位点特异重组的重组机制介绍

位点特异性重组本质上是两个重组位点的四股DNA发生两次切割和两次连接的过程,所需的关键成分是重组酶( recombinase),此外还需要一些蛋白因子。这里以入噬菌体DNA与大肠杆菌DNA整合而进入溶原状态为例,介绍位点特异性重组机制(图2-33)。 1.第一次切割重组酶(又称入噬菌体整合酶,integrase,356AA,由入噬菌体基因组编码)四聚体与两个重组位点(入噬菌体重组位点attP和大肠杆菌重组位点au,B有15bp相同的核心序列)结合,切断两个重组位点一股DNA特定的磷酸二酯键,形成两个切口,切口3’端的磷酸基与重组酶活性中心Tyr342的羟基以磷酸酯键结合。 2.第一次连接两个切口的5 7端交换,与对方3’端连接,形成HoUiday结构。 3.第二次切割重组酶切断两个重组位点另一股DNA特定的磷酸二酯键,形成两个切口。切口3 7端的磷酸基与重组酶活性中心Tyr342的羟基以磷酸酯键结合。 4.第二次连接......阅读全文

位点特异重组的重组机制介绍

  位点特异性重组本质上是两个重组位点的四股DNA发生两次切割和两次连接的过程,所需的关键成分是重组酶( recombinase),此外还需要一些蛋白因子。这里以入噬菌体DNA与大肠杆菌DNA整合而进入溶原状态为例,介绍位点特异性重组机制(图2-33)。  1.第一次切割重组酶(又称入噬菌体整合酶,

关于位点特异重组的重组效应简介

  位点特异性重组既可以发生在一个DNA分子中,也可以发生在两个DNA分子间。重组酶识别位点有方向性,所以重组时两个重组位点的排列有方向性。  1.插入 当位点特异性重组发生在两个闭环DNA之间或一个闭环DNA与一个线性DNA之间时,重组的结果是DNA插入(即整合),并且插入之后在两端形成同向重复序

关于位点特异重组的简介

  位点特异性重组(sile-specific recombinalion)是指发生在特定的DNA序列之间的片段交换,序列之间不要求有同源性。位点特异性重组发生于包括基因表达调控、胚胎发育过程中的程序性基因重排、免疫球蛋白基因的重排、一些病毒DNA和质粒复制周期中发生的整合与解离等过程中。

位点特异性重组的简介

  位点特异性重组(site-specific recombination)是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会,重组也只发生在同源的短序列的范围之内,需要位点特异性的蛋白质分子参与催化,重组的蛋白不是rec 系统而是int 等,如噬菌体l 的定点插入。重组时发生精确的切割、连接反应

关于位点特异性重组的特点介绍

  ①这种交换是可逆的,原先存在的DNA顺序全部被保存下来,并无丢失;  ②噬菌体和细菌的DNA之间有一段很短的同源序列,重组交换必须通过其中的一个特定的核苷酸。这两个特点也就是位点特异性重组的共同特点。

关于位点特异性重组的整合介绍

  λ噬菌体编码λ整合酶(integrase)。这个酶能指导噬菌体DNA插入E.coli染色体中。这种插入作用是通过两个DNA分子的特异位点进行重组,将两个环状DNA分子变成一个大环。在噬菌体感染的早期即有大量整合酶产生,故几乎所有被感染的细胞都发生整合作用。这种作用可用体外模型来进行实验。用四种成

位点特异性重组的整合酶和IHF的介绍

  在att上都有特定的结合位点,体外实验也证明这两种蛋白质结合在attDNA的特定位点上。每一次重组过程需要20-40个整合酶分子及约70个IHF分子。故可能这两种蛋白质不仅是作为酶(发挥催化作用),而且在每次重组中都要形成某种复合物结构。通过缺失实验,证明attP至少要约250bp长,太短将使其

关于位点特异性重组的基因的表达调控介绍

  如果一个DNA分子上两个特异位点之间发生重组,其后果有两种可能性:两个位点之间的节段或被丢失,或被颠倒。有些生物能够利用这种重组倒置来控制基因的表达。因为DNA的一正一倒两种排列法可以相应地表达两种不同的蛋白质,细胞就可根据需要作出选择。奇怪的是,利用这种机制所调节的蛋白质往往都位于生物的体表。

