电镜技术法检测植物病毒的介绍

从20 世纪40 年代建立电子显微镜技术以来, 经过不断的改进和提高, 采用电子显微镜技术检测植物病毒已成为比较重要的病毒鉴定和检测手段。电子显微镜以电磁波为光源, 将感病植物组织制成检测样本, 利用短波电子流, 在电子显微镜下观察, 可根据病毒的形态、大小、内含体以及染病组织超微结构等诊断病毒的种类。分辨率可达到0.1 nm, 而病毒粒体大小为10~100 nm。因此, 应用电镜方法鉴定和检测病毒, 应该先对不同病毒组的形态和典型病毒的特点有所了解。电镜技术的先进性主要表现在取样比较简便, 需要时间短, 大多数病毒能通过制备样品和进行负染来鉴定。 [3] 但是对初学者来说, 掌握这种方法的难度比较大, 而且往往容易受到破碎细胞器的干扰而影响判断结果。用电镜观察时, 需要样品含有的病毒浓度较高, 因此被检病毒需要经过提纯, 即用超速离心机反复低温离心, 把病毒粒子提纯分离出来。提纯液可用于电镜制片, 观察病毒形态结构。......阅读全文

电镜免疫胶体金―银法染色技术

免疫胶体金―银染色(immunogold-sliverstaining)技术系20世纪80年代Holgate将免疫 金染色和银显影方法结合而建立的一种新型检测技术,亦可用于电镜包埋前染色。其基本原理是先进行免疫胶体金染色标记抗原,使其结合在组织细胞抗原所在位置,然后进行物理显影,当显影剂中的对

显微技术突破揭秘植物病毒组装

  最近,一项关于“一种植物病毒如何组装”的新研究,可以为将来病毒载药进入人体的应用,奠定基础。  这项研究,是由来自英国利兹大学Astbury结构分子生物学中心和英国John Innes中心的一个研究小组完成,描述了豇豆花叶病毒CPMV)的空版结构,以及可让病毒构建自我并压缩其基因组的分子“胶水”

气流法检测植物呼吸速率实验

实验方法原理:气流法测定植物呼吸速率的原理,是使不含CO2的稳定气流通过装有植物材料呼吸室,将植物呼吸释放出来的CO2带入CO2吸收瓶,被氢氧化钡定量吸收,生成碳酸钡白色沉淀,然后用标准草酸滴定剩余的氢氧化钡。根据实验前后二次测定草酸用量之差值,即可求出植物样品释放的CO2量,据此即可求出植物呼吸速

气流法检测植物呼吸速率实验

实验方法原理气流法测定植物呼吸速率的原理,是使不含CO2的稳定气流通过装有植物材料呼吸室,将植物呼吸释放出来的CO2带入CO2吸收瓶,被氢氧化钡定量吸收,生成碳酸钡白色沉淀,然后用标准草酸滴定剩余的氢氧化钡。根据实验前后二次测定草酸用量之差值,即可求出植物样品释放的CO2量,据此即可求出植物呼吸速率

气流法检测植物呼吸速率实验

实验方法原理 气流法测定植物呼吸速率的原理,是使不含CO2的稳定气流通过装有植物材料呼吸室,将植物呼吸释放出来的CO2带入CO2吸收瓶,被氢氧化钡定量吸收,生成碳酸钡白色沉淀,然后用标准草酸滴定剩余的氢氧化钡。根据实验前后二次测定草酸用量之差值,即可求出植物样品释放的CO2量,据此即可求出植物呼吸速

断裂—标记免疫电镜技术介绍

此法是先进行冷冻断裂,再做免疫标记,从而可以对断裂开的各种膜结构及胞浆断面进行标记。(1)临界点干燥法①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4℃1~2h,PBS冲洗3min×3。如为细胞悬液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA凝胶化,将凝胶切成2mm左右的小块,用30%的甘油—PBS浸透

扫描电镜观察植物

植物样品往往都要进行复杂的脱水处理过程——固定、脱水和临界点干燥,即使这样,样品形状还是会有一定的收缩。对于这个问题,一个潜在的解决方案是使用一个能够控制温度的样品台,将温度设置在零下十几或零下二十几度,使得含水样品迅速凝结成固体,然后在背散射模式下直接进行观察。 SEM在植物科学领域的另一个应用是

