关于反转录酶的质量控制介绍

1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。 2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。 3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。 4.第一链cDNA的反应:在标准化的反应中,200单位酶催化从1mg1.2kbRNA或1mg7.5kbRNA将同位素掺入到cDNA中,通过放射自显影,对于1.2kb的RNA,产物cDNA是单一的、全长的条带。对于7.5kb的RNA产物有部分是全长的条带。用这二种RNA放射性转换到cDNA中有12%。 5.RNaseH活性:200单位酶与polyA:polydT37oC保温60分钟,释放出的放射性要低于1%。 6.物理纯度:在SDS-PAGE上>90%纯。 储存缓冲液:20mMTris-HClpH7.5;200mMNaCl;0.......阅读全文

ELISA质量控制质量改进(QI)

质量改进(Quality Improvement,QI)的建议来源于三方面:(1)室内质控:提示实验的精密度差,应规范各项操作;(2)室间质评:提示实验的准确性差,应改进设备的准备或更换试剂;(3)病人或医生的报怨:提示实验的偶然误差,应分析实验的质控过程是否达标。记录:1. 所有实验的原始资料均应

关于胃食管反流症状的缓解方法介绍

  避免精神高度紧张和饮食无规律性以及过饱、进食酸、辣、甜、不易消化的食物,忌浓茶、咖啡、巧克力等,避免吸烟、饮酒或吃高脂肪食物及常服用钙通道阻滞剂。肥胖者应减轻体重,饮食应少量多餐,每天4-6餐,睡眠时抬高床头15-20CM以减少反流。平时加强腹肌锻炼有助于防止胃食管反流的发生。当患者发病时最好到

关于反流性肾病的其他辅助检查介绍

  (1)肾活检 本病典型病例的病理改变主要是皮质乳头瘢痕形成、肾盏扩张、扭转,病变以肾下极和上极最显著,病变可为单侧或双侧,肾脏有不同程度的缩小,也可极度萎缩。如大量反流继续存在可见输尿管扩张、弯曲。  (2)组织学检查 反流性肾病肾组织学损害实际上与慢性肾盂肾炎无明显区别,可见淋巴细胞浸润、间质

关于反流性食管炎的基本介绍

  反流性食管炎(RE)是由胃、十二指肠内容物反流入食管引起的食管炎症性病变,内镜下表现为食管黏膜的破损,即食管糜烂和(或)食管溃疡。反流性食管炎可发生于任何年龄的人群,成人发病率随年龄增长而升高。西方国家的发病率高,而亚洲地区发病率低。这种地域性差异可能与遗传和环境因素有关。但近二十年全球的发病率

关于手术后反流性胃炎的基本介绍

  胃手术后病人上腹部烧灼样疼痛、恶心、呕吐混杂胆汁的食物称手术后反流性胃炎。病人常因餐后上腹疼痛加重,呕吐后疼痛不能缓解;减少摄食,导致体重减轻和贫血。  正常胃黏膜表面有一层黏液,对氢离子具有屏蔽作用,使胃酸只停留在胃腔。当幽门防御胆汁反流机制失常时,胆汁反流入胃、甚至进入食管。反流入胃的胆汁酸

关于胃食管反流显像的检测方法介绍

  1.患者先口服300ml酸性试餐(由橘子汁、稀盐酸以及显像剂混合),再服15~30ml清水以去除残留在食管的放射性,5分钟内饮完,立即进行直立位显像。婴幼儿则由鼻饲管向胃内注入适量的含有显像剂的牛奶。  2.10~15分钟后,让受检者平卧于γ照相机探头下,视野包括胃和食管,并在上腹部胃的部位缚于

关于手术后反流性胃炎的检查介绍

  1、手术后反流性胃炎的胃-食管闪烁显像:  能测到放射性标记试餐的反流。敏感性与特异性约90%。  2、手术后反流性胃炎的胃镜检查:  反流性胃炎胃镜表现胃体或残胃黏膜红色、充血水肿、组织脆弱、接触容易出血、散发浅表溃疡、胃镜下可以见到黏膜下血管襻。  3、手术后反流性胃炎的标本镜检:  壁细胞

