关于位点专一重组的基本介绍

λ噬菌体感染大肠杆菌后,或是进入裂解生长,或是进入溶原生长。当噬菌体裂解宿主细胞的功能受到抑制,噬菌体DNA整合进宿主染色体并随宿主染色体而进行复制,或作为一个独立的郊犹?/SPAN>(如P22)。这称为溶原性(lysogeny),这类噬菌体称为溶原性噬菌体(lysogenic phage)。当噬菌体进入宿主细菌后以一种失控状态进行复制,宿主染色体被降解作为噬菌体DNA合成的原料,宿主的蛋白质合成机构也被接管去制备成熟噬菌体颗粒的组成成分,组装成许多病毒颗粒,最后宿主细胞裂解而释放出来,这是裂解反应。......阅读全文

关于位点专一重组的基本介绍

  λ噬菌体感染大肠杆菌后,或是进入裂解生长,或是进入溶原生长。当噬菌体裂解宿主细胞的功能受到抑制,噬菌体DNA整合进宿主染色体并随宿主染色体而进行复制,或作为一个独立的郊犹?/SPAN>(如P22)。这称为溶原性(lysogeny),这类噬菌体称为溶原性噬菌体(lysogenic phage)。当

概述位点专一重组的相关信息

  溶原状态同裂解状态是可以转换的。当λ噬菌体DNA整合在宿主基因组中,则进入溶原状态;当噬菌体DNA从宿主基因组中切离下来,则转入裂解状态。这种整合和切离,都是通过DNA和细菌DNA特定的附着位点之间的重组来实现的。大肠杆菌DNA上的att(attach)位点记为attλ或attB,长度为23 b

位点特异重组的重组机制介绍

  位点特异性重组本质上是两个重组位点的四股DNA发生两次切割和两次连接的过程,所需的关键成分是重组酶( recombinase),此外还需要一些蛋白因子。这里以入噬菌体DNA与大肠杆菌DNA整合而进入溶原状态为例,介绍位点特异性重组机制(图2-33)。  1.第一次切割重组酶(又称入噬菌体整合酶,

关于位点特异重组的重组效应简介

  位点特异性重组既可以发生在一个DNA分子中,也可以发生在两个DNA分子间。重组酶识别位点有方向性,所以重组时两个重组位点的排列有方向性。  1.插入 当位点特异性重组发生在两个闭环DNA之间或一个闭环DNA与一个线性DNA之间时,重组的结果是DNA插入(即整合),并且插入之后在两端形成同向重复序

位点专一诱变的定义

中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定  义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

位点专一诱变的定义

中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定  义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

位点专一诱变的概念

中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定  义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

关于位点特异重组的简介

  位点特异性重组(sile-specific recombinalion)是指发生在特定的DNA序列之间的片段交换,序列之间不要求有同源性。位点特异性重组发生于包括基因表达调控、胚胎发育过程中的程序性基因重排、免疫球蛋白基因的重排、一些病毒DNA和质粒复制周期中发生的整合与解离等过程中。

什么是位点专一诱变?

中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定  义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

关于位点特异性重组的特点介绍

  ①这种交换是可逆的,原先存在的DNA顺序全部被保存下来,并无丢失;  ②噬菌体和细菌的DNA之间有一段很短的同源序列,重组交换必须通过其中的一个特定的核苷酸。这两个特点也就是位点特异性重组的共同特点。

关于位点特异性重组的整合介绍

  λ噬菌体编码λ整合酶(integrase)。这个酶能指导噬菌体DNA插入E.coli染色体中。这种插入作用是通过两个DNA分子的特异位点进行重组,将两个环状DNA分子变成一个大环。在噬菌体感染的早期即有大量整合酶产生,故几乎所有被感染的细胞都发生整合作用。这种作用可用体外模型来进行实验。用四种成

核酶切割-RNA-专一位点

       核酶切割 RNA 专一位点             实验材料 合成的核酶分子 切割底物RNA 试剂、试剂盒

核酶切割-RNA-专一位点

实验材料 合成的核酶分子切割底物RNA试剂、试剂盒 Tris-HClMgCl2实验步骤 一、材料与设备1)500 mmol/LTris-HCl(pH7.4)2)100 mmol/LMgCl23) 合成的核酶分子4) 切割底物 RNA二、操作方法1) 制备切割混合构:不超过 l0 pmol 底物 RN

脱氧核酶切割-RNA-专一位点

            实验材料 脱氧核酶 无RNA酶的DMA酶 切割底物RNA 试剂、试剂盒 5X反应缓冲液

脱氧核酶切割-RNA-专一位点

实验材料 脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒 5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实验步骤 一、材料与设备1) 脱氧核酶 (其设计与制格参见脱氧核酶相关章节)2)5X 反应缓冲液:750Tnmol/LNaCl,200 mmol/LTris-HCl (pH8.0)3)5

3.7-核酶切割-RNA-专一位点

核酶是获得长片段 RNA 特定位点切割产物的有用工具,可用于研究 RNA 修饰,修饰位点分析,以及获得具布不间长度末端的 RNA 转录产物。实验材料合成的核酶分子切割底物RNA试剂、试剂盒Tris-HClMgCl2实验步骤一、材料与设备1)500 mmol/LTris-HCl(pH7.4)2)100

