简述抗双链DNA抗体的检测方法

1、间接免疫荧光法(IIF):以绿蝇短膜虫虫体为包被基质,其上只含有一个单纯的、完整的dsDNA分子,不含有任何其他物质,特异性好;由于只结合血清中的高亲和力抗体,故灵敏度有一定限制。 2、免疫印迹法(LIA):综合了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳高分辨率和酶免疫吸附技术的高特异度,广泛用于组抗原成分分析。但用此方法检测抗ds-DNA抗体敏感性较低。 3、酶联免疫吸附法(ELISA):是将脱氧核糖核酸包被在聚乙烯板上,可检测低亲和力的抗ds-DNA抗体,以及用于抗ds-DNA抗体定量检测,是检测抗ds-DNA抗体较为准确可靠的方法 。......阅读全文

抗双链脱氧核糖核酸抗体(dsDNA)临床意义

正常参考范围:阴性临床意义:对系统性红斑狼疮(SLE)有较高的特异性,但敏感度稍差,抗dsDNA抗体滴度的升降与SLE疾病的活动程度相关,因此可监测 SLE的病情变化。其他结缔组织病患者,dsDNA亦可阳性。

细胞化学词汇DNA双链体

中文名称:DNA双链体英文名称:DNA duplex定  义:两条以3′,5′-磷酸二酯键相连而成的反向多核苷酸链通过沿着其轴向的互补碱基对的氢键交联在一起形成的双链DNA,通常形成双螺旋的结构。可以共价闭合成环状分子,形成超螺旋DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学

解旋酶打开DNA双链过程破解

  美国温安洛研究所近日发布公告称,该所科学家和洛克菲勒大学合作,成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA(脱氧核糖核酸)复制的结构过程,并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究,为生命繁殖之谜提供了全新注解。  温安洛研究所教授李慧琳(音译)从酵母生物体内提

双链DNA探针切口平移法

当双链DNA 分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA

双链DNA探针切口平移法

当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,

解旋酶打开DNA双链过程破解

  美国温安洛研究所近日发布公告称,该所科学家和洛克菲勒大学合作,成功破解CMG解旋酶参与真核生物内DNA(脱氧核糖核酸)复制的结构过程,并首次观察到其与DNA间的相互作用。这项发表在美国《国家科学院学报》上的最新研究,为生命繁殖之谜提供了全新注解。  温安洛研究所教授李慧琳(音译)从酵母生物体内提

细胞化学词汇双链互补DNA

中文名称:双链互补DNA英文名称:double-strand cDNA;dscDNA定  义:以双链互补DNA为模板合成的双链DNA。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

双链DNA探针切口平移法

   当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用

双链DNA探针标记法介绍

分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。1. 切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的

DNA双链体的结构和功能

中文名称DNA双链体英文名称DNA duplex定  义两条以3′,5′-磷酸二酯键相连而成的反向多核苷酸链通过沿着其轴向的互补碱基对的氢键交联在一起形成的双链DNA,通常形成双螺旋的结构。可以共价闭合成环状分子,形成超螺旋DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

双链DNA探针标记法的介绍

  分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于基因的鉴定、临床诊断等方面。  双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。  切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到

限制酶切割双链DNA的方式

限制酶切割双链DNA的方式有两种,产生的末端也有两种:第一种是交错切割,即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基,故断口产生两小段自身互补的单链,这种末端容易互补连接,称为粘性末端(cohesive terminus);第二种为平整切割。

简述抗子宫内膜抗体的治疗方法

  (1) 隔绝疗法:精子同种免疫性不孕妇女使用避孕套3~6个月后,可避免精子抗原对女方的进一步刺激,待抗体效价消失后,选择排卵期性交,可望获得受孕。   (2) 免疫抑制疗法:肾上腺皮质激素类药物可用于治疗免疫性不孕症,如排卵前两周应用强地松 5mg,每日3次。也有报道于阴道局部应用氢化可的松治

简述抗精子抗体检测的临床意义

  抗精子抗体的检出率因采用的检测方法不同,结果也不一致。通常不育症患者血清中的AsAb检出率为20%~30%左右,而在梗阻性无精症患者中,AsAb阳性率则高达60%。AsAb的出现以及滴度升高是造成免疫性不育、不孕的根本原因,因而AsAb的检测对不育的临床治疗和预后的判断提供了有价值的指标。  不

简述抗环瓜氨酸肽抗体的检测原理

  检测抗环瓜氨酸肽抗体最常用的方法为抗原用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,采用合成的含有经修饰的精氨酸残基的环瓜氨酸肽(CCP)作为抗原包被微孔板,已有厂家的规范检测试剂盒应用于临床体外半定量或定量检测人抗CCP-IgC型抗体。由于CCP可以大量人工合成,试剂稳定,检测方法简便快速,结果可靠,因

简述抗SSB抗体检测的临床意义

  多数情况下SSB抗体与SSA抗体同时出现。抗体阳性率较高的疾病有干燥综合征、新生儿狼疮综合征伴有先天性心脏传导阻滞。阳性率较低的见于系统性红斑狼疮、单克隆丙种球蛋白病。干燥综合征中的抗SSA、抗SSB抗体与临床中的紫癜、高丙种球蛋白血症、严重唾液腺功能障碍、腮腺肿胀、高滴度类风湿因子、淋巴细胞及

