关于转录酶的基本信息介绍
RNA聚合酶(RNA polymerase)是以一条DNA链或RNA为模板,三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶,因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关,所以也称转录酶。......阅读全文
关于逆转录酶的使用说明介绍
M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所
关于逆转录酶的质量控制介绍
1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。 2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。 3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。 4.
关于变构酶的基本信息介绍
当某些化合物与酶分子中的别构部位可逆地结合后,酶分子的构象发生改变,使酶活性部位对底物的结合与催化作用受到影响,从而调节酶促反应速度及代谢过程,这种效应称为别构效应。具有别构效应的酶称为别构酶。别构酶常是代谢途径中催化第一步反应或处于代谢途径分支点上的一类调节酶,大多能被代谢最终产物所抑制,对代
关于引发酶的基本信息介绍
dnaG遗传因子的产物为分子量约6万的蛋白质,是大肠杆菌及以大肠杆菌为寄主的许多噬菌体的DNA复制所必需的。通过以φ×174,G4噬菌体的DNA为模板的离体(in vitro)复制系的分析,也可决定由引发酶所合成的RNA结构。在大肠杆菌的T系噬菌体方面,与dnaG机能相对应的噬菌体固有遗传因子可
关于肝素酶的基本信息介绍
肝素酶(heparinase)是一类作用于肝素或者乙酰肝素分子的多糖裂解酶,编号为EC 4.2.2.-。广义上的肝素酶既包括微生物产生的以裂解方式降解肝素或硫酸乙酰肝素的酶类,又包括动物体内产生的以水解方式降解硫酸乙酰肝素的内源性(类)肝素酶(heparanase)。 肝素酶主要从一些利用肝素
关于胰酶的基本信息介绍
胰酶(Pancreatin)为助消化药。主要含胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶等,胰蛋白酶能使蛋白转化为蛋白胨,胰淀粉酶使淀粉转化为糊精与糖,胰脂肪酶则使脂肪分解为甘油和脂肪酸。在中性或弱碱性条件下活性较强。在肠液中消化淀粉、蛋白质及脂肪,从而起到促进消化和增进食欲的作用。
关于催化酶的基本信息介绍
研究发现,细胞中存在一种酶,它合成端粒。端粒的复制不能由经典的DNA聚合酶催化进行,而是由一种特殊的逆转录酶——端粒酶完成。端粒酶是以RNA 为模板合成DNA 的酶。端粒酶是一种核糖核蛋白,由RNA 和蛋白质构成。其RNA 组分是端粒序列合成的模板。不同生物的端粒酶,其RNA 模板不同,其合成的
关于酶膜的基本信息介绍
反应器酶膜反应器将酶促反应的高效率与膜的选择透过性有机结合,可以强化过程的速率。近年来,酶膜反应器在生物、医药、食品、化工、环境等领域得到了日益广泛的应用。随着基因工程、材料科学特别是高分子材料科学的发展,随着高效固定化技术的开发以及过程设计的不断优化,酶膜反应器的应用效率将会逐步提高,其应用领
关于体外转录的转录条件介绍
转录模板必须满足: 1. 在基因组全长克隆过程中,在正向引物5‘末端添加T7启动子序列; 2. 以T7启动子作为体外转录启动子,在启动子后面靶位序列连续带有3个G,转录效率最 高; 3. 在正向引物5/端添加一个帽子G,有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性。
反转录酶的合成步骤介绍
1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s 2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL 3、65℃保温5min,然后冰浴5min; 4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份 RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL 10×M-MLV
反转录酶的合成步骤介绍
1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s 2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL 3、65℃保温5min,然后冰浴5min; 4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份 RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL 10×M-MLV
转录酶的基本分类介绍
通常可根据生物的类别,将RNA聚合酶分为原核生物RNA聚合酶、真核生物RNA聚合酶。 原核生物和真核生物的RNA聚合酶有共同特点,但在结构、组成和性质等方面又不尽相同。 (1)原核生物RNA聚合酶 研究得最清楚的是大肠杆菌RNA聚合酶。该酶是由五种亚基组成的六聚体(α2ββ'ωσ)分
多反转录酶的多种酶活性的介绍
①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。 ②RNase
关于反转录酶的注意事项
一、反转录酶 在进行RT反应之前,应考虑以下几个方面: 1、RNA 成功的cDNA合成来自高质量的RNA,高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中,要特别防止RNase的污染,同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成
关于逆转录酶的简介
