关于反转录酶的质量控制介绍

1.切口酶:在与200单位酶37oC保温60分钟后,超螺旋质粒保留在90%以上。 2.DNase测定:200单位酶与50ng3H-DNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于1%。 3.RNase测定:200单位酶与50ng3H-RNA37oC保温60分钟,分解出的放射性低于3%。 4.第一链cDNA的反应:在标准化的反应中,200单位酶催化从1mg1.2kbRNA或1mg7.5kbRNA将同位素掺入到cDNA中,通过放射自显影,对于1.2kb的RNA,产物cDNA是单一的、全长的条带。对于7.5kb的RNA产物有部分是全长的条带。用这二种RNA放射性转换到cDNA中有12%。 5.RNaseH活性:200单位酶与polyA:polydT37oC保温60分钟,释放出的放射性要低于1%。 6.物理纯度:在SDS-PAGE上>90%纯。 储存缓冲液:20mMTris-HClpH7.5;200mMNaCl;0.......阅读全文

PCR检测的质量控制

随着兽医防疫工作重要性的逐步提高,PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可,已经从实验室研究走进了临床应用阶段。如何提高PCR检测质量,已成为实验室技术人员不可回避的一个问题,它直接影响实验室检测结果的可信度和兽医防疫工作质量。 我们认为,PCR检测质量的控制是一个系统工程,总体上涉及三个方面:一是

PCR检测的质量控制

随着兽医防疫工作重要性的逐步提高,PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可,已经从实验室研究走进了临床应用阶段。如何提高PCR检测质量,已成为实验室技术人员不可回避的一个问题,它直接影响实验室检测结果的可信度和兽医防疫工作质量。 我们认为,PCR检测质量的控制是一个系统工程,总体上涉及三个方面:一是

质量控制血清的分类

质量控制血清分定值和未定值两种。如只用一份质控血清定值,一般定在正常值与异常值交界点上,定性测定时处于弱阳性水平,称为临界值。临界值质控血清可以作为试剂盒中的阳性对照品和阴性对照品以外的第三个对照品,它可以灵敏地反映出试剂盒的检出水平,确保弱阳性反应的标本不漏检。

水样采取的质量控制

水样采取的质量控制的目的是检验采样过程的质量,是防止样品采集过程中水样受到污染或发生变质的措施。(1) 现场空白现场空白是指在采样现场以纯水作样品,按照测定项目的采样方法和要求,与样品相同条件下装瓶、保存、运输,直至送交实验室分析。(2) 运输空白运输空白是以纯水作样品,从实验室到采样现场又返回实验

hCG检查的质量控制

1.标本采集与处理宜采集首次晨尿(中段尿)100ml,离心取上清液用于检查。若为蛋白尿、血红蛋白尿,应加热煮沸3min后,离心取上清液检查。不宜使用严重的血尿、菌尿标本。2.检验过程每批试验均应设定阳性对照和阴性对照。3.假阳性尿中LH、FSH、TSH等,可与hCG产生试验的交叉反应,呈现假阳性。为

粪便检验的质量控制

一、粪便标本的收集1.容器应洁净干燥,不含任何消毒剂和化学药物。盛便后不漏不溢。容器外面无 污染。2.注意收集含脓血粘液等异常部分送检。采便量一般以5 ~10g 为宜,特殊检验按 指示的方法收集标本。3.标本必须新鲜,并注意保温。二、镜检标本的制作要求1.收到标本后选取有浓血及其异常部分及时制作生理

PCR检测的质量控制

随着兽医防疫工作重要性的逐步提高,PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可,已经从实验室研究走进了临床应用阶段。如何提高PCR检测质量,已成为实验室技术人员不可回避的一个问题,它直接影响实验室检测结果的可信度和兽医防疫工作质量。PCR检测质量的控制是一个系统工程,总体上涉及三个方面:一是试验仪器;二

RNA酶活性的控制

为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注

RNA酶活性的控制

为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注

关于转录单位的简介

  RNA的合成是由RNA聚合酶(RNA polymerase)催化的。当RNA聚合酶结合到基因起始处时,即为启动子(promoter)的特殊序列上时,转录开始进行。最先转录成RNA的一个碱基对是转录起点(startpoint),启动子序列围绕在它周围。从起点开始,RNA聚合酶不断沿着模板链不断合成

