关于红细胞裂解液的使用说明

一、组织细胞样品: 1.新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液; 2.从4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀; 3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液; 4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次; 5.如裂解不完全可重复步骤2和3; 6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。 二、血细胞: 1.新鲜抗凝血,离心弃去上清液; 2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入6-10ml裂解液),轻轻吹打混匀; 3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液; 4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次; ......阅读全文

关于红细胞裂解液的使用说明

  一、组织细胞样品:  1.新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液;  2.从4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀;  3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液;

红细胞裂解液(RBC-Lysis-Buffer,10×)使用说明

红细胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)简介在生物科研领域,经常需要去除红细胞。去除红细胞的方法有多种,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer

红细胞裂解液的作用原理

细胞裂解液一般都用的是含酶的,在血红细胞表面上有红细胞专属的表面抗原,当裂解液中含可以攻击特定红细胞表面抗原的酶的时候 就只会造成红细胞的变形,生物通道扩大,膨胀,裂解,或者引起红细胞的变性.而不会攻击其他细胞.另外红细胞有自己的电负性,渗透脆性(通常是一些非酶细胞裂解液的突破点) ,悬浮稳定性,这

红细胞裂解液的基本介绍

  红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或称 ACK Lysis Buffer)是一种去除红细胞最简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,它既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细

简述红细胞裂解液的作用原理

  氯化铵是红细胞裂解液的主要效应物质,氨根离子不能通过细胞膜,而其他离子可以通过,造成细胞内外的离子浓度差异,形成了渗透压差,外部的水分会扩散至细胞内,使红细胞膨胀,达到裂解的效果。

mRNA-在网织红细胞裂解液中的翻译

实验材料 家兔胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 I 型磷酸肌酸激酶试剂、试剂盒 乙酰苯肼溶液 A 溶液 B 灭菌重蒸水 CaCl2 EGTA 氯高铁血红素储存液 亚精胺 磷酸肌酸 氨基酸 DTT HEPES 水 KCl 乙酸镁 [35S] 甲硫氨酸.仪器、耗材 电泳装置干酪包布离心机实验步骤 一、材料与设

mRNA-在网织红细胞裂解液中的翻译

            实验材料 家兔 胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶   I 型磷酸肌酸激酶 试剂、试剂盒

增强型RIPA裂解液使用说明

对于细胞:注意:取适当量的裂解液,放与4℃预冷,使用前数分钟内需加入酶抑制剂。1.  贴壁细胞,细胞刮刮下细胞,计数,并收集5×106 个细胞,600g 离心5分钟,尽量吸尽上清,用预冷的PBS重悬细胞,600g 离心5分钟收集细胞,尽量吸尽上清,加入0.5ml的预冷的裂解液,用移液器吹打数

红细胞裂解液(RBC-Lysis-Buffer,10×)-操作步骤

、组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。 3、离心,弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述

4.1-mRNA-在网织红细胞裂解液中的翻译

从哺乳动物细胞中提取的 mRNA 或通过克隆化 DNA 在体外转录产生的 mRNA 在无细胞提取液中能被翻译而合成蛋白质,这些蛋白质可用于免疫沉淀试验或进行生物学活性测定。实验材料家兔胰核糖核酸酶小球菌核酸酶I 型磷酸肌酸激酶试剂、试剂盒乙酰苯肼溶液 A溶液 B灭菌重蒸水CaCl2EGTA氯高铁血红

急速裂解法去除红细胞

器材和试剂: 所有直接接触细胞的用品和试剂必须无菌。1. 标注体积刻度的试管(圆锥形底);2. 巴斯德吸管(短型和长型);3. 台式离心机;4. 培养级纯净水;5. 2×Hanks平衡盐溶液;6. 储存培养基,含10%血清;实验方法:1. 1000r/min离心原代细胞悬液5min,弃上清;2. 向

红细胞裂解的实验方法步骤

IntroductionPrior to using lymphoid tissue cell suspensions for flow cytometric analysis and/or for in vitro functional assays, it is recommended to r

Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)使用说明

1.对于培养细胞样品:a.融解Western及IP细胞裂解液(无抑制剂),混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当的上述蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。b.对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白

细胞裂解液的制备

一、试剂准备1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:      150 mM NaCL      1% NP-40 (去垢剂)          0.1% SDS (去垢剂)      2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)      2ug/ml Leupeptin (

网织红细胞裂解物的概念

中文名称网织红细胞裂解物英文名称reticulocyte lysate定  义用于测定信使核糖核酸(mRNA)活性的一种体外翻译分析系统。通常由药物致贫血而发育不完全的兔网织红细胞制备,但须用RNA酶去除其中内源的mRNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

制备细胞裂解液

实验流程:1. 收集胰蛋白酶消化的细胞并离心,用PBS清洗。2. 用100μl 裂解缓冲液冰浴溶解沉淀10min(每500000个细胞20μl裂解缓冲液)。3. 10000rpm,4°C离心10min,取上清转移至新管。4. 用考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度。5. 用裂解缓冲液将溶液浓度调到5mg/ml

