TUNEL检测出现非特异性荧光标记的原因
a. 有些细胞或组织,例如平滑肌细胞或组织,nuclease或polymerase的酶活性水平较高,易导致出现非特异性的荧光标记。解决方法是,取细胞或组织后立即固定并且要充分固定,以阻止这些酶导致假阳性。b. 使用了不适当的固定液,例如一些酸性固定液,导致出现假阳性。建议采用推荐的固定液。c. TUNEL检测反应时间过长,或TUNEL检测反应过程中反应液渗漏,细胞或组织表面不能保持湿润,也可能出现非特异性荧光。注意控制反应时间,并确保TUNEL检测反应液能很好地覆盖样品。......阅读全文
ELISA中分析非特异性显色
酶联免疫吸附试验(ELISA)自1971年自问世以来,以其敏感性高,特异性强,操作简便、安全,而广泛应用于临床诊断,开创了免疫学诊断的新纪元。但同其它免疫诊断方法一样酶免试剂在它的研究、生产及使用中常常会碰到非特异性问题。1、试剂盒特异性因素1、1 固相载体的选择。ELISA中常用的固相载体有微
非特异性酯酶染色实验
实验方法原理 NAE将α-乙酸萘酚水解,产生α-萘酚,再与重氮盐偶联,生成不溶性的有色沉淀位于胞质中。试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液α-乙酸萘酚加重氮盐甲基绿水港派实验步骤 一、 实验试剂:1. 作用液:l/20mol/L 磷酸盐缓冲液(PH7.4)40mg加10g/Lα-乙酸萘酚(以50%丙酮做溶剂
ELISA试剂预防非特异性染色
非特异染色的原因包括一抗和二抗与血清蛋白的相互作用,抗体与组织之间的离子相互作用,以及与能够影响IHC检测系统的内源分子的相互作用。这些问题会产生高背景,以及无法在适当的细胞位置观察目的抗原。这种类型的染色问题可通过用封闭剂来封闭非特异相互作用来解决。在将样本与一抗共同孵育之前,可开展这些步骤:预防
人体免疫系统的特异性和非特异性免疫
特异性免疫 特异性免疫又称获得性免疫或适应性免疫,这种免疫只针对一种病原。是获得免疫经后天感染(病愈或无症状的感染)或人工预防接种(菌苗、疫苗、类毒素、免疫球蛋白等)而使机体获得抵抗感染能力。一般是在微生物等抗原物质刺激后才形成的(免疫球蛋白、免疫淋巴细胞),并能与该抗原起特异性反应 非特异
武汉病毒所病毒双特异性荧光标记研究取得进展
近日,中科院武汉病毒研究所王汉中领导的研究团队在利用纳米材料标记病毒以用于病毒与宿主细胞相互作用的可视化相关研究中继续取得研究进展,相关文章发表于生物材料领域的专业期刊Biomaterials上。 病毒的单颗粒标记和示踪技术为我们揭示病毒和宿主细胞间的相互作用过程提供新的视野和平台。标记了
TUNEL细胞凋亡检测程序
实验概要本实验用TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可
流式细胞术定量检测细胞凋亡3种方法的比较研究
细胞凋亡的定性检测依赖于形态学观察及DNA电泳,其定量检测则需借助于流式细胞检查。使用碘化丙啶(PI)染色检测DNA含量是最早出现的凋亡定量检测方法[1]。进入90年代,检测DNA断裂点的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
流式细胞术定量检测细胞凋亡的3种方法研究比较
细胞凋亡的定性检测依赖于形态学观察及DNA电泳,其定量检测则需借助于流式细胞检查。使用碘化丙啶(PI)染色检测DNA含量是最早出现的凋亡定量检测方法[1]。进入90年代,检测DNA断裂点的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU
