相差显微镜的基本原理
相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差(即相位差)转化为光强差的特种显微镜。光线通过比较透明的标本时,光的波长(颜色)和振幅(亮度)都没有明显的变化。因此,用普通光学显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时,其形态和内部结构往往难以分辨。然而,由于细胞各部分的折射率和厚度的不同,光线通过这种标本时,直射光和衍射光的光程就会有差别。随着光程的增加或减少,加快或落后的光波的相位会发生改变(产生相位差)。光的相位差人的肉眼感觉不到,但相差显微镜能通过其特殊装置——环状光阑和相板,利用光的干涉现象,将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差(明暗差),从而使原来透明的物体表现出明显的明暗差异,对比度增强,使我们能比较清楚的观察到普通光学显微镜和暗视野显微镜下都看不到或看不清的活细胞及细胞内的某些细微结构。相差显微镜的成像原理: 镜检时光源只能通过环状光阑的透明环,经聚光器后聚成光束,这束光线通过被检物体时,因各部分的光程不同......阅读全文
血尿的发病机制及尿红细胞形态的临床意义
与蛋白尿几乎都来源于肾脏不同,血尿可来源于泌尿道的任何部位。导致血尿的病因多种多样,绝大多数由泌尿系统疾病引起,但也有少数是由全身性疾病如凝血功能障碍等导致。外科性血尿多表现为肉眼血尿,常伴有血丝或血块,主要由泌尿系统结石、肿瘤及创伤引起。而内科性血尿常表现为镜下血尿或肉眼血尿,主要由原发性或继发性
细胞冻存的操作步骤
(一)仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(弯头、直头)2. 培养瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 废液缸(三)塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。
激光扫描共聚焦显微镜在组织化学免疫组织化学中的应用
激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confcal microscope,LSCM)是激光、电子摄像和计算机图像处理等现代高科技手段相互渗透的产物。由于其高分辨率,高灵敏度及高放大率等特点,在细胞水平上能作多种功能测量和分析,如荧光定量测量、共聚焦图像分析、三维图像重建、活细胞动力学
血尿的发病机制及尿红细胞形态的临床意义
机制 与蛋白尿几乎都来源于肾脏不同,血尿可来源于泌尿道的任何部位。导致血尿的病因多种多样,绝大多数由泌尿系统疾病引起,但也有少数是由全身性疾病如凝血功能障碍等导致。外科性血尿多表现为肉眼血尿,常伴有血丝或血块,主要由泌尿系统结石、肿瘤及创伤引起。而内科性血尿常表现
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS
金相显微镜电视显微镜介绍
随着电视技术的发展,电视录像已愈来愈广泛地应用于显微镜领域.并且已经制造出专门的电视显微镜。通过一个电视环形闭路系统,在显微镜上所观察到的标本的像,可以直接显示在电视接收机的荧光屏上。并且还可以把标本的像录在录像磁带上,需要时非常方便地再次显示。图16.2就是一个电视显微镜及电视环形闭路系统。金相显
生物显微镜微生物遗传育种学
生物显微镜--微生物遗传育种学通过生物显微镜观察技术人类发现厂肉眼看不见、模个着的微生物茵落以及单个细胞形忠。显微镜技术的发展为人类观察不同细胞形态起到了如虎添哭的作用;狐微镜观察技术应用到高等动植物及人类细胞研究,推动丁细胞生物学的迅犹发展。利用普通生物显微镜可以观察到微生物及高等动植物细胞结构以
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒低渗溶液醋酸
小鼠精原干细胞移植
实验概要小鼠精原干细胞移植主要试剂75%乙醇、台盼蓝、白消安、水合氯醛主要设备外科手术刀、外科手术剪、玻璃针(内径约40μm)、显微镊、实体解剖镜、相差显微镜、显微操作仪实验步骤(1)白消安处理受体鼠取6~8周龄的小鼠,按照40~60 mg/kg腹腔注射白消安,小鼠在注射白消安4~6周后,可以用来移
细胞冻存的操作步骤
(一)仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(弯头、直头)2. 培养瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 废液缸(三)塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10
细胞计数和活力测定实验方法
器材和试剂: 1. 倒置相差显微镜,具有10×物镜;2. 标注体积刻度的试管(圆锥形底);3. 改良的Neubauer血细胞计数器;4. 计数器盖玻片;5. 袖珍管或等体积的塑料容器,如试管或离心管;6. 巴斯德吸管(短型和长型);7. 可调体积的微量加样器(100—250μl);8. 无菌枪尖;9
细胞冻存的操作步骤
(一)仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(弯头、直头)2. 培养瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 废液缸(三)塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10
