碱法分离质粒DNA的原理
现在质粒提取无论手提还是试剂盒，其根本原理大多还是碱裂解法：当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性 而呈絮状，离心时可沉淀下来。进一步的质粒DNA获取，手提是经过苯酚、氯仿抽提，RNA酶消化和乙醇沉淀 等简单步骤去除残余蛋白质和RNA以及过多的盐分，而试剂盒则在此基础上使用DNA吸附柱来吸附质粒DNA，在洗脱得到质粒。评价：1，可通过琼脂糖电泳来检查所获质粒的大小（准确大小需酶切），有无细菌基因组DNA和RNA污染，以及质粒的断裂多少，同时也可根据marke量对样品进行大致的浓度定量；2，通过紫外分光光度计测定样品OD280和OD260，计算其比值来衡量样品的纯度。经验值：纯DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9,表明有RNA污染；＜1。6，表明有蛋白质、酚等污染）。同时，用紫外分光光度计对其进......阅读全文
碱法分离质粒DNA的原理
现在质粒提取无论手提还是试剂盒，其根本原理大多还是碱裂解法：当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性 而呈絮状，离心时可沉淀下来。进一步的质粒DNA获取，手提是经过苯酚、氯仿抽
碱法分离质粒DNA的原理
现在质粒提取无论手提还是试剂盒，其根本原理大多还是碱裂解法：当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性 而呈絮状，离心时可沉淀下来。进一步的质粒DNA获取，手提是经过苯酚、氯仿抽
碱法分离质粒DNA的原理
现在质粒提取无论手提还是试剂盒，其根本原理大多还是碱裂解法：当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时，蛋白质与DNA发生变性，当加入中和液后，质粒DNA分子能够迅速复性，呈溶解状态，离心时留在上清中；蛋白质与染色体DNA不变性 而呈絮状，离心时可沉淀下来。进一步的质粒DNA获取，手提是经过苯酚、氯仿抽
粉防己生物碱的提取分离与鉴定——低压柱层析分离法
实验材料汉防已试剂、试剂盒硫酸石灰乳季胺碱乙醚静砂乙醇氯化钠蒸馏水改良碘化铋钾试剂盐酸丙酮洗脱剂苦味酸仪器、耗材渗漉桶索氏提取器水浴锅微波炉锥形瓶玻璃棒烘箱提取玻筒烧瓶硅胶滴管长颈漏斗滤纸片空压机玻璃蒸发器汉防己为防己科千金藤属物Stephania tetrandra S. Mcore的根，是祛风解
高速逆流色谱法分离制备蓖麻籽中的蓖麻碱
摘 要：利用高速逆流色谱法对蓖麻籽中蓖麻碱粗提物进行纯化，以液相色谱对纯化结果进行检测，用质谱、核磁对纯化产物进行结构确定。去壳后的蓖麻籽经过石油醚- 乙醚(2:1，V/V)脱脂，以95% 乙醇索式提取，所得产物浓缩、冻干后得到蓖麻碱粗提物。采用三氯甲烷- 甲醇- 水(2:1:1，V/V)两相溶剂体
莨菪碱和东莨菪碱的提取及分离
原理 生物碱是植物的一类次生物质，许多生物碱对人体生理发生强烈作用，因而是重要的药物。 莨菪碱和东莨菪碱是茄科植物中常见而有药用价值的生物碱。 生物碱可用不同方法提取，本实验介绍离子交换树脂法，其优点是操作及设备简便；有机溶剂用量较少，树脂再生后可反复应用；效率较高
什么是碱片法？碱片法的检测原理
碱片法是测定空气中硫酸盐化速率的一种方法。其原理为用碳酸钾溶液浸渍过的玻璃纤维滤膜暴露于大气中,碳酸钾与大气中二氧化硫等含硫化合物反应生成硫酸钾,可用硫酸钡称量法、硫酸钡光度法、比独法和离子色谐法进行测定。
高速逆流色谱法分离纯化延胡索乙素和原阿片碱
摘 要:目的确定高速逆流色谱法分离纯化延胡索乙素和原阿片碱的条件。方法采用TBE300A 型高速逆流色谱仪,以分配系数和分相时间为依据设计一组溶剂体系,初步确定适宜的溶剂体系;根据高速逆流色谱出峰数目及分离度确定较佳的溶剂体系和工作条件,并测定所收集峰的各组分的纯度。结果石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(