细胞死亡的检验方式
细胞发生凋亡时具有固有的形态特征,如细胞核表现缩小、染色质边缘化、凝集,凋亡晚期还会出现由核碎片与胞质内的部分细胞器混合在一起,且被细胞膜包裹形成的凋亡小体。DNA特异性染料(如Hoechst33342、Hoechst33258和DAPI等)可以与DNA的A-T碱基区进行非嵌入式结合,从而使细胞核着
食物过敏的非特异性试验的介绍
食物过敏的非特异性试验对诊断具有提示和参考价值。 1、IgE:血清总IgE水平升高。 2、外周血嗜酸性粒细胞比例和绝对计数增高:白细胞总数可正常。当嗜酸性粒细胞占白细胞总数的5%~15%时,提示过敏反应;占16%~40%时,提示存在过敏反应或其他情况(如药物超敏反应、肿瘤、自身免疫性疾病、寄
蛋白质印迹法非特异性条带多或位置不准确的原因
①目的蛋白质被乙酰化、磷酸化、甲基化、烷基化、糖基化,应选择去修饰剂以恢复原有目的蛋白质大小;②目的蛋白质降解,制备样品时应使用蛋白酶抑制剂,并使用新鲜标本;③抗体浓度过高,应适当稀释抗体;④目的蛋白质存在二聚体或多聚体,样品应充分煮沸10min,使蛋白质彻底变性再上样。
原位末端标记技术检测细胞凋亡的介绍
细胞凋亡时,DNA 断裂早于形态学改变及DNA 含量减少,原位末端标记( ISEL) 是将渗入到凋亡细胞中的外源性核苷酸在酶和DNA 的催化下与凋亡细胞因内源性核酸酶的激活而产生的单股或双股断裂相结合,较前述方面具更高灵敏性。通常有两种方法: ①DNA 聚合酶I 或klenow 大片段介导的单
关于细胞凋亡检测—原位末端标记技术的基本介绍
细胞凋亡时,DNA 断裂早于形态学改变及DNA 含量减少,原位末端标记( ISEL) 是将渗入到凋亡细胞中的外源性核苷酸在酶和DNA 的催化下与凋亡细胞因内源性核酸酶的激活而产生的单股或双股断裂相结合,较前述方面具更高灵敏性。通常有两种方法: ①DNA 聚合酶I 或klenow 大片段介导的单位
细胞凋亡的三种流式检测方法
一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点:1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相
三种流式方法检测细胞凋亡
一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相关
细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨
原发性非特异性免疫缺陷的病因
原发性免疫缺陷病的病因尚未十分清楚,根据这类疾病的表现多种多样,很可能是多种因素所致。遗传因素在众多原发性免疫缺陷病中起作用。
治疗非特异性肋软骨炎的简介
治疗的目的主要是缓解疼痛,除适当给予镇静止痛药物外,采用1%盐酸普鲁卡因加泼尼松局部痛点封闭有一定效果。对局部肿大明显、疼痛较重而长时间不缓解,病人思想负担过重或不能排除肋软骨肿瘤者,亦可考虑将增大的肋软骨切除,但广泛肋软骨炎病例不宜施行。
原发性非特异性免疫缺陷的症状
1.体液免疫(B细胞)缺陷为主的疾病表现为免球蛋白的减少或缺乏。 包括: (1)原发性丙种球蛋白缺乏症:有两种类型:①Bruton型,较常见,为婴儿性联丙种球蛋白缺乏病,与X染色体隐性遗传有关,仅发生于男孩,于出生半年以后开始发病;②常染色体隐性遗传型,男女均可受累,也可见于年人。 (2)
非特异性炎性肠疾病的简介
非特异性炎性肠疾病 克罗恩病:是局限于胃肠道一处或多处的非特异性炎症,根据病变部位和病理曾提出许多名称,如节段性肠炎、末段回肠炎、局部性肠炎等,病因仍不清楚,认为是一种自身免疫性疾病。
