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不对称聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称不对称聚合酶链反应英文名称asymmetric PCR定 义引物用量不对称的聚合酶链反应。这两个引物分别称为非限制与限制性引物,反应中当低浓度的限制性引物消耗完后,高浓度的非限制性引物就引导产生大量的单链DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

不对称聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称不对称聚合酶链反应英文名称asymmetric PCR定  义引物用量不对称的聚合酶链反应。这两个引物分别称为非限制与限制性引物,反应中当低浓度的限制性引物消耗完后,高浓度的非限制性引物就引导产生大量的单链DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

竞争聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称竞争聚合酶链反应英文名称competitive PCR;cPCR定  义在反应体系中加入已知含量的内参照竞争模板,该模板与待测模板可以等效扩增,扩增过程中或扩增结束后,可用某些手段区分和定量待测物和竞争物的扩增产物,比较两者的量即可知待测模板含量的一种定量聚合酶链反应技术。应用学科生物化学与

阻抑聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称阻抑聚合酶链反应英文名称suppression PCR定  义抑制非特异扩增、而选择性扩增那些只知道部分序列目的DNA的一种聚合酶链反应方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接头,设计引物一个与人工接头互补,另一个与目的DNA互补,非特异PCR产物由于两端有颠倒重复序列,退火时会自身形成环

阻抑聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称阻抑聚合酶链反应英文名称suppression PCR定  义抑制非特异扩增、而选择性扩增那些只知道部分序列目的DNA的一种聚合酶链反应方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接头,设计引物一个与人工接头互补,另一个与目的DNA互补,非特异PCR产物由于两端有颠倒重复序列,退火时会自身形成环

原位聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称原位聚合酶链反应英文名称in situ PCR定  义在DNA模板分子原来所在的位置处(如细胞、组织中)进行聚合酶链反应的技术。能够直接指示出DNA模板的部位。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

Alu聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称Alu聚合酶链反应英文名称Alu-PCR定  义从复杂来源样品中特异扩增人基因组DNA的方法。Alu是人基因组中特有的高度重复序列,散布于整个人的基因组中。设计能识别Alu保守区序列的聚合酶链反应引物,就能特异地扩增获得人基因组DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二

易错聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称易错聚合酶链反应英文名称error-prone PCR定  义应用低保真度DNA聚合酶,并选择适当的反应条件,提高PCR反应中的碱基错配率,由此得到含有随机突变的PCR产物,可以克隆入表达载体,构建随机突变的DNA文库的一种使DNA随机突变的技术。能用于体外分子定向进化、基因或DNA序列功能

巢式聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称巢式聚合酶链反应英文名称nested PCR定  义由两次相继进行的聚合酶链反应组成的一种PCR技术,其中第二次PCR是在第一次PCR反应产物序列范围内进行扩增的,借以提高PCR的成功率和分析的特异性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

差示聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称差示聚合酶链反应英文名称differential display PCR定  义利用组织细胞间基因表达的差异并结合聚合酶链反应技术来筛选和克隆新基因的方法。即先主观设定一对引物(称武断引物),提取两种或多种待比较细胞的mRNA,用3′端武断引物逆转录成cDNA,再PCR扩增,产物用凝胶电泳显

平衡聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称平衡聚合酶链反应英文名称balanced PCR定  义为克服在扩增时发生非线性差异而设计的一种聚合酶链反应技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

锚定聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称锚定聚合酶链反应英文名称anchored PCR定  义在目的核酸片段一端人工加上确定的序列,以便用与所加序列互补的引物作扩增的聚合酶链反应方法。常用于对目的核酸片段序列本身或旁侧序列不清楚时的扩增。如通过DNA末端转移酶在未知序列DNA的3′端加上多(dG)尾,用含多(dC)的锚定引物对此

多重聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称多重聚合酶链反应英文名称multiplex PCR定  义在同一聚合酶链反应的反应管中加入多对引物,扩增同一模板的几个不同的区域的方法。常用于检测很长的特定序列(如人类肌养蛋白基因、视网膜母细胞瘤基因等)的缺失突变等变化。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

连接介导聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称连接介导聚合酶链反应英文名称ligationmediated PCR定  义由于样品中核酸含量低或序列不完全清楚,难以分析或使用,因而在样品序列末端连接上已知序列,使用与此已知序列互补的引物专一性地扩增目的DNA片段的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

连接锚定聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称连接锚定聚合酶链反应英文名称ligationanchored PCR定  义对未知DNA序列的一种扩增技术。在未知序列末端连接已知的序列或添加同聚物尾序列(即锚序列),在与锚序列互补的引物(锚引物)和基因另一侧特异性引物的作用下,将未知序列扩增出来。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),

半巢式聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称半巢式聚合酶链反应英文名称semi-nested PCR;hemi-nested PCR定  义第二次PCR反应的引物只有一个,另一个是用第一次PCR反应的一个引物的一种PCR技术。此法是在无法获得理想的第二次引物时采用。对提高灵敏度和特异性仍有助益。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科)

