TUNEL检测的基本原理介绍
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。......阅读全文
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
原理 在细胞凋亡的过程中,基因组DNA会断裂产生双链、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段,这些DNA链的缺口可以利用没标记法来识别。试剂盒就是通过催化DNA断端,来标记缺口。酶底物显色后,可以光镜检查被染色的细胞。
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。本试剂盒采用TUNEL法,应用高活性的基因重组末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡细胞断裂的DNA 3’-
Detection-by-TUNEL-labeling
In Situ Cell Death (Apoptosis) Detection by TUNEL labelingby Boehringer Mannheim (Catalog No. 1684809), modified by Josiah N. Wilcox,José C. Rodriguez
TUNEL分析实验
组织切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式细胞计量术分析 贴壁细胞的 TUNEL 染色 实验材料 组织
TUNEL分析实验
组织切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式细胞计量术分析 贴壁细胞的 TUNEL 染色 实验材料 组织
TUNEL分析实验——TUNEL-染色的流式细胞计量术分析
实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒PBS甲醛柠檬酸钠溶液仪器、耗材流式细胞计量仪实验步骤1. 凋亡诱导之后,200 g 离心 5 分钟收集 1X106 悬浮细胞,用冷的 PBS 洗 2 次,重复离心。2. 用 2 ml 2% 的甲醛 PBS 溶液固定细胞沉淀,室温下在水平摇床上孵育 30 分钟。3. 20
关于抗体检测的基本原理介绍
特异性抗体检测的目的首先是协助临床诊断,在某些疾病中亦是观察疗效及预后的一个指标,预防接种效果的观察,以及传染病流行病学调查中,特异性抗体的检测也具有特殊的、重要的意义。 在免疫应答中,细胞免疫和体液免疫是两个密切相关、互为调节的生理过程,对这两种免疫反应都有许多检测方法,但迄今为止,在临床检
关于电阻检测法的基本原理介绍
电阻检测法的基本原理是:在待测液体中置一微孔,在微孔的两端各加一定电压的电极,当液体中的颗粒巾进经过微孔时,电极间的电阻就会产生训瞬间的变化,以因而产生电脉冲,对这种电脉冲进行计数就可得到颗粒的数量,脉冲幅度的大小表示颗粒的体积的大小,经过对各种细胞所产生脉冲的大小的电子的选者择,可以区分出不同
TUNEL-PROCEDURE-IN-BOVINE-EMBRYOS
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go high
TUNEL-PROCEDURE-IN-BOVINE-EMBRYOS
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go high
2-TdT原位凋亡检测(TUNEL法)试剂盒说明
DNA断裂是细胞凋亡的重要特征,在凋亡初期,DNA可断裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段;晚期则可进一步在核小体间断裂,形成180-200bp的DNA断裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUT
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和经验总结
一、TUNEL法的实验原理细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱
Apoptosis-TUNEL-Assay-(frozen-sections)
Protocol for Frozen Sections:Warm 150ml 4% Paraformaldehyde/1x PBS to RT. Fix slides in it, 20 min., RT.1x PBS rinse, 2 times.1x PBS, 30 min., RT. Beg
Apoptosis-TUNEL-assay-(Paraffin-Sections)
Protocol for Paraffin Sections:Dewax paraffin sections:Incubate slides, 55°C, 30 min.Xylenes, 2 times, 2 min. each100% EtOH, 2 times, 2 min. each95% E
tunel和dapi双染的意义
为维持内环境稳定,能够与DNA强力结合的荧光染料。1、细胞凋亡是指为维持内环境稳定,生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下,其死亡途径被激活,并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。2、DAPI,即4',6-二脒基-2-苯基吲哚,是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测
凋亡聚焦:选择合适的TUNEL分析