关于反流性肾病的基本信息介绍

  反流性肾病是间质性肾病的一种,以肾表面的不规则粗大瘢痕、受累肾盏杵状肥大和扩张变形、受累皮质萎陷退缩、膀胱输尿管反流(VUR)为特征,以往称为“慢性萎缩性肾盂肾炎”。在探测到瘢痕时膀胱输尿管反流可能不明确或已经消失,部分病例的特征是反复尿路感染(UTI)。由于瘢痕形成的程度不同,肾损害可为局限性

关于反流性肾病的预防和预后介绍

  1、预后  研究表明反流性肾病的预后与蛋白尿、局灶性节段性肾小球硬化和进行性肾功能减退有重要关系。蛋白尿的程度与有无肾小球损伤及肾小球损伤的程度有很明显相关性。进行性肾小球硬化是反流性肾病慢性肾衰发生的最主要的决定因素。  2、预防  反流性肾病为多种病因引起的疾病,预防应从防治原发疾病入手,对

关于反密码子的基本信息介绍

  反密码子是在tRNA的三叶草形二级结构反密码臂的中部,可与mRNA中的三联体密码子形成碱基配对的三个相邻碱基。在蛋白质的合成中,起解读密码、将相应的氨基酸引入核糖体A和P位点的作用。 [1]  反密码子(anticodon):RNA链经过折叠,看上去像三叶草的叶形,其一端是携带氨基酸的部位,另一

关于反流性咽炎的临床表现介绍

  1、喉部有异物感  咽炎疾病出现后,患者在清晨醒来的时候会有明显的喉部有异物的感觉,咽又咽不下去,而想吐却有吐不出来,令患者非常的苦恼,这种症状就是受到疾病的影响而出现的症状,所以,希望大家能够引起高度的重视。  2、失声  在患上了这种疾病后,患者很容易出现失声的症状,但是这种症状是短期的,患

关于反流性咳嗽的基本信息介绍

  反流性咳嗽是一个病症名称。  胃食管反流病(GERD)不仅仅是胃和食管的疾病,其消化道外的表现,特别是呼吸道系统并发症正越来越受到关注,如慢性咳嗽、慢性咽炎、支气管哮喘、吸入性肺炎等。胃食管反流性咳嗽(GERC),约半数在临床上单独变现为慢性咳嗽,而无典型的GERD反流样症状,与其他原因引起的慢

关于胃食管反流症状的鉴别诊断介绍

  一、心绞痛  胃食管反流疾病有时其他反流症状不明显而以胸骨后疼痛为主要表现,酷似心绞痛;且冠心病心绞痛与胃食管反流疾病同属老年性疾病。二者极易混淆须进行鉴别,鉴别借助于心电图,24h动态心电图,食管24hpH监测。酸灌流诱发试验。极难鉴别者可做冠状动脉造影术。  二、胃食管反流疾病常有食管炎的并

关于反斯托克斯荧光的基本介绍

  反斯托克斯荧光是气态自由原子吸收了光源的特征辐射后,原子的价电子跃迁到较高能级,然后又跃迁返回基态或较低能级,同时发射出小于光源激发辐射的波长的荧光。   荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且

关于反流性咽炎的基本信息介绍

  反流性咽炎患者常常表现为咽部异物感、痒感、灼热感、干燥感、痛感。严重的患者整天的干咳,清嗓、刷牙的时候还会有恶心欲吐。   饭菜中含盐量太高,会导致唾液分泌减少,有利于各种细菌和病毒在上呼吸道的存活;其次,高盐饮食可能降低黏膜抵抗疾病的能力,导致免疫力下降,各种细菌、病毒乘机而入,引发咽炎。因

ELISA质量控制室内质量控制程序

临床检验的检测结果,每次或每天之间不可能没有误差。决定允许的误差范围,以临床上不造成误诊与漏诊为准,通过以下步骤来确定质控范围。一、最佳条件下的测定误差最佳条件下已知值质控血清变异(optimal conditio variance,简称OCV)的测定:在本实验室最佳条件下(包括操作者、试剂、仪器等

关于基因转录的蛋白质的分类介绍

  真核生物在转录时往往需要多种蛋白质因子的协助。一种蛋白质是不是转录机构的一部分往往是通过体外系统看它是否是转录起始所必须的。一般可将这些转录所需的蛋白质分为三大类:  (1)RNA聚合酶的亚基,它们是转录必须的,但并不对某一启动子有特异性。  (2)某些转录因子能与RNA聚合酶结合形成起始复合物