多反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性 。 ①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反
关于转录因子的转录抑制区的介绍
也是转录因子调控表达的重要位点,但是对其作用机理研究尚不深入。可能的作用方式有三种:1)与启动子的调控位点结合,阻止其它转录因子的结合;2)作用于其它转录因子,抑制其它因子的作用;3)通过改变DNA的高级结构阻止转录的发生。 转录因子必须在核内作用,才能起到调控表达的目的。因此,转录因子上的核
关于逆转录酶抑制剂的基本介绍
获得性免疫缺陷综合征(艾滋病,AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的严重传染性疾病。HIV是一种逆转录病毒,其逆转录过程就是在病毒逆转录酶的作用下,以病毒RNA为模板合成前病毒DNA的过程。病毒逆转录酶在病毒生命周期中的独特功能使其成为抗病毒治疗的重要靶点 。逆转录酶抑制剂能够特异性作用于
关于AMV逆转录酶的特点和应用介绍
一、特点介绍 1.高灵敏度2、高得率 3.高达60℃的反应温度可有效打开rna二级结构 4.可合成长至10-12kb的cdna 5.rt反应液可适用不同用途 二、应用 1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃经amv酶逆转录后进行pcr的产物电泳结果2、1
关于转录的特点介绍
转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。 转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂,
关于玻璃酸酶的基本信息介绍
玻璃酸酶系从哺乳动物睾丸中提取的一种能水解玻璃黏多糖的酶,是一种白色或微黄色粉末,在水中易溶,在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。无臭。稳定性较好,420C持续加热60min活力不损失,1000C 持续加热5 min活力可保留80%。在低浓度的水溶液中较易失活,一般可用明胶或阿拉伯胶保护防止失活。Fe2+
关于免疫酶技术的基本信息介绍
免疫酶技术(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫测定,是通过酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法,其应用范围极广。显示方法是用酶的特殊底物来处理反应后的标本,通过酶催化底物的显色反应来测定抗原或抗体的存在,以酶标作定量或定性分析。标记酶有辣根过氧化物酶(HRP) 和碱
关于环化酶的基本信息介绍
环化酶()是,广泛存在于原核和真核生物。环化酶中,分子量约为190 000,是一个很大的膜蛋白,它紧紧地结合在细胞膜内侧。 cAMP是代谢调节剂之一,由于激素被认为是信使分子,它则被称为“第二信使”。许多激素(如促肾上腺皮质激素)虽然作用于靶细胞但并不进入细胞内,而与细胞膜外侧的专一受体结合形
关于组成酶的基本信息介绍
根据酶的合成方式和存在时间, 微生物细胞内的酶可分为组成酶和诱导酶, 组成酶是细胞内一直存在的酶, 它的合成仅受遗传物质控制即受内因控制。不管是组成酶或是诱导酶都是受基因控制合成的, 如果微生物细胞内没有控制相关酶合成的基因, 这种酶就不会合成。
关于抗体酶的基本信息介绍
抗体酶,又称催化抗体,是一类具有催化能力的免疫球蛋白,即通过一系列化学与生物技术方法制备出的具有催化活性的抗体,它既具有相应的免疫活性,又能像酶那样催化某种化学反应。 1946年,鲍林(Pauling)用过渡态理论阐明了酶催化的实质,即酶之所以具有催化活力是因为它能特异性结合并稳定化学反应的过
关于诱导酶的基本信息介绍
诱导酶(induced enzyme)是在环境中有诱导物(通常是酶的底物)存在的情况下,由诱导物诱导而生成的酶。例如,大肠杆菌分解乳糖的半乳糖苷酶就属于诱导酶。又如,催化淀粉分解为糊精、麦芽糖等的α-淀粉酶也是一种诱导酶,多种微生物都能产生这种酶。如果将能合成α-淀粉酶的菌种培养在不含淀粉的葡萄
关于泛素活化酶的基本信息介绍
泛素活化酶,也称为E1酶,催化泛素化反应的第一步,该反应可以通过蛋白酶体针对蛋白质进行降解。泛素或泛素样蛋白与靶向蛋白的共价键是真核生物调控蛋白功能的主要机制。许多过程如细胞分裂、免疫反应和胚胎发育也受到泛素和泛素样蛋白翻译后修饰的调控。
关于发酵酶蛋白的基本信息介绍
发酵酶蛋白指酶的纯蛋白部分,是相对于辅酶因子而言,又称为脱辅基酶蛋白,其单独存在时不具有催化活性,与辅酶因子结合形成全酶后才显示催化活性。酶蛋白主要的用与饲养业。酶蛋白以植物蛋白为原料,酵母菌为主菌,辅以产酶、产维生素的7种菌进行复合发酵,改善植物蛋白结构,富含消化酶系、菌体蛋白、维生素制作的饲
关于碳酸酐酶的基本信息介绍
碳酸酐酶(Carbonic Anhydrase,CA)是一种含锌金属酶,迄今在哺乳动物体内已发现至少有11种同工酶,它们的结构、分布、性质各异,多与各种上皮细胞泌H-和碳酸氢盐有关,通过催化CO2水化反应及某些脂、醛类水化反应,参与多种离子交换 ,维持机体内环境稳态。 1940年发现的第一个锌
关于凝固酶试验的基本信息介绍
凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是与细胞壁结合的凝聚因子,称结合凝固酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使发生沉淀,包围于细菌外面而凝聚成块,玻片法阳性结果是由此凝聚因子所致;另一种凝固酶是分泌至菌体外,称为游离凝固酶,它能使凝血酶原变成凝血酶类产物,
关于酶标记法的基本信息介绍
酶标记法:酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30