关于位点特异性重组的基因的表达调控介绍

  如果一个DNA分子上两个特异位点之间发生重组,其后果有两种可能性:两个位点之间的节段或被丢失,或被颠倒。有些生物能够利用这种重组倒置来控制基因的表达。因为DNA的一正一倒两种排列法可以相应地表达两种不同的蛋白质,细胞就可根据需要作出选择。奇怪的是,利用这种机制所调节的蛋白质往往都位于生物的体表。

关于位点特异性重组的整合和切出的介绍

  attB由称为BOB’的序列组成,而attP由POP'组成。O是核心序列,是attB和attP所共同的。而其两侧的序列是B,B’和P,P’,被称为臂。噬菌体DNA是环状的,重组时被整合入细菌染色体中,成为线性序列。前病毒的两侧是两个新的杂种att位点,左侧称为attL,由BOP’组成,而

分子遗传学词汇位点专一诱变

中文名称:位点专一诱变英文名称:site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定  义:使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

3.8-脱氧核酶切割-RNA-专一位点

脱氧核酶是一类由三十几个脱氧核苷酸构成的寡聚脱氧核糖核苷酸,制备容易,使用方便,是体外在特定位点切割 RNA 的有效方法。常用于体外切割 RNA 底物的脱氧核酶是「10~23」型脱氧核酶。实验材料脱氧核酶无RNA酶的DMA酶切割底物RNA试剂、试剂盒5X反应缓冲液5X乙酸镁或氯化镁无水乙醇水饱和酚实

位点特异性重组的简介

  位点特异性重组(site-specific recombination)是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会,重组也只发生在同源的短序列的范围之内,需要位点特异性的蛋白质分子参与催化,重组的蛋白不是rec 系统而是int 等,如噬菌体l 的定点插入。重组时发生精确的切割、连接反应

关于转座重组的基本介绍

  1944年,McClintock(1983年诺贝尔生理学或医学奖获得者)在研究玉米基因时发现:有些DNA片段可以在染色体DNA中移动位置。现已阐明:基因组DNA巾存在一些非游离的、能自复制或自剪切、并能以相同或不同拷贝在基因组中或基因组间移动位置的功能性片段,被称为转座元件( transposa

关于重组修复的基本介绍

  重组修复(recombination repairing):复制含有嘧啶二聚体或其它结构损伤的DNA,但当复制到损伤的部位时,子代DNA链中与损伤部位相对应的部位出现缺口,新合成的子链比未损伤的DNA链要短一些。完整的母链与有缺口的子链重组,缺口由母链来的核苷酸片段弥补。合成重组后,母链中的缺口

关于同源重组的基本介绍

  同源重组( homologous recombination)是指发生在两段同源序列之间的DNA片段交换。两段同源序列既可以完全相同,也可以存在差异,既可以位于两个DNA分子上,也可以位于一个DNA分子中。真核生物的同源染色体交换及姐妹染色单体交换、细菌的转导和转化、噬菌体的重组都属于同源重组。

位点特异性重组的整合酶和IHF的介绍

  在att上都有特定的结合位点,体外实验也证明这两种蛋白质结合在attDNA的特定位点上。每一次重组过程需要20-40个整合酶分子及约70个IHF分子。故可能这两种蛋白质不仅是作为酶(发挥催化作用),而且在每次重组中都要形成某种复合物结构。通过缺失实验,证明attP至少要约250bp长,太短将使其

核糖体结合位点的基本介绍

  核糖体结合位点(ribosomebinding site,简称RBS),是指mRNA的起始AUG上游约8~13核苷酸处,存在一段由4~9个核苷酸组成的共有序列-AGGAGG-,可被16SrRNA通过碱基互补精确识别的序列。  核糖体结合位点是指起始密码子AUG上游的一段富含嘌呤的非翻译区。包含S

关于基因重组疫苗的基本介绍

  发生在生物体内基因的交换或重新组合。包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。是生物遗传变异的一种机制。  指整段DNA在细胞内或细胞间,甚至在不同物种之间进行交换,并能在新的位置上复制、转录和翻译。在进化、繁殖、病毒感染、基因表达以致癌基因激活等过程中,基因重组都起重要作用。基因重

关于多克隆位点的应用介绍

  多克隆位点,是指载体上含有的一个人工合成的DNA片段,其上含有多个单一酶切位点,是外源DNA的插入部位,具备条件:是载体中的一段碱基序列,由数个酶切位点组成,这些位点在载体上都是单一位点。  多克隆位点(multiple cloning site, MCS),是包含多个(最多20个)限制性酶切位

简述位点特异性重组的最终结果

  其结果是G(+)和G(-)噬菌体对不同株E.coli有不同的特异性。在G(+)方向,基因S和U表达,其产物使噬菌体可吸附在E.coliK12上,但不能吸附在E.coliC上,反之,在G(-)方向,基因S’和U’表达,噬菌体可吸附在E.coliC上,而不能吸附在E.coliK12上。各蛋白质的分子

关于DNA重组的基本信息介绍

  DNA重组(DNA recombination)实质上指的是遗传重组(genetic recombination),也称为遗传改组(genetic reshuffling),是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生