反转录病毒原液检测实验——反转录酶分析法

实验材料病毒试剂、试剂盒SSC乙醇仪器、耗材滴定板滤纸离心机实验步骤1.  加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒上淸,盖上平板,置于37℃培养箱中温育1~2 h。2.  将各反应液10 μl 点于一张2.5 cm 直径的圆形DE52或

DNA转录“控制器”的关键结构被破译

  中介体是一种复杂的分子机器,在DNA(脱氧核糖核酸)的转录过程中扮演重要角色,被称为“真核转录调控中的中央控制器”。据美国物理学家组织网7月3日报道,美国印第安纳大学研究人员破译了中介体最关键的部分——其头部的蛋白组成结构,为研究中介体增加了重要的砝码,使人们能更深入理解细胞中基因

逆转录聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称逆转录聚合酶链反应英文名称reverse transcription PCR;RT-PCR定  义先将RNA通过逆转录酶的作用合成与之互补的DNA链,再以该链作模板进行聚合酶链反应扩增特定RNA序列的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

反受体的功能介绍

死亡受体是近年发现的一组细胞表面标记,属于肿瘤坏死因子受体超家族,它们与相应的配体结合后,可以通过一系列的信号转导过程,将凋亡信号向细胞内部传递。

反受体的功能介绍

中文名称反受体英文名称counter receptor定  义细胞表面的受体介导细胞之间的相互作用,一个细胞表面的受体可能是另一个细胞表面受体的配体,这时前者被称为后者的反受体。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)

反受体的功能介绍

中文名称反受体英文名称counter receptor定  义细胞表面的受体介导细胞之间的相互作用,一个细胞表面的受体可能是另一个细胞表面受体的配体,这时前者被称为后者的反受体。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)

关于转录终止子的基本信息介绍

  在原核中,发现终止信号存在于RNA真核中的聚合酶已经转录过的序列之中。这种提供终止信号的结构就称为终止子。  终止子可分为两类。一类不依赖于蛋白质辅因子就能实现终止作用。另一类则依赖蛋白辅因子才能实现终止作用。这种蛋白质辅因子称为释放因子,通常又称ρ因子。  两类终止子有共同的序列特征。在转录终

关于副反转录病毒的重要作用介绍

  由反转录病毒所引起的RNA肿瘤病毒归入肿瘤病毒(Oncovirinase)亚科,如人类T-淋巴性病毒1,2,5(HTLV-1,HTLV-2,及HTLV -5)。,其中HTLV-1为人类T细胞淋巴性反转录病毒(Human T cell lymphotropic retroviruse)被发现引起成

关于反流的病因分析

  饱食后弯腰,妊娠后期,肥胖,进食高脂饮食、巧克力、咖啡等,服用某些药物后可引起胃食管反流。  1.明确的食管疾病  反流性食管狭窄、Barrett食管、食管腺癌。  2.明确的食管外疾病  反流性咳嗽综合征、反流性喉炎综合征、反流性哮喘综合征、反流性蛀牙综合征。  3.可能相关的食管外疾病  咽

关于顺反测验的简介

  顺式排列和反式排列的组成都一样,只是排列方式不同,从而引起表型效应的不同,这种现象称为顺反效应(cis-trans effect)。在20世纪40年代中,为了研究基因的分子结构,人们用曲霉菌(aspergillus nidulans)和果蝇进行了许多杂交实验。在曲霉中,发现有的需在培养基中添加腺

ELISA质量控制室间质量评价

室间质量评价(external quality aement, 简称EQA)简称室间质评,是由质控中心采用一系列的办法连续地、客观地评价各实验室的试验结果,并发现室内质控不易发现的不准确性,了解各实验室之间结果的差异,并帮助校正,使具有可比性。各实验室试验结果报到质控中心,经过统计分析,得出相互

