TUNEL检测的基本原理介绍

细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。......阅读全文

TUNEL-法测凋亡技术操作步骤

   TUNEL 法测凋亡操作步骤   一、TUNEL检测原理    TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况,可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。   

渗透检测的基本原理及步骤

渗透检测是基于液体的毛细作用(或毛细现象)和固体染料在一定条件下的发光现象。渗透检测的工作原理是:工件表面被施涂含有荧光染料或者着色染料的渗透剂后,在毛细作用下,经过一定时间,渗透剂可以渗入表面开口缺陷中;去除工作表面多余的渗透剂,经过干燥后,再在工件表面施涂吸附介质——显像剂;同样在毛细作用下,显

渗透检测的基本原理及步骤

渗透检测是基于液体的毛细作用(或毛细现象)和固体染料在一定条件下的发光现象。渗透检测的工作原理是:工件表面被施涂含有荧光染料或者着色染料的渗透剂后,在毛细作用下,经过一定时间,渗透剂可以渗入表面开口缺陷中;去除工作表面多余的渗透剂,经过干燥后,再在工件表面施涂吸附介质——显像剂;同样在毛细作用下,显

tunel法荧光和显色法原理的区别

TUNEL法检测细胞凋亡操作步骤操作步骤1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;2.用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min;3.PBS漂洗2次;4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C或者加细胞通透液8min;5.PBS漂洗2次;6

tunel法荧光和显色法原理的区别

TUNEL法检测细胞凋亡操作步骤操作步骤1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;2.用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min;3.PBS漂洗2次;4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C或者加细胞通透液8min;5.PBS漂洗2次;6

如何计数TUNEL切片上的总细胞数

你是计算凋亡细胞总数还是所有肿瘤细胞总数?还是你的检测方法 荧光显微镜检测还是流式细胞仪?检测的是HE切片上 还是细胞爬片 还是细胞悬浮液?细胞悬浮液通常用流式,其他的都可直接镜检。按理论讲,显微镜数荧光点就是你所需要的凋亡细胞数了,但细胞总数的话可以再荧光淬灭后做HE染色,然后利用计算灰度的方法让

质谱仪的基本原理介绍

  质谱计,是分离和检测不同同位素的仪器。它根据带电粒子在电磁场中能够偏转的原理,按物质原子、分子或分子碎片的质量差异进行分离和检测物质组成的一类仪器。  具体工作过程为:质谱仪以离子源、质量分析器和离子检测器为核心。离子源是使试样分子在高真空条件下离子化的装置。电离后的分子因接受了过多的能量会进一

盐析的基本原理介绍

  破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素,从而使蛋白质发生沉淀。  1、破坏了水化层  在高浓度的中性盐溶液中,由于盐离子亲水性比蛋白质强,与蛋白质胶粒争夺与水结合,破坏了蛋白质的水化层。 在高浓度的中性盐溶液中,由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力,产生与水化合现象,但它们之间有竞争作用,当

天平的基本原理介绍

  天平是用一根竖棍中间钻个孔,横穿一根棍儿,在棍的两端各用绳子挂上一个盘子。这种天平使用了很长时间,直到大约公元前500年,罗马的“杆称”才出现,杆称靠移动称砣的位置来保持与被称物品重量的平衡,实际上是将天平的一端(放砝码端)由固定式变成活动式,其好处是只要配上一个称砣就可以了,而天平的砝码要好几

XRF的基本原理介绍

  X射线是电磁波谱中的某特定波长范围内的电磁波,其特性通常用能量(单位:千电子伏特,keV)和波长(单位:nm)描述。  X射线荧光是原子内产生变化所致的现象。一个稳定的原子结构由原子核及核外电子组成。其核外电子都以各自特有的能量在各自的固定轨道上运行,内层电子(如K层)在足够能量的X射线照射下脱

流式细胞仪检测实验用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞

实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的

流式细胞仪检测实验_用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞

实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的

细胞死亡的检验方式

细胞发生凋亡时具有固有的形态特征,如细胞核表现缩小、染色质边缘化、凝集,凋亡晚期还会出现由核碎片与胞质内的部分细胞器混合在一起,且被细胞膜包裹形成的凋亡小体。DNA特异性染料(如Hoechst33342、Hoechst33258和DAPI等)可以与DNA的A-T碱基区进行非嵌入式结合,从而使细胞核着

流式细胞仪检测实验TUNEL组织切面的凋亡细胞的原位杂交

实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% (m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐(TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛(digo×igenin下同)-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级

流式细胞仪检测实验_TUNEL组织切面中的凋亡细胞原位杂交

实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% (m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐(TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛(digo×igenin下同)-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级

荧光抗体技术检测基本原理

荧光抗体技术检测基本原理 某些荧光物质在一定条件下.羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒既能与抗原或抗体结合。又不影响抗原与抗体的特异性结合。用荧光抗原或荧光抗体对待检标本染色后,在荧光显微镜下观察,可看到发出荧光的抗原抗体复合物。作为蛋白质标记用的荧光物质需具备如下条件:①有与蛋白质分子形成稳

荧光抗体技术检测基本原理

荧光抗体技术检测基本原理 某些荧光物质在一定条件下.羊源性成分核酸检测PCR-荧光探针试剂盒既能与抗原或抗体结合。又不影响抗原与抗体的特异性结合。用荧光抗原或荧光抗体对待检标本染色后,在荧光显微镜下观察,可看到发出荧光的抗原抗体复合物。作为蛋白质标记用的荧光物质需具备如下条件:①有与蛋白质分子形成稳

