简述免疫组化实验所用的抗体

免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。......阅读全文

免疫组化实验过程中的要点和技巧

1.固定:最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液,请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液:饱和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其对组织的穿透力较强,固定较好

免疫组化实验过程中的要点和技巧

1.固定:最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液,请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液:饱和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其对组织的穿透力较强,固定较好

实验室中所用的玻璃层析柱有那几种方式

  一是下部带有活塞的玻璃管,活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的,这样可以不涂真空油脂,以免污染产品。如果使用普通的玻璃活塞,则真空油脂要小心地涂薄涂匀。  另一种是将玻璃管下端拉细,套上一段弹性良好的管子。这段管子必须是不能被淋洗剂溶解的,普通橡皮管一般不可充作此用,因为橡皮易被氯仿、苯、THF等溶剂

免疫组化和Western-Blot可以用同一种抗体吗?

免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(又称表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白都含有构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果你所用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于免疫组化和We

免疫组化和WB是否可以用同一种抗体?

免疫组化时抗体识别的是未经变性处理的抗原决定簇(又称表位),有些表位是线性的,而有的属于构象型;线性表位不受蛋白变性的影响,天然蛋白和煮后的蛋白都含有;构象型表位由于受蛋白空间结构限制,煮后变性会消失。如果所用的抗体识别的是蛋白上连续的几个氨基酸,也就是线性表位,那么这种抗体可同时用于免疫组化和WB

IgG抗体纯化实验

虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选,然而有时这种纯化方式却非必需,或者无法实施进行。在大多数锖况下,运铁蛋白可发生共沉淀或共纯化,能用凝胶滤过层析去除之。实验材料抗体试剂、试剂盒SAS仪器、耗材透析膜离心机实验步骤1.  于4℃不断搅拌下,往2体积的含有IgG的混合物中,逐滴加入1体枳pH7.

IgG抗体纯化实验

实验材料 抗体试剂、试剂盒 SAS仪器、耗材 透析膜离心机实验步骤 1.  于4℃不断搅拌下,往2体积的含有IgG的混合物中,逐滴加入1体枳pH7.0的SAS溶液。加完后置于4℃不间断地搅拌此混合物2~4 h以形成沉淀。2 000 g 离心20 min。 2.  用预冷的33% SAS溶液在漩涡混合

梅毒抗体实验分类

  梅毒抗体的实验检测有将梅毒的病原体菌体和将菌体成分作为抗原的实验方法,尤其梅毒螺旋体抗原是在大肠杆菌中发现的,被认为是梅毒主要抗原,检测梅毒抗体的方法主要有EIA法、粒子凝集法、血球凝集法等.此外,还有用于快速检查的金标法.。根据所用的抗原不同分为两类:  非梅毒  (类脂质血清反应)用正常牛心

免疫组化染色结果容易受哪些因素影响

   众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律,进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用,因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来,尤其是免疫组化染色实验,其结果很容易受某些因素影响。那么,免疫组化染色结果容易受哪些因素影响?    专家指出:免疫组化染色的结果,与组织的固定、抗原的修复、抗体的保存

免疫组化染色结果容易受哪些因素影响

   众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律,进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用,因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来,尤其是免疫组化染色实验,其结果很容易受某些因素影响。那么,免疫组化染色结果容易受哪些因素影响?    专家指出:免疫组化染色的结果,与组织的固定、抗原的修复、抗体的保

免疫组化的经验总结(1)-常见问题

免疫组织化学的概念: 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞

双重免疫组化实验原理及注意事项

  双重免疫组化是科研中的较好的一种免疫组化方法,其原理就是根据阳性表达部位和阳性表达区域不同所建立的一种直观的多色定位的染色方法。其标记的对象是两种或两种以上的细胞部位。主要标记部位如下:    1.膜+浆型    2.膜+核型    3.浆+核型    切不可膜+膜,核+核,以免影响效果和颜色重

双重免疫组化实验原理及注意事项

   双重免疫组化是科研中的较好的一种免疫组化方法,其原理就是根据阳性表达部位和阳性表达区域不同所建立的一种直观的多色定位的染色方法。其标记的对象是两种或两种以上的细胞部位。主要标记部位如下:    1.膜+浆型    2.膜+核型    3.浆+核型    切不可膜+膜,核+核,以免影响效

抗肽抗体的制备实验

提高免疫原性肽的抗血清,是最简单的方法,获得非隔离的蛋白质的抗体,例如,对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的,当隔离的抗原是困难或费时,或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。实验步骤:  将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠

酶与抗体的偶联实验

实验材料 抗体试剂、试剂盒 磷酸钠HRPO碳酸盐缓冲液过碘酸钠SASTrisEDTABSA甘油仪器、耗材 透析膜离心机实验步骤 1.  浓度≥1 mg/ml 抗体溶液对2 l 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液透析,于4℃缓慢摇动下过夜。2.  10 mg HRPO溶解于1 ml 0.1

体细胞杂交的所用方法

所用方法是:①根据双亲细胞的形态特征,用不同荧光染料标记,人工挑选或用荧光激活细胞分拣机分离。或通过显微操作直接挑选。②在合适的选择压下,只允许杂种细胞生长,淘汰双亲和同源融合细胞。如生长激素自主选择、代谢互补选择、白化互补选择、营养缺陷型互补选择、药物抗性互补选择等。