关于位点特异性重组的整合和切出的介绍

  attB由称为BOB’的序列组成,而attP由POP'组成。O是核心序列,是attB和attP所共同的。而其两侧的序列是B,B’和P,P’,被称为臂。噬菌体DNA是环状的,重组时被整合入细菌染色体中,成为线性序列。前病毒的两侧是两个新的杂种att位点,左侧称为attL,由BOP’组成,而

简述位点特异性重组的最终结果

  其结果是G(+)和G(-)噬菌体对不同株E.coli有不同的特异性。在G(+)方向,基因S和U表达,其产物使噬菌体可吸附在E.coliK12上,但不能吸附在E.coliC上,反之,在G(-)方向,基因S’和U’表达,噬菌体可吸附在E.coliC上,而不能吸附在E.coliK12上。各蛋白质的分子

关于位点专一重组的基本介绍

  λ噬菌体感染大肠杆菌后,或是进入裂解生长,或是进入溶原生长。当噬菌体裂解宿主细胞的功能受到抑制,噬菌体DNA整合进宿主染色体并随宿主染色体而进行复制,或作为一个独立的郊犹?/SPAN>(如P22)。这称为溶原性(lysogeny),这类噬菌体称为溶原性噬菌体(lysogenic phage)。当

概述位点专一重组的相关信息

  溶原状态同裂解状态是可以转换的。当λ噬菌体DNA整合在宿主基因组中,则进入溶原状态;当噬菌体DNA从宿主基因组中切离下来,则转入裂解状态。这种整合和切离,都是通过DNA和细菌DNA特定的附着位点之间的重组来实现的。大肠杆菌DNA上的att(attach)位点记为attλ或attB,长度为23 b

关于DNA重组的重组修复介绍

  有丝分裂和减数分裂期间由各种外源因子(例如紫外线,X射线,化学交联剂)引起的DNA损伤都可以通过同源重组修复机制(HRR)来修复。  人类和啮齿动物中减数分裂期间HRR所必需的基因产物的缺陷会导致不育 。人类HRR所必需的基因产物(例如BRCA1和BRCA2)的缺陷同时会增加患癌症的风险。在细菌

DNA重组的作用机制

遗传重组由许多不同的酶催化。重组酶是DNA重组过程中催化链转移步骤的关键酶。 RecA是在大肠杆菌中发现的主要重组酶,负责修复DNA双链断裂(DSBs)。在酵母和其它真核生物中,修复DSB需要两种重组酶。 RAD51蛋白是有丝分裂和减数分裂重组所必需的,而DNA修复蛋白DMC1对减数分裂重组具有特异

关于基因重组的自然重组的介绍

  自然界不同物种或个体之间的基因转移和重组是经常发生的,它是基因变异和物种进化的基础。自然界的基因转移的方式有:  接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA就可从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌),这种类型的DNA转移称为接合作用(conjugation )。  转化作用(

简述DNA重组的机制内容

  遗传重组由许多不同的酶催化。重组酶是DNA重组过程中催化链转移步骤的关键酶。 RecA是在大肠杆菌中发现的主要重组酶,负责修复DNA双链断裂(DSBs)。在酵母和其它真核生物中,修复DSB需要两种重组酶。 RAD51蛋白是有丝分裂和减数分裂重组所必需的,而DNA修复蛋白DMC1对减数分裂重组具有

细胞重组的介绍

  细胞重组由不同细胞的核体与胞质体在融合因子介导下并合形成完整细胞的技术.对研究真核细胞的核、质关系及基因转移等问题具有重要意义。应用化学物质(如细胞松弛素B或秋水仙碱)并结合机械力(如离心力等),把细胞的核与胞质部分分开。分离出来的核,带有少量胞质,并围有质膜,称“核体”或“小细胞”。有些核体能

分子的重复机制异位重组

减数分裂过程中未对齐的同源染色体之间发生的不平等交叉引起的复制称为异位重组。不平等交叉是在基因组中对部分区域DNA片段进行复制最有效的方法。发生这种情况的可能性取决于两条染色体之间重复元件的共享程度。该重组的产物是交换位点的重复和相互删除。异位重组通常由复制断裂点处的序列相似性介导,形成直接重复。重