台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(三)
台盼蓝浓度不同的台盼蓝浓度对细胞染色会有不同影响吗?Nexcelom的科学家们将同一Jurkat细胞样本与0.4%,0.2%,0.1%,0.05%和0.025%的台盼蓝以1:1比例混合,以下是部分浓度染色后的细胞图片: 下面的直方图统计了不同浓度台盼蓝检测到的死细胞(较深着色)和“气球”状细胞的浓度
细胞冻存和复苏实验
细胞冻存和复苏 实验方法原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种
细胞和细胞内含物的观察1
细胞质内含有多种细胞器。有些细胞器如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体等普遍存在于各种细胞中,而另有些细胞器如叶绿体,只存在于植物细胞中。细胞质内的这些结构,除叶绿体外,一般在光学显微镜下不易看见,必须经过一定的固定染色方法处理后,才能看到大多数细胞器,或直接用相差显微镜观察。线粒体线粒体是一种动态的
酵母细胞的培养与观察操作指南
一、实验目的1.掌握酵母细胞的培养 方法2.学会使用相差和微分干涉显微镜二、异源互补技术概述酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌 株在复合液体培养基中的倍增时间为90~120min,到静止期时细胞滴度为3
细胞冻存和复苏实验
细胞冻存和复苏可以:(1)用于生物学保种;(2)用于医学上干细胞研究;(3)用于传代培养。实验方法原理细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减
酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母细胞的培养
实验概要本实验主要进行了了酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母的培养,目的是掌握酵母细胞的培养方法及学会使用相差和微分干涉显微镜。实验原理酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌株在复合液体培养基中的倍增时间为90
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(二)
3.2 染色体制备无论是荧光染色还是 FISH,分裂期和分裂间期的染色体制备均于载物片上进行。建议使用蛋白水解酶对材料进行预处理,以去除细胞壁和细胞质,再将样品置于载玻片上,滴上乙酸,然后盖上玻片压片。所有操作均于室温下进行,除非是特殊说明。在洗涤和材料准备时使用小培养皿,方法见 2. 2 节。(
细胞冻存和复苏实验
细胞冻存和复苏 实验方法原理 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种
隐匿性肾小球肾炎的临床表现及检查化验
临床表现 隐匿性肾小球肾炎大多起病隐匿,或突然出现肉眼血尿,无其他泌尿系统症状,肾功能大多正常,主要临床表现为尿异常。临床可分为3种形式: 一、无症状性血尿 患者多为青年人,无临床症状和体征,有时在体检时发现有镜下肾小球源性血尿,呈持续性或反复发作。部分患者于剧烈运动、高热、感染、饮酒等情
单克隆抗体细胞的选择
实验概要本文介绍了单克隆抗体细胞的选择实验。实验原理在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feeder cell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一
酵母遗传学方法9:酵母免疫荧光
酵母免疫荧光1)细胞制备1.培养5ml酵母至对数生长早期(106~107细胞/ml)。2.直接加1/10体积的甲醛到培养基里固定细胞(加入的甲醛终浓度为3.7%,标准母液是37%)。3.细胞在甲醛中培养至少1小时。4.离心收集细胞,用0.1mol/L磷酸钾(pH7.5)洗一次。5.把细胞悬浮在1ml
大鼠肝星状细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
细胞检测方法的原理是什么?
常见细胞检测方法的原理:显微镜观察:普通光学显微镜:利用可见光透过细胞样本,通过不同的透镜系统放大细胞的图像,基于细胞和细胞器对光的折射和吸收差异来观察细胞形态和结构。荧光显微镜:细胞中的某些成分(如蛋白质、核酸等)被特定的荧光染料或标记抗体标记后,在特定波长的激发光下发出荧光,从而能观察到这些成分
大鼠肝星状细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
酵母遗传学方法3:RNA的分离
酵母RNA的分离1)总酵母RNA的分离1.在每毫升培养物中加入50μg环乙酰亚胺,在30℃下振荡15分钟。此步亦可省略,但是有人认为环乙酰亚胺可防止mRNA凝集在多核糖体上。2.迅速冷冻收集细胞,在大离心管中加入约一半体积的碎冰,将培养物倒入,振荡,在4℃下以5000r/min离心5分钟。3.加入1
原代心肌细胞培养方法探讨
摘要 探讨培养Wister新生大鼠心肌细胞的可靠方法。采用心肌组织块差别消化结合化学纯化的培养方法,通过倒置显微镜、HE染色、透射电镜、台盼篮、免疫细胞化学,鉴定心肌细胞生长情况及纯度。结果细胞生长迅速、自行搏动,细胞形态完整,细胞内肌丝、线粒体清晰;细胞成活率达94.6%;肌动蛋白(HHF35)经
小胶质细胞原代培养实验
实验方法原理利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+