关于逆转录酶的质量控制介绍
1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。 2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。 3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。 4.第一链cDNA的反应:在标准化的反应中,200单位酶催化从1mg1.2kbRNA或1mg7.5kbRNA将同位素掺入到cDNA中,通过放射自显影,对于1.2kb的RNA,产物cDNA是单一的、全长的条带。对于7.5kb的RNA产物有部分是全长的条带。用这二种RNA放射性转换到cDNA中有12%。 5.RNaseH活性:200单位酶与polyA:polydT37oC保温60分钟,释放出的放射性要低于1%。 6.物理纯度:在SDS-PAGE上>90%纯。储存缓冲液:20mMTris-HClpH7.5;200mMNaCl;0.1m......阅读全文
关于逆转录酶的质量控制介绍
1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。 2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。 3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。 4.
关于脂质体的质量控制介绍
1、形态、粒径及其分布 采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。如注射给药脂质体的粒径应小于200nm,且分布均匀,呈正态性,跨距宜小。 2、包封率和载药量 包封率:包封率=(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)×100% 一般采用葡聚糖凝胶、超速离心
关于反转录酶的质量控制介绍
1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。 2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。 3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。 4.
关于蛇床子素的质量控制介绍
①色谱(高效液相色谱:薄层层析;气相色谱) ②质谱(液-质联用) ③光谱(红外、紫外),原子吸收 ④测定(物理常数测定;旋光测定;不挥发物测定;干燥失重测定;卡尔.费休测定;蒸发或灼烧残渣测定) ⑤分析(含量分析;元素分析) ⑥滴定(酸性滴定;碱性滴定;配位滴定;非水滴定;氧化还原滴定
关于反转录酶的质量控制的介绍
1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。 2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。 3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。 4.
关于电杆的质量控制
电杆 外观质量检验主要控制弯曲度,合缝漏浆,表面裂缝及内外壁露筋等,这些缺陷对电杆力学性能及耐久性均有很大影响。咱们举例说明:一、弯曲度所谓弯曲度是指电杆全长偏离轴线弯曲;弯曲度允许偏差:1.电杆梢径小于或者等于190时,弯曲度≤L/800;2.电杆梢径或者直径大于190时,弯曲度≤L/1000。二
关于逆转录酶的合成步骤介绍
1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s 2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL 3、65℃保温5min,然后冰浴5min; 4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份 RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL 10×M-MLV
关于AMV逆转录酶的基本介绍
amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全酶。amv逆转录酶经高度纯化,完全无核酸酶污染。amv逆转录酶可用于cdna合成,也可用于rna和dna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或polya+rnd为模板,具有以r
关于逆转录酶的医学发展介绍
细胞的衰老和老化被认为和染色体末端由重复的DNA(TTAGGG)序列所组成的端粒序列的丢失相关。随着细胞的每次分裂,端粒会丢失50~200bp,当端粒缩短到一定程度就不再保护染色体免受重组或降解,细胞分裂的控制点就此得到信号而产生作用,可使细胞分裂停止并进入老化过程致细胞死亡。端粒长度的维持即重
关于逆转录酶的注意事项介绍
在进行RT反应之前,应考虑以下几个方面: 1、RNA 成功的cDNA合成来自高质量的RNA,高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中,要特别防止RNase的污染,同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。R
关于逆转录酶的社会效益介绍
由它催化转录合成的DNA称为互补DNA(cDNA)。通常情况下,细胞内的转录应由DNA到RNA的,所得RNA为信使RNA(mRNA)供蛋白质合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要实现自身扩增,必须具有DNA,因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA。逆转录酶可用RT—PCR,将R
关于逆转录酶的基本信息介绍
