关于逆转录酶的使用说明介绍

M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所抑制,该酶绝对不能用Promega的RiboprobeAMV反转录酶5X反应缓冲液,也不能用Promega的RiboclonecDNA第一条链缓冲液,因为这二种缓冲液均含有亚精胺。......阅读全文

关于逆转录酶的使用说明介绍

  M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所

关于逆转录酶的合成步骤介绍

  1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s  2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL  3、65℃保温5min,然后冰浴5min;  4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份  RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL  10×M-MLV

关于AMV逆转录酶的基本介绍

  amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全酶。amv逆转录酶经高度纯化,完全无核酸酶污染。amv逆转录酶可用于cdna合成,也可用于rna和dna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或polya+rnd为模板,具有以r

关于逆转录酶的医学发展介绍

  细胞的衰老和老化被认为和染色体末端由重复的DNA(TTAGGG)序列所组成的端粒序列的丢失相关。随着细胞的每次分裂,端粒会丢失50~200bp,当端粒缩短到一定程度就不再保护染色体免受重组或降解,细胞分裂的控制点就此得到信号而产生作用,可使细胞分裂停止并进入老化过程致细胞死亡。端粒长度的维持即重

关于逆转录酶的质量控制介绍

  1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。  2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。  3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。  4.

关于逆转录酶的注意事项介绍

  在进行RT反应之前,应考虑以下几个方面:  1、RNA  成功的cDNA合成来自高质量的RNA,高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中,要特别防止RNase的污染,同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。R

关于逆转录酶的社会效益介绍

  由它催化转录合成的DNA称为互补DNA(cDNA)。通常情况下,细胞内的转录应由DNA到RNA的,所得RNA为信使RNA(mRNA)供蛋白质合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要实现自身扩增,必须具有DNA,因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA。逆转录酶可用RT—PCR,将R

关于逆转录酶的基本信息介绍

  反转录酶(reverse transcriptase,也可写成逆转录酶) 又称为依赖RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶,该酶以RNA 为模板,以dNTP 为底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物,在tRNA 3'-OH

关于AMV逆转录酶的特点和应用介绍

  一、特点介绍  1.高灵敏度2、高得率  3.高达60℃的反应温度可有效打开rna二级结构  4.可合成长至10-12kb的cdna  5.rt反应液可适用不同用途  二、应用  1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃经amv酶逆转录后进行pcr的产物电泳结果2、1

关于逆转录酶抑制剂的基本介绍

  获得性免疫缺陷综合征(艾滋病,AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的严重传染性疾病。HIV是一种逆转录病毒,其逆转录过程就是在病毒逆转录酶的作用下,以病毒RNA为模板合成前病毒DNA的过程。病毒逆转录酶在病毒生命周期中的独特功能使其成为抗病毒治疗的重要靶点 。逆转录酶抑制剂能够特异性作用于

关于逆转录酶的简介

  多反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性 。  ①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反

逆转录酶的活性介绍

①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。②RNase H活性;

关于逆转录酶抑制剂的概述

  逆转录酶(RT)早于1964年发现,在结构上逆转录酶由两个亚基α和β组成,α亚基的分子量为6.2万,β亚基的分子量为9.5万。在功能上,逆转录酶具有DNA聚合酶、内切酶和类似RNaseH活性;同时具有结合t-RNA和解开DNA-DNA或RNA-DNA的活性。逆转录酶在宿主细胞内有3个基因表达为多

关于妊马雌酮的使用说明介绍

  妊马雌酮系内含雌酮硫酸钠53%~61%和孕烯雌酮硫酸钠23%~30%,作用与雌酮、雌二醇相似,有较好的止血作用。肝功能不全者慎用。注射用该药仅作短期使用。在开始使用任何一种雌激素之前,应完整地收集病人的用药史和家族史。疑为体内激素水平失衡导致的子宫出血病例,一旦出血停止,应对病人进行全面的体格检

关于双氯西林的使用说明介绍

  成分:本品为复方制剂,其组份为为阿莫西林0.25g和双氯西林0.125g。  性状:本品为薄膜衣片,除去包衣后显白色或类白色。规格:0.375g(阿莫西林0.25g,双氯西林0.125g)  贮藏:密闭,在凉暗干燥处保存。  包装:双铝包装,12片/盒,24片/盒。  有效期:暂定24个月  孕

关于半胱氨酸的使用说明介绍

  一、用法用量  ①喷雾吸入:仅用于非应急情况下,以10%溶液喷雾吸入,1~3ml/次,2~3次/日。  ②气管滴入:急救时以5%溶液经气管插管或直接滴入气管内,1~2ml/次,2~6次/日。  ③气管注入:急救时以5%溶液用注射器自气管的甲状软骨环骨膜处注入气管腔内,每次0.5~2ml(婴儿0.