透射扫描电镜检测技术服务

透射电子显微镜在材料科学、生物学上应用较多。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,样品的密度、厚度等都会影响到后的成像质量,必须制备更薄的超薄切片,通常为50~100nm。所以用透射电子显微镜观察时的样品需要处理得很薄。常用的方法:超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。对于液体样品

免疫电镜术的技术方法介绍

中文名称免疫电镜术英文名称immunoelectron microscopy;IEM定  义一种与免疫化学方法相结合的电镜法。样品先作免疫化学染色,再用电镜观察。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

冷冻蚀刻电镜技术的优缺点介绍

优点①样品通过冷冻,可使其微细结构接近于活体状态;②样品经冷冻断裂蚀刻后,能够观察到不同劈裂面的微细结构,进而可研究细胞内的膜性结构及内含物结构;③冷冻蚀刻的样品,经铂、碳喷镀而制备的复型膜,具有很强的立体感且能耐受电子束轰击和长期保存。缺点冷冻也可造成样品的人为损伤;断裂面多产生在样品结构最脆弱的

植物病毒的特点

植物细胞最外层有以纤维素为材料构成的细胞壁,足以抵抗病毒的侵入,因而植物病毒的特点之一是必须通过寄主的伤口方能侵入。实验室内常用摩擦叶面造成轻微伤口来接种某些植物病毒。农田操作、人口移植、摘心、整枝、打杈时手沾染含病毒的汁液,均可造成病毒传染。病毒也可通过嫁接或植物根在土壤砂砾中伸长时所造成的伤口而

植物病毒的概念

植物病毒是一种病毒。早在1576年就有关于植物病毒病的记载,举世闻名的、美丽的荷兰杂色郁金香,实际上就是现在所谓郁金香碎色花病毒造成的。

电镜法粒度分析

优点是可以提供颗粒大小,分布以及形状的数据。此外,一般测量颗粒的大小可以从1纳米到几个微米数量级。并且给的是颗粒图像的直观数据,容易理解。但其缺点是样品制备过程会对结果产生严重影响,如样品制备的分散性,直接会影响电镜观察质量和分析结果。电镜取样量少,会产生取样过程的非代表性。适合电镜法粒度分析的仪器

乌克兰研发出植物病毒感染诊断技术

  温室条件下,恒定温度、光照和水分有助于植物病毒载体——昆虫和线虫的繁殖,增加植物栽培密度能够导致病原体加剧传递,增加植物发生疾病的风险。病毒感染可导致细菌和真菌病状进一步发展,及时诊断病毒感染可对农作物起到有效保护。   乌克兰科学家最近研发出一种在田间和温室条件下植物病毒感染诊断技术。该技术通

植物病毒检疫技术突破填补国内空白

经过半年多的努力,中山检验检疫局技术中心分子生物学实验室27日传出喜讯,该实验室已经制备出我国最新颁布的检疫性植物病毒李痘病毒、李属坏死环斑病毒和侵染香蕉最为严重的病毒之一黄瓜花叶病毒的抗血清,价值超亿元,该项技术填补了广东检验检疫系统在全国植物病毒方面无自制抗血清的空白。 据《南方都市报》报道,

乌克兰研发出植物病毒感染诊断技术

   温室条件下,恒定温度、光照和水分有助于植物病毒载体——昆虫和线虫的繁殖,增加植物栽培密度能够导致病原体加剧传递,增加植物发生疾病的风险。病毒感染可导致细菌和真菌病状进一步发展,及时诊断病毒感染可对农作物起到有效保护。   乌克兰科学家最近研发出一种在田间和温室条件下植物病毒感染诊断技术。该技术

病毒透射电镜病毒标本制备

实验方法原理 病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料 病毒试剂、试剂盒 稀释液仪器、耗材 透射电镜实验步骤 悬液应尽量除去杂质如培养基残渣,细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等,这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱

用病毒检测仪为植物查明“病因”

    我们知道,真菌病害能对植物产生严重破坏,传统的农业病害防治大多是依 赖于农民自身的经验,通过对病害病症的观测,从而确定用药的品种及用量,这种通过病症判断的方法是极其不准确的,因为很多的病害病症是极其相似的,农民通 过病症去判断很容易出现药用了却没有效果的现象。因此对于农业病害的判断问题,可以