反转录酶(reverse transcriptase,也可写成逆转录酶) 又称为依赖RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶,该酶以RNA 为模板,以dNTP 为底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物,在tRNA 3'-OH
关于逆转录酶的使用说明介绍
M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所
关于AMV逆转录酶的特点和应用介绍
一、特点介绍 1.高灵敏度2、高得率 3.高达60℃的反应温度可有效打开rna二级结构 4.可合成长至10-12kb的cdna 5.rt反应液可适用不同用途 二、应用 1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃经amv酶逆转录后进行pcr的产物电泳结果2、1
关于逆转录酶抑制剂的基本介绍
获得性免疫缺陷综合征(艾滋病,AIDS)是由人免疫缺陷病毒(HIV)引起的严重传染性疾病。HIV是一种逆转录病毒,其逆转录过程就是在病毒逆转录酶的作用下,以病毒RNA为模板合成前病毒DNA的过程。病毒逆转录酶在病毒生命周期中的独特功能使其成为抗病毒治疗的重要靶点 。逆转录酶抑制剂能够特异性作用于
关于逆转录酶的简介
多反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性 。 ①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反
ELISA质量控制质量控制血清
ELISA 是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA 的影响因素较多
逆转录酶的活性介绍
①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。②RNase H活性;
质量控制影响XRF定量精度的介绍
在分析目标样品过程中,采用其它实验室分析方法进行定量精度的控制是必要的,不同分析方法存在偏差是必然的,当偏差较大时,应进一步充分验证两种分析方法的精度,目标是提升XRF定量精度。
尿液的质量控制
1.使用新鲜尿尿放置时间过长,盐类结晶析出、尿胆原转变为尿胆素、细菌增殖和腐败、尿素分解,均可使尿颜色加深、混浊度增高。 2.防止污染。
关于逆转录酶抑制剂的概述
逆转录酶(RT)早于1964年发现,在结构上逆转录酶由两个亚基α和β组成,α亚基的分子量为6.2万,β亚基的分子量为9.5万。在功能上,逆转录酶具有DNA聚合酶、内切酶和类似RNaseH活性;同时具有结合t-RNA和解开DNA-DNA或RNA-DNA的活性。逆转录酶在宿主细胞内有3个基因表达为多
稻谷质量控制
为了能够更加的配合我国的粮食体质改革,减少这些年来对粮食管理体质不全所导致的问题,我们已经加大了对农作物品质的检测了,国家的相关部门已经对粮仓进行和严格的品质检查了,尤其是对大米的粘度,因为这个我们没有办法用人力来完成,所以我们只能借助粘度测试仪来完成,检测的结果还是比较准确的,已经被大家
关于转录控制的基本介绍
在分子生物学和遗传学中,转录调节是指细胞调控DNA转化为RNA(转录)的手段,从而使基因活动得到编排。 转录因子是一种与特定DNA序列结合的蛋白质,以调节特定基因的表达。转录因子的力量在于它们能够激活或抑制下游目标基因的广泛的序列。这些转录因子以一种组合方式工作的事实意味着,只有一小部分生物体
关于子痫控制血压的介绍
血压≥160/110mmHg的重度高血压孕妇应降压治疗;血压≥140/90mmHg的非重度高血压患者可使用降压治疗。血压应平稳下降,且不应低于130/80mmHg,以保证子宫胎盘血流灌注。 常用口服降压药物有:拉贝洛尔、硝苯地平短效或缓释片。如口服药物血压控制不理想,可使用静脉用药,常用有:拉
关于转录的调节控制介绍
转录的调节控制是基因表达调节控制中的一个重要环节。促进基因转录叫正调节,抑制基因转录叫负调节。 在原核生物方面1961年F.雅各布和J.莫诺提出的操纵子学说,得到许多人的验证和充实。操纵子通常的调控方式为: ①诱导和阻遏作用; ②环腺苷酸(CAMP)和降解物活化蛋白(CAP)的调节作用;
ELISA质量控制质量改进(QI)
质量改进(Quality Improvement,QI)的建议来源于三方面:(1)室内质控:提示实验的精密度差,应规范各项操作;(2)室间质评:提示实验的准确性差,应改进设备的准备或更换试剂;(3)病人或医生的报怨:提示实验的偶然误差,应分析实验的质控过程是否达标。记录:1. 所有实验的原始资料均应
ELISA质量控制室内质量控制程序
临床检验的检测结果,每次或每天之间不可能没有误差。决定允许的误差范围,以临床上不造成误诊与漏诊为准,通过以下步骤来确定质控范围。一、最佳条件下的测定误差最佳条件下已知值质控血清变异(optimal conditio variance,简称OCV)的测定:在本实验室最佳条件下(包括操作者、试剂、仪器等
hCG检查的质量控制
1.标本采集与处理宜采集首次晨尿(中段尿)100ml,离心取上清液用于检查。若为蛋白尿、血红蛋白尿,应加热煮沸3min后,离心取上清液检查。不宜使用严重的血尿、菌尿标本。2.检验过程每批试验均应设定阳性对照和阴性对照。3.假阳性尿中LH、FSH、TSH等,可与hCG产生试验的交叉反应,呈现假阳性。为
尿标本的质量控制
1. 冷藏时间尿标本冷藏时间最好不超过6h。2. 甲醛甲醛是一种还原性物质,可产生假阳性。用量过大可与尿素产生沉淀,干扰显微镜检查。3. 甲苯用量必须足够。取样检验时,应插入穿过甲苯液层,吸取尿。4. 麝香草酚用量过多时,可使尿蛋白加热乙酸法呈假阳性反应,干扰尿胆色素检出。
PCR检测的质量控制
随着兽医防疫工作重要性的逐步提高,PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可,已经从实验室研究走进了临床应用阶段。如何提高PCR检测质量,已成为实验室技术人员不可回避的一个问题,它直接影响实验室检测结果的可信度和兽医防疫工作质量。 我们认为,PCR检测质量的控制是一个系统工程,总体上涉及三个方面:一是