箱的压缩机内就是通过变化电流的线圈,在其周围就会产生电场,而冰箱是一个金属外壳,实际就是一个电容。这个电容在电场的作用下就会产生电荷移动,在冰箱不接地的情况下,电荷就积聚在冰箱外壳,使冰箱箱体上形成静电。2.如果冰箱接地,电荷就不会积聚在冰箱外壳,就不会

液相色谱进样品不出峰的原因

一般就是几个原因导致的:仪器、方法,或者是操作。1、仪器:你先看看仪器的而压力是多少。是不是哪里漏液了。如果漏了肯定是检不出来了。再有就是放大看一看基线噪音,查一下氘灯的使用时间。2、方法:波长,这个是直接原因,你这个物质测过紫外吗?在这个波长下有没有吸收呢?如果波长错了,那你就别费劲了。溶剂,你的