简述抗磷脂抗体检测的临床意义

  待测血清的A值与阴性对照的A值比值(P/N)≥2.1为阳性,阳性标本可继续连续双倍稀释测效价;正常人抗心磷脂抗体阴性。抗磷脂抗体阳性的疾病主要有全身性红斑狼疮以及神经梅毒、多发性硬化、吉兰-巴雷综合征、抗心磷脂综合征等;抗心磷脂抗体可作为提示感染并监测治疗效果的参考指标,该抗体在肺炎、肺脓肿、肝

如何判断提取的DNA是高纯度的双链DNA

首先:可以通过分光光度计A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm.纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者2.0(RNA).如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响.A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚

关于抗DNA抗体的基本介绍

  1957年Ceppelini等首次报道了系统性红斑狼疮(SLE)患者的血清成分可与DNA发生反应,随后建立了几种定性和定量检测抗DNA抗体的方法。随着研究的不断深入,发现定量检测IgG型抗DNA抗体对SLE更具诊疗参考价值。在SLE患者的血清中存在三种类型的抗DNA抗体,其中的抗dsDNA抗体和

关于抗DNA抗体的详细介绍

  可分为单链(变性)和双链(天然)DNA抗体:  (1)抗单链DNA(ssDNA)抗体:在多种疾病中及正常人血清中存在,无特异性,临床价值不大。  (2)抗双链DNA(dsDNA抗体):对诊断SLE有较高的特异性,且与SLE的活动相平行,并可作为治疗的估价。随着疾病活动的控制,抗dsDNA抗体滴度

双链DNA结合域的结构和作用

双链DNA结合域,DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。 双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains):一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA序列,和一个转录激活域,这个转录激活域与基础转录机制相作用。

标记双链DNA的3突出端

实验材料限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶模板 DNA试剂、试剂盒乙酸铵乙醇酚氯仿末端转移酶缓冲液仪器、耗材Sephadex G-50 离心柱实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液乙酸铵(10 mol/L )乙醇酚:氯仿(1:1,V/V)2. 酶和缓冲液适当的限制性内切核酸酶小牛胸腺末端转移酶5X 末端

简述抗精子抗体的表现

  在不孕不育症中,男女都有可能出现抗精子抗体阳性。  在男性,主要表现为男性精子质量下降、活力减退、活率不达标,甚至出现大量的畸形精子,使一些看来健壮的男性在不知不觉中丧失了正常的生殖能力,尽管他们感到非常吃惊和无奈。  而在女性,由于AsAb具有杀伤、吞噬、凝集和制动精子的作用,往往使精卵结合受

细胞化学词汇双链DNA结合域

中文名称:双链DNA结合域外文名称:dsDNA-binding domain定       义:双链DNA结合域,DNA结合蛋白中与双链DNA结合的结构域。作       用:双杂交系统的基础是在一些转录因子上发现的模域(modular domains):一个DNA结合域,它可以结合一段特异的DNA

双链DNA探针随机引物合成法

  随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合,在Klenow酶的作用下,合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常,产物平均长度为400-600个核苷酸。利用随机引物进行反应的优点是:(1)Klenow片段没有5'→3'外切

分子遗传学词汇双链DNA

中文名称:双链DNA英文名称:double-stranded DNA;dsDNA定  义:由两条DNA单链通过碱基互补作用而构成的DNA分子。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

DNA测序——双脱氧链末端终止法

实验方法原理DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3'-OH末端上进行的。由于2’,3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3'-位脱氧而失去游离-OH,当它参入到DNA链后,3'-OH末端消失,使DNA链的延伸终止。 本实验根据此原理,将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体,

简述抗精子抗体疗法

  1、免疫抑制疗法:临床多用肾上腺皮质激素,有局部使用,低剂量持续给药,大剂量间歇给药和冲击给药几种方法。免疫抑制疗法的目的是抑制体内免疫反应,使抗精子抗体滴度下降,当然,免疫疗法副作用大,专家不建议患者采用。   2、隔离疗法:该疗法是使用避孕套,避免和减少女性生殖道与精子及其抗原物质的接触,

免疫学实验抗双链脱氧核糖核酸抗体(dsDNA)介绍

  抗双链脱氧核糖核酸抗体(dsDNA)介绍:   抗dsDNA抗体对SLE有很高的特异性诊断意义,这些抗dsDNA抗体沉积在各脏器的微血管基底膜与器官原位抗原型DNA发生反应,形成免疫复合物,激活炎症系统,导致组织损伤,如狼疮肾炎,自身免疫性肝炎等。动物模型证实了大分子DNA参与了SLE的致病过

制备DNA测序模板实验——双脱氧测序的双链质粒DNA的碱变性

实验材料DNA试剂、试剂盒NaOHEDTA乙酸钠乙醇仪器、耗材离心管离心机摇床实验步骤1.  加入约0.5 pmol 重组质粒DNA于0.5 ml 微量离心管中,如果体积大于20 μl 应以乙醇沉淀,重溶于20 μl 水。2.  如果体积小于20 μl,用水补足20 μl。3.  加入2 μl 2