反转录酶具有哪些活性?

多反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性 。 ①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。 ②RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子 。 ③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。 除此之外,有些反转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在反转录酶的作用下,合成出互补的DNA......阅读全文

哪些生物具有盐腺?

其盐腺开口的部位可以有所不同,例如,加拉帕哥斯的海鬣蜥的盐腺开口于鼻腔前部;海蛇的舌下盐腺开口于口腔。海鸟的每个眼眶上面有一个盐腺,开口于鼻腔,故又称鼻盐腺。陆上生活的鸟类,这种腺体不发达。盐腺分成许多叶,每叶有一条中央管,中央管上又有许多分泌小管,各中央管汇集于总导管,开口于体外。

信使RNA的反转录酶与反转录过程

  定义:以反义RNA为模版,通过反转录酶,进行的RNA转录  1.概念反转录是以RNA为模板合成DNA的过程,也称逆转录。这是DNA生物合成的一种特殊方式。  2.反转录酶与反转录过程  反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合

关于转录酶的特点介绍

  RNA聚合酶催化RNA的合成,其与DNA聚合酶有许多相同的催化特点:  ①以DNA为模板;  ②催化核苷酸通过聚合反应合成核酸;  ③聚合反应是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯键的反应;  ④以3’→5’方向阅读模板,5’→3’方向合成核酸;  ⑤按照碱基配对原则忠实转录模板序列。

反转录酶的合成步骤

1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL3、65℃保温5min,然后冰浴5min;4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL10×M-MLVReactionBuff

双酶切反应酶活性分析

同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲

反转录病毒原液检测实验——反转录酶分析法

实验材料病毒试剂、试剂盒SSC乙醇仪器、耗材滴定板滤纸离心机实验步骤1.  加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒上淸,盖上平板,置于37℃培养箱中温育1~2 h。2.  将各反应液10 μl 点于一张2.5 cm 直径的圆形DE52或

酶活性单位检验技师

酶活性单位是检验技师需要了解的知识,医学教育网搜索整理如下:1.酶活性单位20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方

RNA酶活性的控制

为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注

酶活性单位临床生化

酶活性单位:1.酶活性单位20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大,给临

酶的活性浓度单位

酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。近些年来,我国及世界各国的临床实验室几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性浓度。考虑到各级医护人员都对katal不太熟悉,如使用katal/L报告酶活性浓度结果时,最好同时注明相应的U/L.在对酶活性浓度单位计算时,可根据所测定的酶所用方法的不同,利用标准

RNA酶活性的控制

为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注

酶的活性浓度单位

酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。近些年来,我国及世界各国的临床实验室几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性浓度。考虑到各级医护人员都对katal不太熟悉,如使用katal/L报告酶活性浓度结果时,最好同时注明相应的U/L.在对酶活性浓度单位计算时,可根据所测定的酶所用方法的不同,利用标准

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

酶活性单位临床生化

酶活性单位: 1.酶活性单位 20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大

酶活性单位临床生化

酶活性单位:1.酶活性单位20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大,给临

酶活性测定的方式

  酶促反应速度的测定可采用两种方式:  一、测定完成一定量反应所需的时间;  二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法,后者称为动力学法。  终点法  该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。  其

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

酶活性的测定方法

一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力,因为此时干扰因素较少,速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间,可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有,变化较大,而底物往往过量,其变化不易测准,所以多用产物来测定

酶蛋白的活性特点

酶蛋白与一般蛋白质的不同之处在于酶蛋白具有活性中心。酶蛋白的活性中心是与底物发生催化作用的部位,由酶蛋白的立体构型所决定,一般是三级结构及四级结构才具有活性中心。若这种结构被破坏,活性中心也就破坏,酶就失去活性,这就是当环境变化时,酶丧失活性的原因。   整个酶蛋白,包括活性中心和非活性中心部分,都

酶活性测定方法对比

  1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的

酶活性测定方法对比

1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影响

内切酶星号活性

在非理想的条件下,内切酶切割与识别位点相似但不完全相同的序列,这一现象称星号活性。有人提出,这种"星号"活性可能是内切酶的一种普遍特性(1),如果提供给相应反应条件,所有内切酶都会出现非特异性切割。NEB已证实下列酶存在星号活性:Apo I(2)、Ase I(2)、BamH I(3)、BssH II

酶的活性中心

酶的活性中心:酶蛋白与其他蛋白质不同之处在于酶蛋白有活性中心。所谓活性中心是指酶蛋白上具有的与催化活性有关的一个特定区域,其中包括催化过程中关键的催化基团以及与底物结合有关的结合基团。

酶活性测定方法对比

1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影

酶的活性调节方式

酶的活性可以通过以下几种方式进行调节:一、酶活性的别构调节概念:别构酶具有别构效应,即一些小分子化合物与酶蛋白分子活性中心以外的某一部位特异结合,引起酶蛋白分子构象变化,从而改变酶的活性。调节方式:别构激活:使酶活性增强的效应。通常由底物或底物以外的别构激活剂引起。别构抑制:使酶活性降低的效应。可由

酶的活性指标介绍

酶催化化学反应的能力叫酶活力(或称酶活性,active unit)。1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1min内能转化1μmol底物的酶量,或是转化底物中1μmol的有关基团的酶量。影响因素酶活力可受多种因素的调节控制,从而使生物体能适应外界条件

意外发现:苄丝肼具有靶向抗肿瘤活性

  来自华中科技大学和沈阳药科大学的研究人员发表了“Benserazide, a dopadecarboxylase inhibitor, suppresses tumor growth by targeting hexokinase 2”的文章,他们意外地发现抗帕金森综合症药物苄丝肼能够靶向肿瘤代

电热套具有哪些特征呢?

电热套是实验室通用加热仪器的一种,由无碱玻璃纤维和金属加热丝编制的半球形加热内套和控制电路组成,多用于玻璃容器的控温加热。具有升温快、温度高、操作简便、经久耐用的特点,是做控温加热试验的zui理想仪器。 电热套结构特征:电热套是用无碱玻璃纤维作绝缘材料,将Cr20Ni80合金丝簧装置于其中,用硅酸铝

探伤机具有哪些特性?

探伤机的用途     探伤机作为新时代、新科技所诞生出来的产品,自诞生以来一直都备受瞩目。在科技飞速发展的大时代,不管是航空还是航海等各个领域,都出现了各种大型的工作工具和各种使用器具,而作为工业化发展的产物,在这些机械领域发展的背后,一定是要有一个支持着各种先进仪器运作的设备,这个就是探伤机。 

Zeta电位仪具有哪些性能

 Zeta电位仪是由新型的光学系统、电泳池、数据采样和数据处理等部分组成,实现了由PC个人微机对采样模块的控制及后期数据处理的一体化设计,与其它同类产品相比,它具有更多的性能。   Zeta电位仪的主要用途之一就是研究胶体与电解质的相互作用。由于许多胶质,特别是那些通过离子表面活性剂达到稳定的胶质是