化学需氧量所用的氧化剂

一般测量化学需氧量所用的氧化剂为高锰酸钾或重铬酸钾,使用不同的氧化剂得出的数值也不同,因此需要注明检测方法。为了统一具有可比性,各国都有一定的监测标准。根据所加强氧化剂的不同,分别成为重铬酸钾耗氧量(习惯上称为化学需氧量,chemical oxygen demand,简称cod )和高锰酸钾耗氧量(

免疫组化实验中固定液的选择遵循哪些原则

免疫组化实验中固定液的选择是免疫组化成功与否的基础。用于免疫组化实验的固定液种类较多,性能各不一样。不同抗原,其稳定性各不相同,对固定液的耐受性 差异较大。所以,除要了解不同固定剂的特性外,不同的抗原和标本需经过反复试验,必要时可作多种固定液对比,从而选出理想的固定液。选择最佳固定液的标准 是:①最

免疫组化实验中固定液的选择遵循哪些原则

免疫组化实验中固定液的选择是免疫组化成功与否的基础。用于免疫组化实验的固定液种类较多,性能各不一样。不同抗原,其稳定性各不相同,对固定液的耐受性 差异较大。所以,除要了解不同固定剂的特性外,不同的抗原和标本需经过反复试验,必要时可作多种固定液对比,从而选出理想的固定液。选择最佳固定液的标准 是:①最

免疫组化质量控制之实验质控对照的设立

对于免疫组织化学染色的内部质控程序来说,主要的步骤便是对照的设立。只有设立阳性对照和阴性对照,才能确保免疫组织化学染色过程的准确性、抗体及相关试剂的有效性,并可以确认染色结果的真实性。由于免疫组织化学染色有可能出现假阳性和假阴性结果,因此每次实验都必须同时设立阳性对照和阴性对照,以达到质控的最佳效果

免疫组化步骤设计

你的一抗的生产商应该提供有实验方法,按照他们优化过的步骤来做最为明智。也可以网上搜索到标准的免疫组化步骤,但是所用抗体及封闭等试剂的浓度,孵育时间长度等还是要靠自己摸索,麻烦多多。如果样品是胰脏一般很容易得到阳性结果。

简述抗心肌抗体的检查过程

  检查方法:间接免疫荧光法  将荧光素标记在相应[de]抗体上,直接与相应抗原反应。  第一步,用未知未标记[de]抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合[de]抗体。  第二步,加上荧光标记[de]抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM

简述抗内膜抗体阳性的缓解方法

  当您的抗子宫内膜抗体检查为阳性的时候,此时不宜怀孕,建议您在治疗后再怀孕。一定要有信心并在医生指导下坚持治疗,保持好的心情。检查出抗子宫内膜抗体的女性,应该及时地治疗,女性可以尝试中医疗法进行治疗,尽快痊愈,早得贵子。

简述抗心肌抗体的注意事项

  不适宜人群:一般无特殊人群  检查前禁忌:抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  检查时注意:抽血后出现晕针症状如:头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水,待症状缓解后再进行体检。

简述乙肝表面抗体阳性的基础概述

  乙肝表面抗体阳性的基本概述:  乙肝表面抗体详解:乙肝表面抗体是人体的保护性的抗体,主要是乙肝病毒表面抗原刺激人体免疫系统而产生的抗体。它的出现,能中和掉人体内的乙肝病毒。具有保护人体的作用。其英文简写为HBsAb。  很多人都只知道乙肝五项检查中出现“+”不好,因而也会误认为乙肝表面抗体出现阳

简述封闭抗体的临床意义

  反复自然流产的发生与母体缺乏封闭抗体有关,流产次数越多的患者,其体内封闭抗体缺乏的可能性越大。患者体内缺乏抗配偶CD3、CD4、CD8抗原的封闭抗体,母体对胎儿产生强烈的排斥现,发生于孕早期可出现反复自然流产,孕晚期则可出现妊娠高血压疾病,胎儿宫内生长受限、甚至出现胎死宫内。因此对反复自然流产患

简述抗心肌抗体的临床意义

  异常结果:由于抗原未纯化,方法的非特异反应高,用间接免疫荧光法测得的抗心肌抗体主要见于活动性风湿热(阳性率40%-80%)、风湿性心脏病(阳性率15%-60%)、细菌性心内膜炎(83%)、心脏手术后(60%-100%)、心肌梗死(65%)、全身性红斑狼疮(35%)、类风湿性关节炎(33%)、甲亢

简述催化抗体在医学领域的应用

  随着对抗体酶研究的深入进行,抗体酶越来越显示出其在医学领域中的潜在应用价值。人们利用抗体酶催化药物在体内的还原,有利于机体对药物的吸收,并降低药品的毒副作用;将抗体酶技术和蛋白质融合技术结合在一起,设计出既有催化功能又有组织特异性的嵌合抗体,用于切除恶性肿瘤;将抗体酶直接作为药物,以治疗酶缺陷症

简述抗Sm抗体的临床意义

  抗Sm抗体对系统性红斑狼疮有高度特异性,且不论是否处于红斑狼疮活动期,抗Sm抗体检测均可显示出阳性,故可作为系统性红斑狼疮的标志性抗体。但红斑狼疮患者中抗Sm抗体阳性者仅占30%左右(20%~30%),故抗Sm抗体阴性时也不能排除系统性红斑狼疮诊断,要结合其他检查,符合诊断标准才能诊断。

简述单克隆抗体的制备过程

1.对小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠产生免疫反应;2.得到相应的B淋巴细胞;3.将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用特定的选择培养基进行筛选;4.在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂种细胞才能生长(这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体)5.