植物固醇的检测方法介绍

早期的植物固醇检测方法有毛地黄皂甙法、酶法和可见分光光度法等。毛地黄皂甙法的检测原理为一分子固醇与一分子毛地黄皂甙形成白色络合物,其操作复杂且灵敏度低。酶法的检测原理为将固醇类物质皂化后,在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成固醇酮和过氧化氢,经过氧化物酶催化,与4-氨基安替比林和酚发生颜色反应,然后在50

台湾青年开发非侵入式植物病毒检测仪-3秒检测兰花病毒

  西装革履的郭泓毅手持纤细的探头,幽蓝的激光光束在蝴蝶兰叶片扫过。图片来源于网络  “只要3秒钟,通过全面性光谱探测,就可判断兰花是否被病毒感染。”这位年轻的台湾创业者说,团队研发的这套快速、简单而又准确的检测系统,可以帮助兰花生产企业解决品质管理难题。  还不满25岁的郭泓毅是台湾艾思博生物科技

徕创生物扫描电镜检测透射电镜技术服务

透射电镜是一种高分辨率、高放大倍数的显微镜,是材料科学研究的重要手段,能提供极微细材料的组织结构、晶体结构和化学成分等方面的信息。透射电镜的分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万~几十万倍。透射电镜简介:透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM

TERS技术最新应用——病毒检测

  距离2020年全球最大公共卫生事件——新冠病毒的爆发已接近半年,病毒仍在肆虐并在全球蔓延,感染人数也持续攀升。尽管欧美一些国家的新增死亡病例有所下降,然而全球的新增确诊人数却在急速上升。疫情何时能控制住仍未可知,但我们有理由期待一个更美好的明天。   在全球医护人员都为抗击疫情奋战的同时,

新冠病毒又出新的检测技术?病毒检测专家为你解答!

  检测,对于疾病防控就具有重大意义。美国的新冠检测,从开始每日检测数十人到如今每日检测近100万人!  随着检测量不断增长,检测的技术也在快速进步,截止2020年8月6日,已经有168个分子检测手段被美国FDA批准可以在紧急状态下(emergency use authorization,简称EUA

电镜技术让你了解新冠病毒图片长啥样

  不久前,英国世界权威医学杂志《柳叶刀》就在公布了新冠病毒的彩色样张。  美国国家过敏和传染病研究所落基山实验室(NIAID-RML)也在2月宣布,其位于蒙大拿州的洛矶山实验室,11日在扫描和透射电子显微镜上拍摄了新冠病毒(SARS-CoV-2)的图像,清晰显示出新冠病毒用来入侵宿主细胞的棘突蛋白

用于检测植物组织RNA的原位杂交法

用于检测植物组织RNA的原位杂交法(一)组织切片制备l      植物组织的甲醛固定和包埋1.将植物组织切成小块,立即放入一个装有10~50ml固定剂溶液的烧杯中,把烧杯放到真空脱水机内。调节真空度以形成一个温和的真空,然后慢慢恢复常压。微量便于固定剂渗入组织,必须反复真空和非真空状态。待固定剂充分

植物病毒的分子生物学方法检测

分子生物学检测法是通过检测病毒核酸( DNA,RNA) 来证实病毒的存在。由于是从核酸的水平来检测病毒, 所以比血清学方法的灵敏度更高, 可检测到皮克(pg)级甚至飞克(fg)级, 并且特异性更强; 检测病毒的范围更广, 对各种病毒、类病毒都可以检测, 并且可以进行大批量的样本检测。由于分子生物学检

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃ 低温退火,

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃

酶联法检测人类免疫缺陷病毒

[测定方法] ELISA法 [方法学原理] 在微孔板上预包被高纯度基因重组HIV(1型十Ⅱ型),与样品中抗HIV抗体反应,同时加入HRP标记HIV(1型+Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用显色。通过酶标仪检测吸光度(OD值)从而判定样品中HIV抗体的存在与否。 [标本准备] 静脉抽血2ml,不

PCR法检测乙肝病毒(HBV)

多聚酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃低温退火,