关于反转录酶的使用说明介绍

  M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所

关于心电图机的使用说明介绍

  1.电源开关置于“ON”。  2.电源开关置于“AC(交流),’,此时“LINE”“TBST”“PA PER SPEED(25mm/s)”“SENSITIⅥTY(l)”“STOP”,晶体灯发出亮光。  3.调节基线控制旅钮应能改变描笔的位置,使之停在纪录纸中央附近。  4.按动“CHECK”键,

关于血球计数板的使用说明介绍

  以计数酵母菌为例  (1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数。  (2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可。  (3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。  (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻

逆转录酶的合成步骤

1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL3、65℃保温5min,然后冰浴5min;4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL10×M-MLVReactionBuff

逆转录酶的活性特点

①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为赖氨酸的tRNA,在引物tRNA 3'-末端以5'→3'方向合成DNA。反转录酶中不具有3'→5'外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比

关于漩涡混合仪的使用说明的介绍

  1、仪器使用前,先将调速旋钮置于最小位置,封闭电源开关。  2、装容器瓶时,为了使仪器工作时平衡性能好,防止发生较大振荡,装瓶时应将所有试瓶分布均匀,各瓶的溶液应大致持平。若容器瓶不足数,可将试瓶对称放置或装入其它等量溶液的试瓶布满空位。  3、接通电源,打开电源开关,指示灯亮,缓慢调节调速旋钮

关于依沙吖啶片的使用说明介绍

  拉丁名Ethacridine 别名:利凡诺、雷佛奴尔、RIVANOL 作用与用途:依沙吖啶片能刺激子宫肌肉收缩,用于中期妊娠引产。此外,依沙吖啶片也常用于外用杀菌。 用法:中期引产:妊娠14~18周者,先冲洗阴道,每天一次,连续3天。再由导尿管向宫腔注入本品溶液。妊娠18~24周者,由下腹壁向羊

逆转录酶的作用过程

逆转录酶的作用是以dNTP为底物,以RNA为模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3'-末端上,按5'→3'方向,合成一条与RNA模板互补的cDNA单链,它与RNA模板形成RNA-cDNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以cDNA为模板合

逆转录酶的特点和用途

逆转录酶 是一种依赖RNA的DNA聚合酶。此酶首先是1970年从鼠白血病毒和劳氏肉瘤病毒中发现的。这两个课题组的论文都发在了同一期的《Nature》杂志上。最普遍使用的是从鸟类骨髓母细胞瘤病毒(AMV)分离出来的。活性:一种可以有效地将mRNA反转录成DNA的酶,其产物称为cDNA(compleme

关于妥拉磺脲片剂使用说明介绍

  【中文名称】 妥拉磺脲  【产品英文名称】 Tolazamide  【功效主治】妥拉磺脲片剂主要用于成年后发病单用饮食控制无效,而胰岛功能尚存在的轻、中型糖尿病。  【药理作用】 系磺酰脲类口服降血糖药。对正常人和糖尿病患者均有降糖作用,但对胰岛功能丧失者无效。妥拉磺脲片剂主要通过刺激胰岛β细胞

关于硫酸依替米星的使用说明介绍

  用法用量 静脉滴注。成人推荐剂量:对于肾功能正常泌尿系统感染或全身性感染的患者,bid,0.1~ 0.15g/次 ,稀释于100ml的灭菌生理盐水或5%葡萄糖注射液中,静滴,滴注1h。一般疗程5~10d,或20 0~300mg溶于5%葡萄糖注射液或灭菌生理盐水100ml中静滴1h,qd。疗程5~

逆转录酶原位-PCR-实验

这一部分介绍了一种原位 PCR,特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验方法原理原位 PCR 仪,盖玻片,培养箱,湿盒,RT-PCR 试剂盒,Permount实验材料组织样品和细胞培养物试剂、试剂盒Nuc

逆转录酶原位-PCR-实验

实验方法原理 原位 PCR 仪,盖玻片,培养箱,湿盒,RT-PCR 试剂盒,Permount实验材料 组织样品和细胞培养物试剂、试剂盒 Nuclear Fast Red甲醛缓冲液检测溶液DEPC 处理的水PBSKH2P04二甲苯乙醇牛血清白蛋白SSC NBT BCIP 显色剂胃蛋白酶DNA

逆转录酶原位-PCR-实验

            实验方法原理 原位 PCR 仪,盖玻片,培养箱,湿盒,RT-PCR 试剂盒,Permount 实验材料 组织样品和细胞培养物