关于β淀粉酶酶的来源介绍

  β-淀粉酶主要存在于高等植物中,特别是谷物中,如大麦、小麦等,在甘薯、大豆中也有存在,在动物体内不存在。目前工业上使用的β-淀粉酶主要包括植物β-淀粉酶和微生物β-淀粉酶。  由于植物来源的β-淀粉酶生产成本较高,人们也开始重视微生物来源的β-淀粉酶,从20世纪60年代开始,已先后发现了来源于巨

关于凝结酶实验的凝结酶介绍

  血浆凝结酶是能使含有肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质,致病株大多数能产生,是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。传统豆腐加工一般采用盐类凝固剂和酸凝固剂,很少使用酶凝固剂。但盐类凝固剂和酸凝固剂制得的产品存在一些问题,例如用盐卤制作的豆腐具有极佳的风味,但是豆腐持水性差,而且产品放置时间

关于子痫疾病控制抽搐的介绍

  硫酸镁用法及注意事项,参见“子痫前期”条目中“硫酸镁防治子痫”。  当患者存在硫酸镁应用禁忌或硫酸镁治疗无效时,可考虑应用地西泮、苯妥英钠或冬眠合剂控制抽搐,  药物有:  1.地西泮(安定):口服2.5~5.0mg,2~3次/天,或者睡前服用。地西泮10mg肌注或者静脉注射(>2分钟)可用于控

关于烘箱控制系统的介绍

  温控器:温度控制器采用触摸按键、数显LED显示、P.I.D智能控制仪表  显示分辨率:温度:0.1℃(显示范围)  时间:0.1min  感温传感器:PT100铂金电阻测温体  控制方式:热平衡调温方式  温度控制采用P.I.D + S.S.R系统同频道协调控制  具有自动演算的功能,可将温度变

关于灭菌锅的控制方式介绍

  采用微电脑智能化全自动控制,控制灭菌压力,温度,时间;超温自动保护置:超过设定温度,自动切断加热电源;门安全连锁装置:内腔有压力,门盖无法打开,ZL装置;低水位报警:缺水时能自动切断电源,声光报警,进口断水检测装置;漏电保护:配置漏电保护装置;温度动态数字显示,灭菌结束发出结束信号;升温、灭菌、

关于显色反应的条件控制介绍

  显色反应能否满足光度法的要求,除了主要与显色剂的性质有关系外,控制好显色反应的条件也是十分重要的。显色条件包括显色剂用量、酸度、显色温度、显色时间及干扰的消除。  1、试剂用量  M(被测组分)+R(显色剂)= MR(有色化合物)  为了使显色反应尽可能进行完全,加入适当过量的显色剂是必要的。但

关于慢性反流性肾病的其他辅助检查介绍

  肾活检本病典型病例的病理改变主要是皮质乳头瘢痕形成肾盏扩张、扭转病变以肾下极和上极最显著,病变可为单侧或双侧,肾脏直径有不同程度的缩小,也可到极度萎缩。如大量反流继续存在可见输尿管扩张、弯曲。  儿童时期因VUR而发生的肾脏萎缩类似于梗阻性病变肾缩小两个标准差的患儿82%有中度(Ⅳ级)至重度(Ⅴ

关于慢性反流性肾病的预后和预防介绍

  1、预后  晚近研究表明RN的预后与蛋白尿、局灶性节段性肾小球硬化和进行性肾功能减退有重要关系。蛋白尿的程度与有无肾小球损伤及肾小球损伤的程度有很明显相关性。进行性肾小球硬化是RN慢性肾衰发生的最主要的决定因素。  2、预防  慢性反流性肾病为多种病因引起的疾病,预防应从防治原发疾病入手,对于易

关于小儿原发性膀胱输尿管反流的预后介绍

  反流自然消失与小儿的年龄和反流的程度有关。如果感染被控制,反流自然消失率Ⅱ级为63%、Ⅲ级53%、Ⅳ级33%。如静脉尿路造影显示输尿管口径正常,原发反流85%可自然消失。即使是严重反流的小儿,完全消失也有一定比例。反流的自然消失与反流累及的范围也有关系,单侧反流自然消失率可达65%;双侧反流,输