相差显微镜的基本原理
相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差（即相位差）转化为光强差的特种显微镜。光线通过比较透明的标本时，光的波长（颜色）和振幅（亮度）都没有明显的变化。因此，用普通光学显微镜观察未经染色的标本（如活的细胞）时，其形态和内部结构往往难以分辨。然而，由于细胞各部分的折射率和厚度的不同，光线通过这种标本时，直射光和衍射光的光程就会有差别。随着光程的增加或减少，加快或落后的光波的相位会发生改变（产生相位差）。光的相位差人的肉眼感觉不到，但相差显微镜能通过其特殊装置——环状光阑和相板，利用光的干涉现象，将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差（明暗差），从而使原来透明的物体表现出明显的明暗差异，对比度增强，使我们能比较清楚的观察到普通光学显微镜和暗视野显微镜下都看不到或看不清的活细胞及细胞内的某些细微结构。相差显微镜的成像原理： 镜检时光源只能通过环状光阑的透明环，经聚光器后聚成光束，这束光线通过被检物体时，因各部分的光程不同......阅读全文
小胶质细胞原代培养实验
基本方案 实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长，以及小胶质细胞半悬浮生长的原理，通过摇床震荡法，将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下
光学显微镜物镜分类
物镜是显微镜最重要的光学部件。因此，它直接影响成像质量和各种光学技术参数。根据物镜相位差校正的程度分类可分为:(1)消色差物镜这是外壳上带有“Ach”字样的普通物镜。这种物镜只能校正轴上点的色差(红色、蓝色)和球面像差(黄绿色)，并消除近轴点的彗差。其他颜色光的色差和球面像差无法校正，场曲率大。(2
细胞传代实验
实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打传代。实验材料 细胞试剂、试剂盒 D-Hanks液小牛血清RPMI1640双抗胰蛋白酶EDTANHCl
光学显微镜物镜分类
光学显微镜物镜分类物镜是显微镜重要的光学部件。因此，它直接影响成像质量和各种光学技术参数。根据物镜相位差校正的程度分类可分为:(1)消色差物镜这是外壳上带有“Ach”字样的普通物镜。这种物镜只能校正轴上点的色差(红色、蓝色)和球面像差(黄绿色)，并消除近轴点的彗差。其他颜色光的色差和球面像差无法校正
22类实验室常见仪器设备配置及作用归纳（二十一）
职业卫生： 1.防爆粉尘采样器 粉尘、金属烟尘采样 2.高原空盒气压表 现场气压 3.数字式温湿度计 现场温湿度 4.电子皂膜流量计 采样器流量校准 5.热球式风速仪 现场风速测定 6.辐射热计 辐射热测定 7.低流量大气采样器 有机物采样
小胶质细胞原代培养
实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长，以及小胶质细胞半悬浮生长的原理，通过摇床震荡法，将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养，达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料 新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋
荧光原位杂交实验——基本方案
实验材料样品试剂、试剂盒DNA探针非同位素甲酰胺杂交混合液甲酰胺Triton X-100SSC仪器、耗材相差显微镜盖玻片水浴锅加湿盒滤光片荧光显微镜实验步骤1a. 石蜡切片或细胞的杂交：按石蜡切片或细胞的原位杂交实验的基本方案步骤1~7，对载玻片进行脱蜡、水化、 封闭和脱水处理。将标本晾干（或在干
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以：（1）用于细胞保种；（2）用于分子生物学研究；（3）用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
如何冻存细胞
一、材料 （一）仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱（4℃、-20℃、-70℃） 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 （二）玻璃器皿 1.吸管（弯头、直头） 2.培养瓶 3.玻璃瓶（250ml、100ml） 4.废液缸 （三）塑料器皿 1
血尿那些事
血尿，顾名思义就是尿中带血。尿液离心取沉渣做显微镜检查，如果沉渣中红细胞数≥3 个/HP（高倍视野）就是血尿。1、血尿分镜下血尿和肉眼血尿。轻度的血尿，尿中红细胞虽然增多，但肉眼观察正常，仅在显微镜下才能看到，称镜下血尿；严重的血尿，尿中大量红细胞，尿的颜色变成洗肉水样或者酱油色，甚至鲜红色并有血凝
尿沉渣检验的标准化
一、材料与器材（一）留置标本的容器1.收集和运送尿液容器应由透明且不与尿液成分发生反应的惰性材料制成；洁净、防漏、防渗，一次性使用；容积应>50ml，圆形开口的直径>4.0cm，较宽的底部和有安全的易于开启的密封装置，保证标本运送安全。2.用于离心尿液的离心管，应具备以下条件：清洁、透明、带刻度，刻
如何冻存细胞
一、材料 （一）仪器 1.净化工作台 2.离心机 3.恒温水浴箱 4.冰箱（4℃、-20℃、-70℃） 5.倒置相差显微镜 6.培养箱 7.液氮冰箱 （二）玻璃器皿 1.吸管（弯头、直头） 2.培养瓶 3.玻璃瓶（250ml、100ml） 4.废液缸 （三）塑料器皿 1
单克隆抗体细胞的选择