逆转录聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称逆转录聚合酶链反应英文名称reverse transcription PCR;RT-PCR定  义先将RNA通过逆转录酶的作用合成与之互补的DNA链,再以该链作模板进行聚合酶链反应扩增特定RNA序列的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

聚合酶链反应的常规应用介绍

用于治疗感染性疾病,肿瘤及遗传病。感染性疾病PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。理论上,只要样本有一个病原体存在,PCR就可以检测到。一般实验室也能检出10~100基因拷贝,而目前病原体抗原检测方法一般需要105-7个病原体才可检测到。PCR对病原体的检测解决了免疫学检测的

甲基化特异性聚合酶链反应的方法及应用介绍

中文名称甲基化特异性聚合酶链反应英文名称methylation specific PCR定  义一种简单快速测定突变热点二核苷酸“CpG岛”甲基化状态的方法。待测的DNA片段以重亚硫酸钠修饰,分别用专对甲基化和非甲基化DNA的两套引物进行PCR扩增,即可得到DNA是否甲基化的信息。可用于肿瘤、基因印

聚合酶链反应技术的临床应用及现状

PCR是英文Polymerase chain reaction的缩写,翻译过来,称为聚合酶链反应。PCR自1983年由美国加利福尼亚的Cetus公司的Mullis博士发明到现在,虽只短短的二十多年,但其在生命科学研究和临床分子诊断中,已毫无争议的成为“支点”工具。如果没有PCR,人类基因组计

基因诊断的聚合酶链反应方法介绍

  21世纪,基因分析和基因工程技术有了革命性的突破,这主要归功于聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)的发展和应用。应用PCR技术可以使特定的基因或DNA片段在短短的2-3小时内体外扩增数十万至百万倍。扩增的片段可以直接通过电泳观察,也可用于进一步的分析。这样,

定量聚合酶链反应的应用特点

中文名称定量聚合酶链反应英文名称quantitative PCR;qPCR定  义将某种已知含量的DNA模板作为内标准进行PCR反应,对待测模板进行定量分析的方法。更灵敏的定量PCR是采用实时PCR方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

聚合酶链反应原理介绍

  PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、 低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最

临床化学检查方法介绍--聚合酶链反应技术介绍

聚合酶链反应技术介绍:  聚合酶链反应技术诊断幽门螺旋杆菌是否存在仅需微量的DNA,而不需要活菌存在(这不同于其他幽门螺旋杆菌检测方法),它不仅可以检测胃内幽门螺旋杆菌,还可望检出胃以外部位,如牙斑、粪便内的幽门螺旋杆菌,还可用于流行病学调查,它的敏感性远远超过了其他方法,有利于确定细菌感染的来源及

聚合酶链反应剪接的原理和应用

中文名称聚合酶链反应剪接英文名称PCR splicing定  义利用聚合酶链反应进行基因剪接以删除DNA中一段特定序列的方法。系设计两组引物,先分别扩增拟删除序列上下游两侧的序列,再用上游序列5′端引物和下游序列3′端引物用PCR反应进行连接。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二

聚合酶链反应的循环参数介绍

预变性模板DNA完全变性与PCR酶的完全激活对PCR能否成功至关重要,建议加热时间参考试剂说明书,一般未修饰的Taq酶激活时间为两分钟。 [5] 变性步骤循环中一般95℃,30秒足以使各种靶DNA序列完全变性,可能的情况下可缩短该步骤时间。变性时间过长损害酶活性,过短靶序列变性不彻底,易造成扩增失败

关于聚合酶链反应模板的介绍

  单、双链DNA或RNA都可以作为PCR的样品。若起始材料是RNA,须先通过逆转录得到第一条cDNA。虽然PCR可以仅用极微量的样品,甚至是来自单一细胞的DNA,但为了保证反应的特异性,还应用ng级的克隆DNA,μg水平的单拷贝染色体DNA或104拷贝的待扩增片段作为起始材料,模板可以是粗品,但不

逆转录聚合酶链反应的技术应用

RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。

随机聚合酶链反应的原理和应用特点

中文名称随机聚合酶链反应英文名称random PCR定  义采用许多序列不相同的(部分随机或全部随机序列)、短的(约10个核苷酸)引物所进行的聚合酶链反应。由于在模板DNA多个不同位置上扩增,所形成的产物长度各异,电泳图谱独特,可用于识别核酸的多态性、研究基因组的物理图谱及分析生物的进化等。应用学科

实时聚合酶链反应的原理和应用特点

中文名称实时聚合酶链反应英文名称real-time PCR定  义一种定量测定样品中特定DNA序列的聚合酶链反应。即使用标记(最常用是荧光标记)的PCR引物,因而能够通过荧光监测到每一次PCR循环后扩增所得DNA产物的量,从连续监控下获得的反应动力学曲线,可推导得样品中被扩增模板DNA的原初含量。应

反向聚合酶链反应的原理和应用特点

中文名称反向聚合酶链反应英文名称inverse PCR;iPCR定  义用于扩增已知序列的DNA旁侧未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上没有识别位点的限制内切酶,切出包含已知DNA、而两端带有未知序列的区段,将切出的DNA区段环化,然后再按已知的DNA序列设计一对引物进行扩增。应用学科细胞生物学