考虑检测方法 TUNEL分析一般采用显色法或荧光检测法。每一种都有其各自的优缺点,因此选择哪一种取决于您的需求。荧光检测感更为灵敏,但难以保留信号。由于成像时的光漂白,且随着时间的流逝,荧光信号会逐渐丧失。荧光信号也会有更高的背景问题,这要取决于组织类型。显色分析适用于组织切片,因为可以使
TUNEL检测出现非特异性荧光标记的原因
a. 有些细胞或组织,例如平滑肌细胞或组织,nuclease或polymerase的酶活性水平较高,易导致出现非特异性的荧光标记。解决方法是,取细胞或组织后立即固定并且要充分固定,以阻止这些酶导致假阳性。b. 使用了不适当的固定液,例如一些酸性固定液,导致出现假阳性。建议采用推荐的固定液。c. TU
农药残留快速检测仪的基本原理介绍
农药残留快速检测仪是根据国标GB/T5009.199-2003,采用酶抑制原理和光电比色法原理研制而成。 在一定条件下,有机磷和氨基甲酸类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。 正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应;
关于气体检测仪的基本原理介绍
以常见的红外线气体检测仪为例,说明气体检测仪的原理: 测量这种吸收光谱可判别出气体的种类;测量吸收强度可确定被测气体的浓度。红外线检测仪的使用范围宽,不仅可分析气体成分,也可分析溶液成分,且灵敏度较高,反应迅速,能在线连续指示,也可组成调节系统。工业上常用的红外线气体检测仪的检测部分由两个并列
关于抗SSB抗体检测的基本原理介绍
直接对抗RNA~多聚酶Ⅲ附属蛋白的抗体称抗SSB,是抗可提取性核抗原(ENA)的一个成分。检测方法:①免疫沉淀法,抗原为胸腺提取物;②免疫印迹法,测定在相对分子质量为48000的段;③ELISA法:抗原为亲和层析法提取的抗原或基因工程产的抗原。
基因检测的基本原理
由于DNA中的核苷酸依其碱基不同,共分四种(Adenine、Thymine、Cytonine、Guanine:A、T、C、G),而基因为三个核苷酸排列成一组基因组(又称密码组),依据不同的排列组合,经转录成RNA(其中T会被Uracil : U取代)后可产生具不同意义的生物功能,如起始密码(AUG和
Whole-mount-TUNEL-analysis-of-Xenopus-embryos
Fixation and pretreatmentDejelly albino embryos carefully in 2% Cystein (pH 7.8).Remove the vitellin membrane with two pairs of tweezers (or c
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的(1)石蜡包埋的组织切片预处理:将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95%和75%乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液(20ug/ml),于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的(1)石蜡包埋的组织切片预处理:将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95%和75%乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液(20ug/ml),于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的(1)石蜡包埋的组织切片预处理:将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95%和75%乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液(20ug/ml),于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
农药残留检测的基本原理
农药残留对于人类的身体危害是极大的,科学家费尽心思演技更加精确的农药残留检测仪器,旨在能够更加准确的检测蔬菜、食品等物品中的农药残留量,为建立纯净的生态环境做出贡献,以下是测定农药残留的原理和方法。 气相色谱法适用于以下特定化合物的定量测定,如:六六六、林丹、七氯、艾氏剂、环氧七氛、狄
食品合成色素检测盒介绍及基本原理
食品合成色素检测盒可以快速、准确、方便的检测食品饮料中是否含有人工合成色素(酸性水溶性色素),比现有的检测方法优越,能够使检测过程标准化;操作简便,检测时间短,无需专业人员,反应灵敏,测定结果准确,易于观察比色;检测盒中不含有盐酸等强腐蚀刺激性药品,不会对环境造成污染,是现场检测和基层人员使用的最佳
TUNEL-法测凋亡技术操作步骤
一、TUNEL检测原理 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况,可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。 其原理是细胞凋亡发生时,内源性核酸酶激活,
In-Situ-Cell-Death-(Apoptosis)-Detection-by-TUNEL-labeling
Protocol for Frozen Sections:Warm 150ml 4% Paraformaldehyde/1x PBS to RT. Fix slides in it, 20 min., RT.1x PBS rinse, 2 times.1x PBS, 30 min., RT. Beg
TUNEL-法测凋亡技术操作步骤
TUNEL 法测凋亡操作步骤 一、TUNEL检测原理 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况,可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。