PCR反应阴性对照也出现明显扩增的原因
反应体系组分（如，水）被污染：实验过程中，更换新的Mix或者水重复实验；标本间的交叉污染或产物污染：反应体系在超净工作台内配制，对实验室进行严格的区分，减少气溶胶污染；使用带滤芯的枪头；引物二聚体的出现：一般在35循环以后阴性对照出现扩增属正常情况，可配合熔解曲线，PCR产物的琼脂糖电泳结果进行分析。......阅读全文
PCR应用中存在的问题
肖生祥 （西安医科大学第二临床医学院皮肤科，710004） 开展 PCR 应具有一定的条件。需要一个正规的 pCR 实验室，采集标本、核酸提取、扩增及产物分析应在不同的房间进行；需有严密的防污染措施、假阳性和假阴性结果的质控等。实验者应具有一定的分子生物学理论知识及实验技能，能够及时发现和
PCR应用中存在的问题
开展 PCR 应具有一定的条件。需要一个正规的 pCR 实验室，采集标本、核酸提取、扩增及产物分析应在不同的房间进行；需有严密的防污染措施、假阳性和假阴性结果的质控等。实验者应具有一定的分子生物学理论知识及实验技能，能够及时发现和纠正实验中的问题。目前，我国在 PCR 应用中尤其是在临床诊断
PCR应用中存在的问题
开展 PCR 应具有一定的条件。需要一个正规的 pCR 实验室，采集标本、核酸提取、扩增及产物分析应在不同的房间进行；需有严密的防污染措施、假阳性和假阴性结果的质控等。实验者应具有一定的分子生物学理论知识及实验技能，能够及时发现和纠正实验中的问题。目前，我国在 PCR 应用中尤其是在临床诊断
PCR应用中存在的问题
开展 PCR 应具有一定的条件。需要一个正规的 pCR 实验室，采集标本、核酸提取、扩增及产物分析应在不同的房间进行;需有严密的防污染措施、假阳性和假阴性结果的质控等。实验者应具有一定的分子生物学理论知识及实验技能，能够及时发现和纠正实验中的问题。目前，我国在 PCR 应用中尤其是在临床诊断
基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因
可能有很多原因，最常见的原因是1.模板不干净，2.引物设计不当，3.退火温度过高，等等
PCR仪温控性能及常见问题分析
PCR 技术自发明以来已经三十多年，一直广泛应用于分子生物学的各个领域，普通定性PCR在基础研究中仍旧是不可或缺的环节。今天小宝来聊一聊定性PCR仪zui为实验人员关注的温控性能和常见问题。一、PCR仪温控性能解读-----------------------------------------
PCR仪温控性能及常见问题分析
PCR 技术自发明以来已经三十多年，一直广泛应用于分子生物学的各个领域，普通定性PCR在基础研究中仍旧是不可或缺的环节。今天小宝来聊一聊定性PCR仪zui为实验人员关注的温控性能和常见问题。一、PCR仪温控性能解读------------------------------------------
PCR仪温控性能及常见问题分析
PCR 技术自发明以来已经三十多年，一直广泛应用于分子生物学的各个领域，普通定性PCR在基础研究中仍旧是不可或缺的环节。今天小宝来聊一聊定性PCR仪zui为实验人员关注的温控性能和常见问题。一、PCR仪温控性能解读------------------------------------------
PCR仪PCR注意事项及解决方案
1、PCR 污染PCR 技术的敏感性极高，极微量的污染即可导致假阳性的产生，因此，了解 PCR 污染的原因，采取相应的措施预防和消除 PCR 污染就十分重要。PCR 污染主要是随机污染，包括 PCR 反应前污染及反应后污染。（1）PCR 反应前污染主要是样品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的
PCR技术应用的注意事项及解决方案
1、PCR 污染PCR 技术的敏感性极高,极微量的污染即可导致假阳性的产生,因此,了解 PCR 污染的原因,采取相应的措施预防和消除 PCR 污染就十分重要。PCR 污染主要是随机污染,包括 PCR 反应前污染及反应后污染。(1)PCR 反应前污染主要是样品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的
PCR注意事项及解决方案
PCR 技术的敏感性极高，极微量的污染即可导致假阳性的产生，因此，了解 PCR 污染的原因，采取相应的措施预防和消除 PCR 污染就十分重要。PCR 污染主要是随机污染，包括 PCR 反应前污染及反应后污染。（1）PCR 反应前污染主要是样品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的仪器上残留的杂质
PCR检测方法（一）
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因一、标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致
PCR检测的质量控制
