连接酶链反应的原理及应用介绍

1.定义:连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是一种新的DNA体外扩增和检测技术,主要用于点突变的研究及靶基因的扩增。2.LCR的基本原理:利用DNA连接酶.特异地将双链DNA 片段连接,经变性-退火-连接三步骤反复循环,从而使靶基因序列大量扩增。其程序为:在模DNA、DNA连接酶、寡核苷酸引物以及相应的反应条件下,首先加热至一定温度下(94——95℃)使DNA变性,双链打开,然后降温退火(65℃),引物与之互补的模板DNA结合并留下一缺口,如果与靶序列杂交的相邻的寡核苷酸引物与靶序列完全互补,DNA连接酶即可连接封闭这一缺口,则LCR反应的三步骤(变性-退火-连接)就能反复进行,每次连接反应的产物又可在下一轮反应中作模板,使更多的寡核苷酸被连接与扩增。若连接处的靶序列有点突变,引物不能与靶序列精确结合,缺口附近核苷酸的空间结构发生变化,连接反应不能进行,也就不能形成连接产物。3.应用范围:主要用......阅读全文

连接酶链反应的原理及应用介绍

1.定义:连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是一种新的DNA体外扩增和检测技术,主要用于点突变的研究及靶基因的扩增。2.LCR的基本原理:利用DNA连接酶.特异地将双链DNA 片段连接,经变性-退火-连接三步骤反复循环,从而使靶基因序列大量扩增。其程序为:在模DNA

连接酶链反应的原理

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是在连接酶扩增反应或连接酶检测反应的基础上,引入热稳定的连接酶而建立的类似PCR 技术的新方法。LCR 既可扩增,又可鉴定D N A 异常,与PCR 技术一样可用于已知病因的遗传病大面积普查。

连接酶链反应的基本原理介绍

  连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是在连接酶扩增反应或连接酶检测反应的基础上,引入热稳定的连接酶而建立的类似PCR 技术的新方法。LCR 既可扩增,又可鉴定D N A 异常,与PCR 技术一样可用于已知病因的遗传病大面积普查。  LCR ,即在D N A 连接酶

连接酶链反应的特点和应用

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是在连接酶扩增反应或连接酶检测反应的基础上,引入热稳定的连接酶而建立的类似PCR 技术的新方法。LCR 既可扩增,又可鉴定D N A 异常,与PCR 技术一样可用于已知病因的遗传病大面积普查。

连接酶链反应的特点和应用

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是在连接酶扩增反应或连接酶检测反应的基础上,引入热稳定的连接酶而建立的类似PCR 技术的新方法。LCR 既可扩增,又可鉴定D N A 异常,与PCR 技术一样可用于已知病因的遗传病大面积普查。

连接酶链反应的基本原理

LCR ,即在D N A 连接酶的作用下,通过连接与模板D N A互补的两个相邻寡核苷酸链,快速进行D N A 片段扩增。D N A连接酶可将与模板D N A 链互补的两条毗邻寡核苷酸片段连接起来,两条寡核苷酸链接头处存在碱基错配则阻止连接反应的发生。所以通过连接酶反应,可明确区分寡聚核苷酸是否与模

连接酶链反应的基本原理

LCR ,即在D N A 连接酶的作用下,通过连接与模板D N A互补的两个相邻寡核苷酸链,快速进行D N A 片段扩增。D N A连接酶可将与模板D N A 链互补的两条毗邻寡核苷酸片段连接起来,两条寡核苷酸链接头处存在碱基错配则阻止连接反应的发生。所以通过连接酶反应,可明确区分寡聚核苷酸是否与模

连接酶链反应的基本原理

LCR ,即在D N A 连接酶的作用下,通过连接与模板D N A互补的两个相邻寡核苷酸链,快速进行D N A 片段扩增。D N A连接酶可将与模板D N A 链互补的两条毗邻寡核苷酸片段连接起来,两条寡核苷酸链接头处存在碱基错配则阻止连接反应的发生。所以通过连接酶反应,可明确区分寡聚核苷酸是否与模

连接酶链反应的基本概念和应用

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是在连接酶扩增反应或连接酶检测反应的基础上,引入热稳定的连接酶而建立的类似PCR 技术的新方法。LCR 既可扩增,又可鉴定D N A 异常,与PCR 技术一样可用于已知病因的遗传病大面积普查。

何谓连接酶链反应?

连接酶链反应(ligase chain reaction, LCR)属于一种探针扩增技术,是依赖靶核苷酸序列的寡核苷酸探针的连接技术。这种方法应用4种寡核苷酸探针(即两对互补的引物),当它们在体外结合到靶序列上以后,用耐热DNA连接酶将它们连接起来。两条探针被连接上以后又可以作为新的模板。由于使

核酸扩增—连接酶链反应

  LCR由基因扩增技术和连接酶方法结合而成,是继PCR之后的快速DNA扩增方法。与PCR不同的是,LCR采用2对寡核苷酸探针,每对寡核苷酸探针与变性正负靶链杂交时处于相邻的位置,两者之间形成一个缺口,只有当它们与靶DNA碱基配对且3'与5'端相邻位置均正确时,DNA连接酶才能将其连

关于连接酶链反应的发展过程介绍

  连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是Backman1997年为检出靶基因序列中的点突变而设计发明,并申报了ZL.1988年Landegren也进行了该项研究。1988年Backman等又因分离热稳定的连接酶,而申报ZL,1991年Backman和Barany分别

