关于杆状病毒表达系统的简介

杆状病毒是近年来被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统,本文就杆状病毒表达系统的生物学特性、转染载体、重组病毒的筛选、基因表达调控及其发展应用等方面作一概述。 体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统。原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞系统,它操作简便,周期短,收益大,表达产物稳定,但是表达基因的分子量有限,不宜过大,且不能对表达产物进行一些翻译后加工作用。真核细胞系统包括COS 细胞、CHO细胞、酵母细胞和昆虫细胞等表达系统。昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)独特的生物学特性,日益受到人们的重视。昆虫细胞培养及操作较简便,成本低,因此被广泛用于生产基因工程产品。本文就该系统的特性、技术方法以及应用新进展作一综述。......阅读全文

关于基因表达的概念简介

  基因表达(gene expression)是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。基因表达产物通常是蛋白质,所有已知的生命,都利用基因表达来合成生命的大分子。  基因表达产物通常是蛋白质,但是非蛋白质编码基因如转移RNA(tRNA)或小核RNA(snRNA)基因的表达产物是功能性RNA

关于全自动蛋白表达定量分析系统的简介

  全自动蛋白表达定量分析系统是一种用于农学、畜牧、兽医科学、药学领域的分析仪器,于2017年12月1日启用。  一、全自动蛋白表达定量分析系统的技术指标:  1、总运行时间:≤5个小时;  2、上样数量:24个;  3、抗体体积:每个样品需一抗和二抗体积均为10μL(指稀释后的抗体体积);  4、

关于蛋白表达系统的基本介绍

  蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系。通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。一般由以下几个部分组成:  1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为细菌、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同,适合表达蛋白的种类也不相同。  2、载体。载体的种类与宿主相匹配。根

关于蛋白表达系统的分析介绍

  原核蛋白表达系统既是最常用的表达系统,也是最经济实惠的蛋白表达系统。原核蛋白表达系统以大肠杆菌表达系统为代表,具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点,缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制,如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠,得到具有生物活性的蛋白的几率较小。  酵母蛋

关于基因表达调控的技术简介

  基因调控是现代分子生物学研究的中心课题之一。因为要了解动植物生长发育规律。形态结构特征及生物学功能,就必须搞清楚基因表达调控的时间和空间概念,掌握了基因调控机制,就等于掌握了一把揭示生物学奥秘的钥匙。基因表达调控主要表现在以下几个方面:   ①转录水平上的调控;   ②mRNA加工、成熟水平

杆状病毒系统蛋白质表达实验——蛋白质生产高峰期的确定

实验方法原理因为重组蛋白的表达受多角体启动子的调节,而多角体启动子在病毒裂解循环的晚期才被激活,所以重组蛋白在感染后期才表达。重组蛋白通常在感染后 15~24 h之间即可检测到,并可积累至感染后 40 h 左右,然后积累水平下降。由于不同的蛋白质在昆虫细胞中有不同的稳定性,推荐用这个系统测定蛋白质积

关于甲醇酵母表达系统的基本介绍

  甲醇酵母基因表达系统是一种最近发展迅速的外源蛋白质生产系统。甲醇酵母是可利用甲醇作为唯一碳源的酵母,主要有H.Polymorpha、Candida Bodinii、Pichia Pastoris三种,其中Pichia Pastoris作为基因表达系统使用得最多、最广泛。与以往的基因表达系统相比,

关于大肠杆菌表达系统的介绍

  在各种表达系统中,最早被采用进行研究的是大肠杆菌表达系统,也是掌握最为成熟的表达系统,大肠杆菌表达系统以其细胞繁殖快速产量高、IPTG诱导表达相对简便等优点成为生产重组蛋白的最常用的系统。  对于表达不同的蛋白,需要采用不同的载体。已知的大肠杆菌的表达载体可分为非融合型表达载体和融合型表达载体两

关于酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)表达系统的介绍

  酿酒酵母(Saecharomycescerevisiae)在酿酒业和面包业的使用已有数千年的历史,被认为是GRAS(generally recognized as safe)生物,不产生毒素,已被美国FDA确认为安全性生物,但酿酒酵母难于高密度培养,分泌效率低,几乎不分泌分子量大于30 kD的外

关于甲醇酵母表达系统的关键因素—表达载体的介绍

  首先,甲醇酵母中没有稳定的质粒,所以其表达载体采用整合型质粒。利用醇氧化酶(甲醇代谢的关键酶)基因-1(AOX1)的启动子(PAOX1)和转录终止子(3′AOX1)构建成整合型表达载体。PAOX1是一个极强的启动子,醇氧化酶的产量最高可占甲醇酵母中可溶性蛋白质的30%[2],所以能使外源蛋白质在

关于不同蛋白表达系统的特点分析介绍

  各种表达系统各有优缺点,使用大肠杆菌表达系统能够在较短时间内获得表达产物,且所需的成本相对较低;但目的蛋白常以包涵体形式表达,产物纯化困难,且原核表达系统翻译后加工修饰体系不完善,表达产物的生物活性较低。酵母和昆虫细胞表达系统蛋白表达水平高,成本低,但翻译后加工修饰体系与哺乳动物不完全相同。哺乳

甲醇酵母表达系统的高效表达特性

  已有多种蛋白质的基因在该表达系统中克隆成功,包括蛋白酶、酶抑制剂、受体、单链抗体等。尽管各种外源蛋白质产生的水平不一,但各种蛋白质在甲醇酵母中的产生水平均为在细菌、昆虫或哺乳动物等表达系统中产量的10~100倍[2]。如表皮生长因子(EGF)在酿酒酵母中的产量为7.4mg/L,而在甲醇酵母中为4