转录的定义介绍

转录(Transcription)是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以A、U、C、G四种核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步,进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特

转录的过程介绍

在转录过程中,DNA模板被转录方向是从3′端向5′端;RNA链的合成方向是从5′端向3′端。RNA的合成一般分两步,第一步合成原始转录产物(过程包括转录的启动、延伸和终止);第二步转录产物的后加工,使无生物活性的原始转录产物转变成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始转录产物一般不需后加工

RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子

RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子转录因子分子量(kD)功能TBP30与TATA盒结合TFⅡ-B33介导RNA聚合酶Ⅱ的结合TFⅡ-F30,74解旋酶TFⅡ-E34,37ATP酶TFⅡ-H62,89解旋酶TFⅡ-A12,19,35稳定TFⅡ-D的结合TFⅡ-I120促进TFⅡ-D的结合

RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子

RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子转录因子分子量(kD)功能TBP30与TATA盒结合TFⅡ-B33介导RNA聚合酶Ⅱ的结合TFⅡ-F30,74解旋酶TFⅡ-E34,37ATP酶TFⅡ-H62,89解旋酶TFⅡ-A12,19,35稳定TFⅡ-D的结合TFⅡ-I120促进TFⅡ-D的结合

逆转录酶的活性特点

①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为赖氨酸的tRNA,在引物tRNA 3'-末端以5'→3'方向合成DNA。反转录酶中不具有3'→5'外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比

逆转录酶的合成步骤

1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL3、65℃保温5min,然后冰浴5min;4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL10×M-MLVReactionBuff

RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子

RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子转录因子分子量(kD)功能TBP30与TATA盒结合TFⅡ-B33介导RNA聚合酶Ⅱ的结合TFⅡ-F30,74解旋酶TFⅡ-E34,37ATP酶TFⅡ-H62,89解旋酶TFⅡ-A12,19,35稳定TFⅡ-D的结合TFⅡ-I120促进TFⅡ-D的结合

概述反转录酶的社会效益

  由它催化转录合成的DNA称为互补DNA(cDNA)。通常情况下,细胞内的转录应由DNA到RNA的,所得RNA为信使RNA(mRNA)供蛋白质合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要实现自身扩增,必须具有DNA,因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA。逆转录酶可用RT—PCR,将R

关于胃食管反流的并发症的介绍

  胃食管反流常见的并发症有食管狭窄、食管溃疡、食管缩短及Barrett's食管等。对于轻微的食管狭窄,可以通过饮食限制及药物(PPI)治疗改善。短期单纯性狭窄可以用Teflon扩张器治疗(如Hurst—malonney),必要时可行支架置入治疗。部分患者亦可行外科抗反流手术。  对于食管溃

质量控制血清的保存

质量控制血清可以在-20℃保持半年定值不变,冰冻状态融化使用时,应先混匀,未用完部分可在4℃保存。一般按一周实验用量分装分类、标记、封口、-20℃冻存于冰箱中,不可反复冻融,一旦融化后应该存放2~8℃,尽快使用。

质量控制血清的选用

每个实验室可以根据自己的条件,选用国家临床中心提供的质控血清,或自己制备本室使用的质控血清。自制的不定值质控血清,在一批质控血清将用完之前,需准备下一批质控血清。质控血清要求性能稳定,较长期内效价不变,其理化性质应与病人样本相近,这样才能有效地起到监测作用。

脂质体的质量控制

  1、形态、粒径及其分布  采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。如注射给药脂质体的粒径应小于200nm,且分布均匀,呈正态性,跨距宜小。  2、包封率和载药量  包封率:包封率=(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)×100%  一般采用葡聚糖凝胶、超速离心

尿标本的质量控制

1. 冷藏时间尿标本冷藏时间最好不超过6h。2. 甲醛甲醛是一种还原性物质,可产生假阳性。用量过大可与尿素产生沉淀,干扰显微镜检查。3. 甲苯用量必须足够。取样检验时,应插入穿过甲苯液层,吸取尿。4. 麝香草酚用量过多时,可使尿蛋白加热乙酸法呈假阳性反应,干扰尿胆色素检出。