实验概要本文介绍了单克隆抗体细胞的选择实验。实验原理在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞称之为饲养细胞(Feeder cell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中，就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体，因此在这一
不孕不育的免疫学检查的检查过程
—、抗精子免疫不育的检查 抗精子免疫包括抗精子体液免疫(抗精子抗体)和抗精子细胞免疫。 抗精子抗体的检测 （1） 性交后试验 于性交后6-24h内取宫颈粘液，在高倍镜下观察计数精子数。每高倍视野中，有≥21条极度活泼的精子者特异性因素干扰。若血清效价≥1：32，则可认为确含精子抗体。其他尚
【锐赛小课题】染色体分离实验
一、聚胺法分离染色质 试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液 实验步骤： 有丝分裂中细胞的同步化 1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。 2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的
显微镜正相差与负相差区别
根据配置和定位在所述物镜后焦平面的相位环的性质，样品可以在正或负相位对比观察。 这种互动式教程研究环绕（S），衍射（D），并导致明颗粒（P波），以及积极和消极相差显微镜之间的关系。 此外，相板的几何形状和有代表性的样本图像也呈现。在现在人们工作中用的时候，科研人员大部分都在负相差，现在正相差在现在科
微生物学检验基本技术（一）
随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感
细胞培养用血清中的纳米细菌和黑胶虫有关系么
引言芬兰科学家Ciftcioglu et al进行哺乳动物细胞培养时发现细胞内存在一种原核微生物，能通过100 nm的滤菌器，Kajander将其命名为纳米细菌(nanobacteria)。纳米细菌广泛存在于自然界的矿物质中和生物体内，能感染人类、牛、鹿和其它哺乳动物，是一种人畜共患的致病原。纳米细
小鼠源细胞注意事项与操作流程
小鼠源细胞注意事项： 1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。 2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。 3.严格无菌操作，打
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
无症状血尿的分类介绍
肾小球源性：IgA肾病、薄基底膜肾病（良性家族性血尿）、遗传性肾炎（Alport’s综合征）、其他原因所致的局灶性肾小球肾炎 非肾小球源性： 上尿路：结石、肾盂肾炎、多囊肾、髓质海绵肾、高钙尿和/或高尿酸尿（无结石）、肾损伤 乳头坏死、输尿管狭窄和肾积水、肾梗死或动静脉畸形、左肾静脉压迫（
细胞传代实验
细胞培养技术 消化法 实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长
五分群血细胞分析仪样本类型及容器选择比较研究(2)
3 讨论 目前，对于三分群血细胞分析样本采集的研究大多限于静脉血与手指血的影响，而五分群仪器的样本类型分析较少报道；更未见有样本容器对结果影响的相关研究。从表1和表3显示中看出，末梢血管WBC、RBC、Hb、MCV检测结果高于静脉血真空管和微量管，以WBC增高较为显著，而血小板明显偏低，
细胞技术专题：细胞传代实验
根据细胞生长的恃点，传代方法有3种：悬浮生长细胞传代、半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）、贴壁生长细胞传代。实验方法细胞培养技术 消化法 实验方法原理培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代
如何选择合适的细胞培养板？
细胞培养的规模可大可小，你既可以使用生物反应器，也可以使用培养瓶或多孔板。如今，利用多孔板的细胞培养模式正倍受青睐，因为这有助于研究多个动态变量，减少实验时间，并节约昂贵的试剂。除了标准的高通量微孔板，还有一些特殊的微孔板被开发出来，助力3D和器官型细胞培养。市场上的细胞培养板可不少，如何选择合适的
转基因小鼠模型的建立(SOP)2
[不足之处]（1）外源基因随机整合；（2）个别原核不清晰，需进行特殊处理；（3）需大型精密仪器，费用昂贵；（4）操作周期相对较长。（二）实验器材的准备1．输精管切除术用器材：弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带弯针4/0丝线及持针器、直径为10cm塑料 Petri氏培
细胞传代实验
细胞培养技术 消化法 实验方法原理 培养细胞传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代；部分贴壁生长的细胞用直接吹打可传代；悬浮生长
鞭毛染色实验——硝酸银染色法
细菌的鞭毛很纤细，其直径通常为 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少数能形成鞭毛束（由多根鞭毛构成）的细圈可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子显微镜观察。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。鞭毛染色方法很多，本实验
概述小儿幽门螺杆菌感染的细菌的直接检查
用培养、PCR、组织学方法直接检测胃黏膜内的Hp (1)培养法：通过胃镜钳取胃窦黏膜作Hp培养是最精确的诊断方法，可作为验证其他诊断性试验的金标准。此外，还可提供细菌的药物敏感试验，指导临床选用药物，尤其是治疗失败者或生活在Hp耐药性很高的国家与地区。Hp培养法特点是特异性高但敏感性居中操作技