关于臭氧系统的简介

  主要由臭氧发生系统、臭氧气源系统、冷却水系统、臭氧投加系统、尾气破坏系统、系统控制等组成,主要用于水深度处理。空气净化所用的是主要元件是一个简单的臭氧发生器  随着居民生活水平的不断提高和健康条件的日益改善,饮用水水质标准要求亦愈来愈高,常规的絮凝、沉淀、过滤、消毒净水工艺,已难以满足水质不断提

无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音

   1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。    到80年代中期Sp

无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音

1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。到80年代中期Spirin等对其进

关于细胞骨架系统的基因表达作用介绍

  实验证明,新合成的DNA有90%与细胞核骨架结合着。有人推想,DNA复制的复合体可能被锚定在核骨架上,并依靠核骨架作为空间支架。只有结合在核骨架上的活性基因才能转录。因为核骨架对DNA分子螺旋结构的解旋,提供了支撑点,这种更合适的DNA排布空间,使得DNA与聚合酶有更多的接触面。  还有人发现,

CHO细胞表达系统与酵母细胞表达系统比较

 CHO细胞表达系统与毕赤酵母表达系统是当前发展前景看好的两个表达系统,为了能够更加直观地对两个表达系统有一定的认识,特意在此篇中对两个表达系统作一定的比较,从而能够更进一步的对两个表达系统有更深的了解1.CHO细胞表达系统       (1)优点       CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生

重组蛋白真核表达系统与原核表达系统的区别

 重组蛋白真核表达采用原核表达系统进行研究,主要方法是将已克隆到目的基因DNA的片段的载体转化到细菌中,通过IPTG诱导和终纯化获得所需的目的蛋白。其优点是可以在短时间内获得基因表达产物,所需成本相对较低。   目前的表达系统各有利弊,但一般理想的表达系统满足以下几点:一是特异性,不受其他内源性因素

关于大肠杆菌表达系统的基本信息介绍

  在各种表达系统中,最早被采用进行研究的是大肠杆菌表达系统,也是掌握最为成熟的表达系统,大肠杆菌表达系统以其细胞繁殖快速产量高、IPTG诱导表达相对简便等优点成为生产重组蛋白的最常用的系统。  对于表达不同的蛋白,需要采用不同的载体。已知的大肠杆菌的表达载体可分为非融合型表达载体和融合型表达载体两

关于微波消解系统的简介

  微波消解系统可用于食品、纺织、塑料、地质、冶金。  微波是指频率为300MHz-300GHz的电磁波,是无线电波中一个有限频带的简称,即波长在1米(不含1米)到1毫米之间的电磁波,是分米波、厘米波、毫米波和亚毫米波的统称。微波频率比一般的无线电波频率高,通常也称为“超高频电磁波”。微波作为一种电

关于ABO血型系统的简介

  1900~1902年奥地利医学家K.兰德施泰纳等应用红 细胞凝集试验首次发现红细胞表面有两种抗原──A 抗原和B抗原。A型、B型、AB型和O型是人类中第一个被发现的血型系统,为单一座位上的IA、IB和i三个复等位基因所控制,构成六种基因型和四种表型。

关于网状内皮系统的简介

  网状内皮系统是在1913--1914年Ashoff在给活体动物注射一些染料后发现整个机体的细胞中一部分着色,一部分不着色,他把着色的细胞统称为网状内皮系统,但经过研究证明网状细胞和内皮细胞之间互不依赖,其性质和功能也不相同。简称RES系统。  一、网状内皮系统的解释:  将一些能摄入活体染料的网

真核表达系统的特点

真核表达系统的特点是蛋白翻译后加工机会多,甚至可被改造成人源型;真核细胞易被转染,具有遗传稳定性和可重复性;产物可被分泌,提纯简单,成本低。

新颖的融合蛋白表达系统

 研究者们在分离到某一基因后,要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达——即:有目的性地合成外源基因产物。在重组DNA技术的发展早期,人们认为在基因的前面有一个强启动子和一个起始密码子就足以在大肠杆菌中获得很好的表达。随后,认识到获得有效的翻译所需的条件要复杂得多,除了要有强启动子和起始密码

关于蛋白表达系统分类及优劣分析

  原核蛋白表达系统既是最常用的表达系统,也是最经济实惠的蛋白表达系统。原核蛋白表达系统以大肠杆菌表达系统为代表,具有遗传背景清楚、成本低、表达量高和表达产物分离纯化相对简单等优点,缺点主要是蛋白质翻译后缺乏加工机制,如二硫键的形成、蛋白糖基化和正确折叠,得到具有生物活性的蛋白的几率较小。  酵母蛋

关于大肠杆菌重组蛋白表达系统解答

大肠杆菌(E.coli)重组蛋白表达技术经过多年的发展,相对于其他表达体系,算是非常成熟的一个体系。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点:遗传背景清楚;易于培养和控制;转化操作简单;表达水平高;成本低;周期短。本篇将对大肠杆菌重组蛋白表达系统的常见技术问题进行一一解答。1:大肠杆菌表达体系的优点是什么

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用

真核细胞表达系统1

自上世纪70年代基因工程技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成,越来越多的基因被发现,其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的基因是研究基

甲醇酵母基因表达系统

 1 甲醇酵母表达系统的特点  1.1 宿主  七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白(SCP),有很好的发酵基础,菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源,廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长,其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径

重组蛋白表达系统

  选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。   目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用