DNA-同源重组的关键分子机制

  蛋白质与植物基因研究国家重点实验室研究团队揭示 DNA 同源重组的关键分子机制  作为三大DNA代谢途径(DNA 复制、重组、损伤修复)之一,DNA同源重组(Homologous Recombination)是生命体的基本生物事件。它在细胞生长、减数分裂、配子形成、物种进化、DNA双链断裂修复、

简述转座重组的转座机制

  细菌转座子有两种转座机制:简单转座和复制转座。  1.简单转座( simple transposilion) 转座酶将转座子从原位点切下,插入被转座酶错位切割的转座位点,经过填补之后,两端形成短的同向重复序列(4~13bp)。原位点或被连接修复,或所属DNA被降解。降解通常是致死性的。  2.复

关于DNA重组的减数分裂重组的介绍

  在减数分裂早期出现的四种染色单体中的两种(前期I)彼此配对并且能够相互作用。重组由双链断裂引发。其它类型的DNA损伤也可能引发重组。例如,交联剂如丝裂霉素C引起链间交联可以通过HRR修复,引发重组。  重组产物有两种:染色体侧翼区域被交换的“交叉”(CO)型和染色体侧翼区域未被交换的“非交叉”(

重组-DNA-技术介绍

中文名称重组 DNA 技术英文名称recombinant DNA technique定  义在体外将两个或多个不同的DNA片段全部或部分构建成一个DNA分子的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

基因重组和DNA重组区别

基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。 在人类的生殖细胞中发现的46条染色体发生在生物体内基因的交换或重新组合。基因重组是生物遗传变异的一种机制,包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。DNA重组指DNA分子内或分子间发生的遗传

基因重组的相关介绍

  基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。  其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生于亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份

重组疫苗的基本介绍

重组疫苗(recombination vaccines)是指随着过去二十年来遗传学的飞速发展,通过遗传学重组机制来生产的疫苗。为了解决传统疫苗存在的问题,降低免疫原性,提高安全性,减少治疗时间,人们提出一种新型的SIT 方法———免疫重组疫苗。随着分子生物学的发展,编码大多数过敏原的cDNA 被发现

重组疫苗的应用介绍

重组疫苗是将主要的过敏原重组在一起,代替过敏原提取物达到脱敏的目的,又称为重组过敏原疫苗。但无论是抗原识别受体(BCR 或TCR),还是特异性抗体分子(IgE 或IgG),所识别抗原的位置均不是完整的抗原分子,而是一段特定的氨基酸序列,该段序列称为抗原表位。与此同时,随着人们对过敏原研究的深入,许多

重组疫苗的应用介绍

最初,重组疫苗是将主要的过敏原重组在一起,代替过敏原提取物达到脱敏的目的,又称为重组过敏原疫苗。但无论是抗原识别受体(BCR 或TCR),还是特异性抗体分子(IgE 或IgG),所识别抗原的位置均不是完整的抗原分子,而是一段特定的氨基酸序列,该段序列称为抗原表位。与此同时,随着人们对过敏原研究的深入

重组频率定位法介绍

原理和在高等动植物中用杂交子代中重组频率的高低来计算两个基因间的距离没有不同。不过在微生物中一个菌落或一个噬菌斑代表一个个体,因而便于通过大量的杂交子代的观察来进行精细结构分析;而且往往采用选择性培养方法淘汰没有发生重组的亲本,使分析的效率和精密度进一步提高。不过精细结构的重组频率容易受到突变位置本

同源重组法技术介绍

同源重组法:同源重组(homologous recombination)是将外源基因定位导入受体细胞的染色体上,在该座位因有同源序列,通过单一或双交换,新基因片段替换有缺陷的片段,达到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁组装一Neo基因,则在同源重组后,因有Neo基因,可在含有新霉素(neomyci

DNA重组

目的:简单介绍了DNA重组技术的一些方法。包括重组质粒、PCR等。包括细胞结构、DNA,DNA如何改点等。