随着兽医防疫工作重要性的逐步提高，PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可，已经从实验室研究走进了临床应用阶段。如何提高PCR检测质量，已成为实验室技术人员不可回避的一个问题，它直接影响实验室检测结果的可信度和兽医防疫工作质量。PCR检测质量的控制是一个系统工程，总体上涉及三个方面：一是试验仪器；二
PCR异常曲线解析
在PCR实验过程中，我们经常会遇到各种奇特的扩增曲线，如何正确解读这些曲线并且做出恰当的解决方案是我们一线实验者需要练就的基本功。今儿，小编将多年累积的功力编成“武功秘籍”奉上，助你PK掉那些令人犯晕的异常曲线。异常曲线1：PCR扩增抑制原因分析：H07存在扩增抑制解决方案：将样本稀释后进行扩增（抑
液相对照品出现杂质峰原因是什么
可能有的原因：柱子没清洗好，甲醇，流动相都得冲，流动相有杂质，流动相的成分是否有没经过滤的，或是没过滤好的3、分析仪，检测器的问题，可以换柱子测试下还有，出的峰不规则，是单纯的有杂峰，还是峰形也不好，峰形不好的话，试着调慢流动相流速，延长出峰时间，使杂峰分离出来。
液相对照品出现杂质峰原因是什么
可能有的原因：柱子没清洗好，甲醇，流动相都得冲，流动相有杂质，流动相的成分是否有没经过滤的，或是没过滤好的3、分析仪，检测器的问题，可以换柱子测试下还有，出的峰不规则，是单纯的有杂峰，还是峰形也不好，峰形不好的话，试着调慢流动相流速，延长出峰时间，使杂峰分离出来。
PCR的污染与对策
一、污染原因 （一）标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染. （二）P
尿液分析仪检测出现假阴性的原因分析
假阴性 。即镜检阳性，尿液分析仪潜血反应阴性，其常见原因有： （1）食物或药物的影响：由于饮食或药物使尿液呈碱性时，RBC溶解破裂，形成褐色颗粒，潜血反应呈阳性，而镜检呈阴性。 （2）VitC 尿液中大量存在时，能竞争性夺取反应产生的氧，引起假阴性反应。 （3）高比重、高蛋白尿样降低了试剂
PCR检测质量的控制方法及影响因素分析
PCR检测质量的控制是一个系统工程，总体上涉及三个方面：一是试验仪器；二是试验试剂与耗材；三是人员操作。任何一个方面出现问题，都会影响PCR检测质量。 一、试验仪器 PCR仪和紫外凝胶成像系统（紫外分析仪或手提紫外等）以及移液器都可能影响PCR检测的质量。PCR仪是控制PCR反应温度变化的，
怎么防止PCR实验室污染
PCR实验室污染标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。PCR试剂的污染：主要是由于
PCR实验室如何避免污染？
PCR实验室污染 标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。 P
PCR反应体系和条件(六)
PCR污染与对策 PCR反应的zui大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸
PCR技术（四）：PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由
PCR反应体系与反应条件－高速冷冻离心机
PCR反应体系与反应条件 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug
PCR反应体系与反应条件2－冷冻离心机
PCR反应体系与反应条件 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq
PCR反应体系与反应条件－高速冷冻离心机
PCR反应体系与反应条件 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u
PCR反应体系与反应条件2－冷冻离心机
PCR反应体系与反应条件 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u M
PCR扩增带异常的原因及解决方案
使用PCR时，最常碰到的问题就是会出现扩增带有异。借此机会，我们与大家探讨一下PCR扩增条带有异时的原因及解决方案。 假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备；②引物的质量与特异性；③酶的质量；④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①模板中含有杂蛋白
荧光定量PCR扩增曲线形状异常的原因
A.扩增效率过高 出现非特异扩增或引物二聚体：反应体系内模板浓度太高以及模板核酸质量较差，可能导致出现抑制PCR反应的现象。在绝对定量时表现扩增效率大于110%。 解决方案：去除模板浓度最高的反应孔并重新分析标准曲线；对目的基因做标准曲线，一般用质粒做梯度稀释，或用PCR产物做梯度稀释，
PCR无扩增产物的原因及处理办法
原因： 1、模板:含有抑制物，含量低 2、Buffer对样品不合适 3、引物设计不当或者发生降解 4、反应条件：退火温度太高，延伸时间太短对策： 1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2、更换Buffer或调整浓度 3、重新设计引物（避免