家庭气体检测仪检测基本原理

  说到气体检测仪,相信大家现在都逐渐的熟知,但是你是否知道它的基本工作原理呢?接下来就让我们来看一下吧~   气体检测仪即气体报警器,一般用气体报警器主机和气体探测器两部分构成,气体检测仪利用主机,通过无线或有线连接各类气体探测器,实现各种气体浓度检测。主机带有声光报警灯,一旦发现异常,就会发出

一步法TUNEL细胞凋亡检测技巧及常见问题分析

1. 对于贴壁细胞或细胞涂片: a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PB

农药残留检测仪的基本原理

农药残留检测仪在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关系。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物显色剂反应,产生黄色物质,用农药残留检测仪器测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷

简述紫外检测器的基本原理

  物理上测得物质的透光率,然后取负对数得到吸收度。  大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团,因而有较强的紫外或可见光吸收能力,因此UVD既有较高的灵敏度,也有很广泛的应用范围,是液相色谱中应用最广泛的检测器。  为得到高的灵敏度,常选择被测物质能产生最大吸收的波长作检测波长,

简述光学检测仪的基本原理

  光学检测仪软件中有一个综合性的验证功能,它能减少检查的误报,保证检测程序无缺陷。它可以检查储存起来的有缺陷的样品,例如,修理站存放的样品,以及印刷了焊膏的空白印刷电路板。在优化阶段,在这方面花时间的原因是为了不让任何缺陷溜过去。所有已知的缺陷都必须检查,同时要把允许出现的误报数量做到最小。在针对

爆破测振仪的基本原理介绍

   爆破震动测试采用电测法对爆炸载荷在介质中的电学量进行转换,从而达到测震目的;    该过程利用敏感元件在磁场中的相对运动,产生与地震形成一定比例关系的电信号,经过放大器和记录装置得到震动信号;    将震动信号进行频谱分析和能量衰减分析,获得震动速度、震动主频等安全判据参数,终实现波形、药

基因沉默的基本原理介绍

  按照遗传基本原理,如果某些基因能帮助父母生存和繁殖,父母就会把这些基因传给后代。但一些研究表明,真实情况要复杂得多:基因可以被关闭或沉默,以应对环境或其他因素,这些变化有时也能从一代传到下一代。  美国马里兰大学遗传学家提出了一种特殊机制,父母通过这种机制可以把沉默基因遗传给后代,而且这种沉默可

xrf测试的基本原理介绍

  XRF用的是物理原理来检测物质的元素,可进行定性和定量分析。即通过X射线穿透原子内部电子,由外层电子补给产生特征X射线,根据元素特征X射线的强度,即可获得各元素的含量信息。这就是X射线荧光分析的基本原理。它只能测元素而不能测化合物。但由于XRF是表面化学分析,故测得的样品必须满足很多条件才准,比

吸附层析的基本原理介绍

  固体内部的分子所受的分子间作用力是对称的,而固体表面的分子所受的力是不对称的。向内的一面受内部分子的作用力较大,而向外的一面所受的作用力较小,因而当气体分子或溶液中溶质分子在运动过程中碰到固体表面时就会被吸引而停留在固体表面上。吸附剂与被吸附物分子之间的相互作用是由可逆的范德华力所引起的,故在一

乳酸发酵的基本原理介绍

  在动物组织中,除特殊的内脏外,几乎所有的组织都具有进行这种发酵的性质。真核微生物中具有代表性的乳酸发酵是米根霉(Rhizopus oryzae)等霉菌类。细菌中则是乳酸杆菌。在乳酸杆菌发酵过程中仅从糖类制造乳酸的,称为同质乳酸发酵菌。链球菌,双球菌,小球菌,乳杆菌属(Lactobacillus)

磁共振的基本原理介绍

  磁共振(回旋共振除外)其经典唯象描述是:原子、电子及核都具有角动量,其磁矩与相应的角动量之比称为磁旋比γ。磁矩M 在磁场B中受到转矩MBsinθ(θ为M与B间夹角)的作用。此转矩使磁矩绕磁场作进动运动,进动的角频率ω=γB,ωo称为拉莫尔频率。由于阻尼作用,这一进动运动会很快衰减掉,即M达到与B

脱硫设备的基本原理介绍

  此工艺的基本原理是将石灰石粉加水制成浆液作为吸收剂泵入吸收塔与烟气充分接触混合,烟气中的二氧化硫与浆液中的碳酸钙以及从塔下部鼓入的空气进行氧化反应生成硫酸钙,硫酸钙达到一定饱和度后,结晶形成二水石膏。经吸收塔排出的石膏浆液经浓缩、脱水,使其含水量小于10%,然后用输送机送至石膏贮仓堆放,脱硫后的

关于电池基本原理的介绍

  锂离子电池的正极材料是氧化钴锂,负极是碳。  锂离子电池的工作原理就是指其充放电原理。当对电池进行充电时,电池的正极上有锂离子生成,生成的锂离子经过电解液运动到负极而作为负极的碳呈层状结构,它有很多微孔,到达负极的锂离子就嵌入到碳层的微孔中,嵌入的锂离子越多,充电容量越高。  同样道理,当对电池