连接酶链反应的发展过程

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是Backman1997年为检出靶基因序列中的点突变而设计发明,并申报了ZL.1988年Landegren也进行了该项研究。1988年Backman等又因分离热稳定的连接酶,而申报ZL,1991年Backman和Barany分别用耐

连接酶链反应的研究与发展

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是Backman1997年为检出靶基因序列中的点突变而设计发明,并申报了ZL.1988年Landegren也进行了该项研究。1988年Backman等又因分离热稳定的连接酶,而申报ZL,1991年Backman和Barany分别用耐

连接酶链反应技术的研究与发展

连接酶链反应(Ligase chain reaction,LCR),是Backman1997年为检出靶基因序列中的点突变而设计发明,并申报了ZL.1988年Landegren也进行了该项研究。1988年Backman等又因分离热稳定的连接酶,而申报ZL,1991年Backman和Barany分别用耐

Alu聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称Alu聚合酶链反应英文名称Alu-PCR定  义从复杂来源样品中特异扩增人基因组DNA的方法。Alu是人基因组中特有的高度重复序列,散布于整个人的基因组中。设计能识别Alu保守区序列的聚合酶链反应引物,就能特异地扩增获得人基因组DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二

原位聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称原位聚合酶链反应英文名称in situ PCR定  义在DNA模板分子原来所在的位置处(如细胞、组织中)进行聚合酶链反应的技术。能够直接指示出DNA模板的部位。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

阻抑聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称阻抑聚合酶链反应英文名称suppression PCR定  义抑制非特异扩增、而选择性扩增那些只知道部分序列目的DNA的一种聚合酶链反应方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接头,设计引物一个与人工接头互补,另一个与目的DNA互补,非特异PCR产物由于两端有颠倒重复序列,退火时会自身形成环

阻抑聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称阻抑聚合酶链反应英文名称suppression PCR定  义抑制非特异扩增、而选择性扩增那些只知道部分序列目的DNA的一种聚合酶链反应方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接头,设计引物一个与人工接头互补,另一个与目的DNA互补,非特异PCR产物由于两端有颠倒重复序列,退火时会自身形成环

竞争聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称竞争聚合酶链反应英文名称competitive PCR;cPCR定  义在反应体系中加入已知含量的内参照竞争模板,该模板与待测模板可以等效扩增,扩增过程中或扩增结束后,可用某些手段区分和定量待测物和竞争物的扩增产物,比较两者的量即可知待测模板含量的一种定量聚合酶链反应技术。应用学科生物化学与

差示聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称差示聚合酶链反应英文名称differential display PCR定  义利用组织细胞间基因表达的差异并结合聚合酶链反应技术来筛选和克隆新基因的方法。即先主观设定一对引物(称武断引物),提取两种或多种待比较细胞的mRNA,用3′端武断引物逆转录成cDNA,再PCR扩增,产物用凝胶电泳显

锚定聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称锚定聚合酶链反应英文名称anchored PCR定  义在目的核酸片段一端人工加上确定的序列,以便用与所加序列互补的引物作扩增的聚合酶链反应方法。常用于对目的核酸片段序列本身或旁侧序列不清楚时的扩增。如通过DNA末端转移酶在未知序列DNA的3′端加上多(dG)尾,用含多(dC)的锚定引物对此

平衡聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称平衡聚合酶链反应英文名称balanced PCR定  义为克服在扩增时发生非线性差异而设计的一种聚合酶链反应技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

巢式聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称巢式聚合酶链反应英文名称nested PCR定  义由两次相继进行的聚合酶链反应组成的一种PCR技术,其中第二次PCR是在第一次PCR反应产物序列范围内进行扩增的,借以提高PCR的成功率和分析的特异性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

易错聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称易错聚合酶链反应英文名称error-prone PCR定  义应用低保真度DNA聚合酶,并选择适当的反应条件,提高PCR反应中的碱基错配率,由此得到含有随机突变的PCR产物,可以克隆入表达载体,构建随机突变的DNA文库的一种使DNA随机突变的技术。能用于体外分子定向进化、基因或DNA序列功能

连接介导聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称连接介导聚合酶链反应英文名称ligationmediated PCR定  义由于样品中核酸含量低或序列不完全清楚,难以分析或使用,因而在样品序列末端连接上已知序列,使用与此已知序列互补的引物专一性地扩增目的DNA片段的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

多重聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称多重聚合酶链反应英文名称multiplex PCR定  义在同一聚合酶链反应的反应管中加入多对引物,扩增同一模板的几个不同的区域的方法。常用于检测很长的特定序列(如人类肌养蛋白基因、视网膜母细胞瘤基因等)的缺失突变等变化。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

聚合酶链反应原理介绍

  PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、 低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最

聚合酶链反应剪接的原理和应用

中文名称聚合酶链反应剪接英文名称PCR splicing定  义利用聚合酶链反应进行基因剪接以删除DNA中一段特定序列的方法。系设计两组引物,先分别扩增拟删除序列上下游两侧的序列,再用上游序列5′端引物和下游序列3′端引物用PCR反应进行连接。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二

半巢式聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称半巢式聚合酶链反应英文名称semi-nested PCR;hemi-nested PCR定  义第二次PCR反应的引物只有一个,另一个是用第一次PCR反应的一个引物的一种PCR技术。此法是在无法获得理想的第二次引物时采用。对提高灵敏度和特异性仍有助益。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科)