红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞是存在于骨髓腔内具有很强增殖 能力及多向分化潜能的一类成体干细胞,在一定条件下其不仅可以分化为同源于中胚层的间质细胞,还可以诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、上皮样细胞、 心肌细胞、肝细胞等。近年来随着组织工程技术的快速发展,骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及其增殖特 性的相关研

细胞/组织裂解液的制备

溶液准备 2×样品缓冲液:130mM Tris-HCl ( pH8.0 ) , 20% ( v/v ) 甘油 , 4.6% ( w/v ) SDS , 0.02% 溴酚蓝 , 2%DTT PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4,1.8mM KH2PO4 ,50

细胞裂解液怎么配制

裂解细胞的话:新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:先配150 mM NaCL+ 1% NP-40 (去垢剂) + 0.1% SDS (去垢剂)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)或1 mM PMSF

什么是蛋白裂解液

RIPA裂解液。RIPA裂解液(英语:Radioimmunoprecipitation assay buffer,全称放射免疫沉淀法缓冲液)是一种用于裂解细胞或组织的裂解缓冲液,常用于放射性免疫沉淀分析(RIPA)。此缓冲液的变性性能比NP-40裂解液或曲拉通X-100裂解缓冲液更强,因为它包含离子

细胞培养为什么要先裂解红细胞

红细胞裂解液一、基本介绍红细胞裂解液是一种去除红细胞最简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,它 既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除 方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细 胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解

细胞裂解液各成分的作用

细胞裂解液各成分的作用:1、第一种50mmol/L Tris-HCl是缓冲液,保证细胞裂解时PH值也能稳定,Tris是一种有机碱。2、第二种1.0 mmol/L EDTA是一种金属螯合剂。3、第三种150 mmol/L NaCl是等渗体系电解质,用于协调细胞膜内外离子平衡。4、第四种0.1% SDS

细胞裂解液作为对照的原因

WCL的全称是whole cell lysate,中文就是全细胞裂解液对吧?如果是这样的话,这个部分的目的就是研究细胞里面你想要研究的蛋白表达情况.IP的就是你用抗体pull down以后得到的目的蛋白.我们做co-IP研究A和B蛋白相互作用的时候,一般会在细胞里面转染质粒,分别表达A和B蛋白.等蛋

核酸样品与裂解液的比例

核酸样品与裂解液的比例       核酸样品与裂解液的比例开始样品用多大,并没有具体的讲法。假如不是样品量有限,则以能抽提出满意数次成功实验所需的核酸量,作为表决样品开始量的基础,会比较合理的。 恒温培养箱      不要由于 1ml 裂解液可以抽提100mg 样品,就一定运用100mg 样品。裂解

关于裂解疫苗的概述

  裂解疫苗中含有数量极少的物质可以刺激免疫系统产生抗体和专门作用于特定的病毒或细菌的细胞。免疫系统储存这些信息,此时,在体内产生少量记忆B细胞。过后,甚至许多年以后,当接受过免疫的人暴露在细菌或病毒的时候,记忆B细胞会刺激免疫系细胞因子统释放大量的抗体,做出快速有效的免疫应答。

常见细胞裂解液及其组分

  在许多细胞内蛋白表达、纯化及蛋白-蛋白互作等免疫实验(如WB、IP、Co-IP、ChIP)中,细胞裂解是关键一步。 图片源自于网络 基本介绍   根据不同细胞类型、蛋白定位及下游应用,需要不同的细胞裂解液进行细

RNA提取裂解液有哪些

CTAB ,异硫氰酸胍

DNA提取前为什么要先进行红细胞裂解

血液基因组DNA提取前为什么要先进行红细胞裂解全血基因组DNA提取试剂盒作用原理:全血基因组DNA提取试剂盒特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料为新型材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。全血基因

关于裂解疫苗的分类介绍

  疫苗有两种基本类型:减毒活疫苗和灭活疫苗。活疫苗和灭活疫苗的特点是不同的,这些特点决定着使用疫苗的方式。   减毒活疫苗   减毒活疫苗是在实验室里通过改进(“野”)病毒或细菌而制备。所得到的疫苗株微生物保留了复制(生长)和引起免疫的能力,但通常不致病。减毒活疫苗包括活病毒疫苗和活细菌疫苗。

如何选择蛋白质裂解液?

   蛋白质裂解液的选择,除了要根据其“产量”,还要看所选择的一抗是否能识别经变性的蛋白质样品。一般来说对于不能识别变性的蛋白质样品的一抗,其蛋白质裂解液都会是不含去污剂或含有较温和的非离子去污剂的(如:NP-40,Triton X-100)。     蛋白质裂解液的配方有很多种,如何选择合