麻黄碱的提取分离方法
溶剂法:利用麻黄碱和伪麻黄碱既能溶于水，又能溶于亲脂性有机溶剂的性质，以及麻黄碱草酸盐比伪麻黄碱草酸盐在水中溶解度小的差异，使两者得以分离。方法为麻黄用水提取，水提取液碱化后用甲苯萃取，甲苯萃取液流经草酸溶液，由于麻黄碱草酸盐在水中溶解度较小而结晶析出，而伪麻黄碱草酸盐留在母液中。
薄层色谱分离法分离原理
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。
掌叶防己碱提取与分离及延胡索乙素制备——溶解度差异法
实验方法原理掌叶防己碱经氢化后即得镇痛镇静药物延胡索乙素(Tetray_x0002_dropalmatine), 而延胡索乙素在中药延胡索中含量很低 , 所以黄藤在工业生产中成为掌叶防己碱及延胡索乙素的主要原料。实验材料黄藤粗粉试剂、试剂盒醋酸氢氧化钠氯化钠乙醇盐酸氯化巴马汀锌粉浓硫酸蒸馏水氯仿刚果
机械法分离叶绿体
一、原理研磨叶片得到的匀浆，经过滤、离心可制备叶绿体。叶绿体的被膜比较脆弱，分离叶绿体应在等渗的缓冲溶液中，0~4℃温度下进行。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降，因此，分离工作尽可能在短时间内完成。二、仪器与用具冰箱；离心机；扭力天平；显微镜；pH计；研钵；量筒；移液管；离心管；脱脂纱布等。分
生物样品分离技术膜分离法
膜分离技术包括超滤、反渗析、电渗析、微孔过滤等。利用膜分离技术可将样品小分子化合物和大分子的蛋白质很好地分离。超滤是一种除去样品中蛋白质和其他大分子的方法,是能用分子分离的薄膜分离技术,依靠薄膜两侧压力差作为推动力来分离溶液中不同分子量的物质。与沉淀法相比,其优点是适用于小量样品,不用稀释样品也不用
分离核仁实验——高镁法分离核仁
实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液：0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4，pH 7.0蔗糖 A
碱法生产明胶的相关介绍
碱法制备明胶过程中，含胶原的原料首先经浸灰、水洗和除脂等方式进行预处理，原料预处理后脂肪的含量较低，主要成分是胶原蛋白，在石灰或氢氧化钠和一定温度条件下胶原蛋白逐步降解为分子量不均一的多肤混合物，多肤溶液经浓缩、除湿和干燥等一系列处理后得到固体粉末。就产品的收率、性质和纯度而言，碱法能够生产出高
碱片重量法(B)测定原理
碱片-重量法(B)测定原理碳酸钾溶液浸渍过的玻璃纤维滤膜曝露于空气中,与空气中的二氧化硫、硫酸雾、硫化氢等发生反应,生成硫酸盐。测定生成的硫酸盐含量,计算硫酸盐化速率。其结果以每日在100cm2碱片上所含二氧化硫毫克数表示。反应式如下: 2K2CO3+2SO2+O2—→2K2S04+2CO2方法检出
分离法之蒸馏
蒸馏利用液体混合物中各组分挥发性的不同，将它们分离的方法和过程，它可以将液体混合物中各组分部分地或全部地分离。除了简单的蒸馏技术外，还有分馏、减压蒸馏、共沸蒸馏、水汽蒸馏、萃取蒸馏、等温蒸馏和亚沸点蒸馏等。
薄层色谱分离法
（一）薄层色谱法的特点 设备简单，操作方便。只须一块玻璃板和一个层析缸。分析原理与经典柱上色谱相同、但是在敞开的薄层上可以检查混合物的成分是否分开可观察。快速，展开的时间短。比纸上色谱快速。一般纸上色谱需要几小时至几十小时薄层色谱一般只需十几分钟或几十分钟。使用无机吸附剂，薄层色谱可以采用腐
分离法之升华
升华固态物质不经液态直接转变成气态的现象，可作为一种应用固-气平衡进行分离的方法。可分为常压升华、真空升华和低温升华。
薄层色谱分离法