原发性非特异性免疫缺陷的检查
对所有免疫缺陷病例,必须选作一些实验室检查以确立诊断;而在作相应治疗之前,通常还须作一些先进试验对疾病作进一步分类(表147-5)。一般来说,多数机构和医院能作筛查试验,多数大医院能作先进试验,特殊试验则只有一些实验室或配备高水平免疫学实验室的医院才能进行。 当怀疑免疫缺陷时,建议进行实验室筛
原发性非特异性免疫缺陷的病因
原发性免疫缺陷病的病因尚未十分清楚,根据这类疾病的表现多种多样,很可能是多种因素所致。遗传因素在众多原发性免疫缺陷病中起作用。
关于非特异性肋软骨炎的简介
非特异性肋软骨炎是肋软骨的非化脓性炎症,1921年由Tietze首先报道,故又称为Tietze病。本病在临床上经常遇到,好发于青壮年,女性较男性多见。主要表现为单根或多根肋软骨肿大、凸起,多见于一侧第2~4肋软骨,少数病例为双侧,偶可发生于肋弓。
关于非特异性免疫的屏障结构介绍
皮肤粘膜屏障:健康完整的皮肤和粘膜是阻止病原菌侵入的强有力屏障。汗腺分泌的乳酸,皮脂腺分泌的脂肪酸有一定抗菌作用。呼吸道和消化道粘膜有丰富的粘膜相关淋巴样组织和腺体,能分泌溶菌酶以及在胃酸、唾液、泪液等体液内均有SIgA等抗菌物质,表明粘膜屏障的重要性,已提出“粘膜免疫系统”的概念。血脑屏障:一
急性非特异性心包炎的简介
急性非特异性心包炎是一种浆液纤维蛋白性心包炎,发病前数周常有上呼吸道感染史,起病急骤。临床特征为:剧烈胸痛、发热,约70%病例听诊有心包摩擦音;有心包积液但很少发生严重心脏压塞;化验检查常有白细胞总数增加,血沉增快;X线示50%-90%的患者有心影增大;早期就诊可记录到心电图ST段抬高。如心包下
预防非特异性尿道炎的简介
1.不滥用抗生素 抗生素可能抑制部分有益菌群,有害细菌就会乘机大量繁殖。因此,使用抗生素要慎重。 2.单独清洗内裤 有害细菌可以在皮肤表面、胃肠道、指甲内等地方大量繁殖。因此,内衣裤一定要单独洗,最好用专用的内衣裤除菌液浸泡几分钟。 3.女性护理液适合日常清洁 频繁使用药字号洗液、消毒
原发性非特异性免疫缺陷的症状
1.体液免疫(B细胞)缺陷为主的疾病表现为免球蛋白的减少或缺乏。 包括: (1)原发性丙种球蛋白缺乏症:有两种类型:①Bruton型,较常见,为婴儿性联丙种球蛋白缺乏病,与X染色体隐性遗传有关,仅发生于男孩,于出生半年以后开始发病;②常染色体隐性遗传型,男女均可受累,也可见于年人。 (2)
原发性非特异性免疫缺陷的检查
对所有免疫缺陷病例,必须选作一些实验室检查以确立诊断;而在作相应治疗之前,通常还须作一些先进试验对疾病作进一步分类(表147-5)。一般来说,多数机构和医院能作筛查试验,多数大医院能作先进试验,特殊试验则只有一些实验室或配备高水平免疫学实验室的医院才能进行。 当怀疑免疫缺陷时,建议进行实验室筛
非特异性检查羊水栓塞的介绍
(1)心电图 右心室,右心房扩张,还可见到心肌劳损的表现。同时有心动过速。 (2)胸片 可能无异常表现,70%的患者可有轻度的肺水肿症状,表现为双侧弥漫性点状浸润阴影,沿肺门周围分布,肺部轻度扩大。心影可能会增大。 (3)血氧饱和度 突然下降往往可以提示有肺栓塞的问题。 (4)凝血功能的检
原发性非特异性免疫缺陷的治疗
免疫缺陷病的一般治疗需要超常量的医护以维护最佳健康和营养状态,处理感染发作,预防与疾病有关的情绪问题(参见第151节),妥善安排医疗费用。必须尽量不让病人接触感染,睡卧在自己的床上,最好有自己的卧室。在有一定抗体功能的情况下,应定期给予死疫苗。牙齿有病需妥为修复。 抗生素治疗感染发作至关紧要。