（一）薄层色谱法的特点 设备简单，操作方便。只须一块玻璃板和一个层析缸。分析原理与经典柱上色谱相同、但是在敞开的薄层上可以检查混合物的成分是否分开可观察。快速，展开的时间短。比纸上色谱快速。一般纸上色谱需要几小时至几十小时薄层色谱一般只需十几分钟或几十分钟。使用无机吸附剂，薄层色谱
SDS法分离植物DNA
实验概要Dellaporta，Wood 和 Hicks (1983) 法分离植物总基因组DNA，通过实验掌握SDS法从植物叶片提取DNA 的原理和方法。主要试剂提取缓冲液 [ 详细信息：100mM Tris.Cl,；50mM EDTA； 500mM Nacl；40mmol/L 巯基乙醇，随用随加。]
高速逆流色谱分离制备胡椒中的胡椒碱
摘 要：采用高速逆流色谱(high-speed countercurrent chromatography，HSCCC)法从胡椒中分离制备胡椒碱。HSCCC的溶剂系统条件为正己烷- 乙酸乙酯- 甲醇- 水(1:1:1:1，V/V)。从5g 粗提物中可一次分离得到纯度为98.72% 的胡椒碱单体1.5
粉防己生物碱的提取分离与鉴定
汉防己为防己科千金藤属物Stephania tetrandra S. Mcore的根，是祛风解热镇痛药物，其有效成分为生物碱。主要是汉防己甲素和汉防已乙素。临床上除用作治疗高血压、神经性疼痛、抗阿米巴原虫外，还将粉防已生物碱的碘甲基、或溴甲基化合物作为肌肉松弛剂应用，此外汉防已甲素在动物实验
麻黄碱和伪麻黄碱的毛细管电泳分离研究
目的 建立毛细管电泳分离麻黄碱与伪麻黄碱的方法。 方法 分别以甲基化-β-环糊精和羟丙基-β-环糊精为添加剂，采用毛细管电泳法分离麻黄碱和伪麻黄碱。考察添加剂的种类和浓度、缓冲溶液的浓度和pH值、运行电压、有机溶剂对麻黄碱和伪麻黄碱分离的影响。 结果 采用甲基化-β-环糊精和羟丙基-β
碱法提取胶原蛋白的方法介绍
碱法提取即利用一定浓度的碱在一定的外界条件下提取胶原蛋白，碱处理法中常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等，用氢氧化钠浸提时效果较好。一般的是把样品匀浆后，用碱溶液多次溶胀后，再离心提取。但由于易引起蛋白质变性，如胶原肽键水解，含羟基、疏基的氨基酸全部被破坏；所得产物等电点pH值较低，天冬酞胺和谷氨
碱酸法提纯石墨的方法介绍
碱酸法包括两个反应过程：碱熔过程和酸浸过程。碱熔过程是在高温条件下，利用熔融状态下的碱和石墨中酸性杂质发生化学反应，特别是含硅的杂质（如硅酸盐、硅铝酸盐、石英等），生成可溶性盐，再经洗涤去除杂质，使石墨纯度得以提高。酸浸过程的基本原理是利用酸和金属氧化物杂质反应，这部分杂质在碱熔过程中没有和碱发生反
碱片法的操作过程
具体过程是将超细玻璃纤维滤膜剪成直径为7cm的圆片,毛面向上,用移液管均匀滴加1mL30%的碳酸钾溶液,使溶液在滤膜上扩散直径为5cm,于60℃烘干。然后将其放入塑料皿用塑料垫圈压好装在塑料袋中携至采样现场放置采样。采样时间一般为1个月。采样完毕将碱片带回实验室用重量法测定碱片上硫酸根的量。测定结果
生物碱的鉴别——沉淀反应法
实验材料植物样品试剂、试剂盒碘-碘化钾碘化汞钾试剂碘化铋钾试剂硅钨酸试剂碳酸钠乙醚仪器、耗材分液漏斗烧杯玻璃棒旋涡振荡仪生物碱的鉴别1．检品溶液的制备：取粉碎的植物样品约2g，加蒸馏水20~30ml，并滴加数滴盐酸，使呈酸性。在60℃水浴上加热15分钟，过滤，滤液供作以下试验。2．生物碱类成分的鉴别
芦丁的提取及鉴定——碱酸法
实验材料芦丁试剂、试剂盒乙醇盐酸镁粉柠檬酸甲醇硫酸ZrOCl2石灰乳蒸馏水萘酚仪器、耗材pH计烧杯搅拌棒电子天平分液漏斗质谱仪器分光光度计滴管试管概述芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophorajap
水蒸汽蒸馏法提取麻黄碱
水蒸汽蒸馏法:麻黄碱和伪麻黄碱在游离状态时具有挥发性，可用水蒸汽蒸馏法从麻黄中提取。